摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7页 |
英文缩略词表 | 第9-14页 |
引言 | 第14-15页 |
第一章 绪论 | 第15-19页 |
1.1 乳腺癌简介 | 第15-16页 |
1.1.1 乳腺癌的特征 | 第15页 |
1.1.2 乳腺癌的治疗方法 | 第15-16页 |
1.1.3 乳腺癌内分泌治疗简介 | 第16页 |
1.1.4 乳腺癌耐药性简介 | 第16页 |
1.2 他莫昔芬简介 | 第16-17页 |
1.3 SOCS家族及SOCS3简介 | 第17页 |
1.4 SOCS3抑制细胞因子信号的分子机制 | 第17-19页 |
第二章 理论分析 | 第19-28页 |
2.1 乳腺癌内分泌治疗产生耐药性的机制分析 | 第19页 |
2.2 SOCS3在疾病中的作用 | 第19-20页 |
2.2.1 SOCS3在炎症疾病中的作用 | 第19-20页 |
2.2.2 SOCS3在肥胖病中的作用 | 第20页 |
2.2.3 SOCS3在病毒感染性疾病中的作用 | 第20页 |
2.2.4 SOCS3与生殖的关系 | 第20页 |
2.3 SOCS3在恶性肿瘤中的作用 | 第20-22页 |
2.4 构建SOCS3过表达细胞株理论研究 | 第22-24页 |
2.4.1 慢病毒法构建SOCS3过表达细胞株 | 第22-23页 |
2.4.2 SOCS3过表达细胞株筛选(双重筛选) | 第23页 |
2.4.3 SOCS3过表达细胞株培养 | 第23-24页 |
2.5 相关实验原理 | 第24-28页 |
2.5.1 细胞集落(克隆)形成实验 | 第24页 |
2.5.2 MTT实验 | 第24-25页 |
2.5.3 RT-PCR实验 | 第25-26页 |
2.5.4 蛋白免疫印记法(western blot) | 第26页 |
2.5.5 细胞粘附实验 | 第26-27页 |
2.5.6 细胞迁移(划痕)实验 | 第27页 |
2.5.7 细胞侵袭(Boyden Chamber)实验 | 第27-28页 |
第三章 实验研究 | 第28-46页 |
3.1 材料 | 第28-34页 |
3.1.1 实验材料 | 第28-30页 |
3.1.2 样本信息 | 第30页 |
3.1.3 仪器设备 | 第30-31页 |
3.1.4 试剂及耗材 | 第31-33页 |
3.1.5 试剂配制 | 第33-34页 |
3.2 实验方法 | 第34-46页 |
3.2.1 细胞培养 | 第34-35页 |
3.2.2 SOCS3过表达乳腺癌细胞株的建立 | 第35页 |
3.2.3 MTT检测 | 第35-36页 |
3.2.4 细胞克隆形成率检测 | 第36-37页 |
3.2.5 细胞粘附 | 第37-38页 |
3.2.6 细胞迁移(划痕实验) | 第38页 |
3.2.7 细胞侵袭 | 第38-39页 |
3.2.8 荧光定量PCR检测相关基因mRNA水平变化 | 第39-43页 |
3.2.9 免疫印迹检测相关基因蛋白水平变化 | 第43-46页 |
第四章 数据处理与结果 | 第46-65页 |
4.1 细胞培养 | 第46页 |
4.2 SOCS3过表达乳腺癌细胞株的建立 | 第46-49页 |
4.3 细胞增殖的MTT检测 | 第49-50页 |
4.4 细胞克隆形成能力检测结果 | 第50-51页 |
4.5 细胞粘附实验结果 | 第51-52页 |
4.6 细胞迁移(划痕实验)结果 | 第52-54页 |
4.7 细胞侵袭结果 | 第54-55页 |
4.8 荧光定量PCR检测细胞相关基因MRNA的水平变化 | 第55-61页 |
4.9 WESTERN BLOT检测细胞相关基因蛋白水平的变化 | 第61-63页 |
4.10 讨论 | 第63-65页 |
第五章 结论 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-76页 |
附录A 攻读硕士期间发表的论文 | 第76-77页 |
附录B 其它需要说明的内容 | 第77页 |