| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 1 引言 | 第10-22页 |
| ·植物抗旱性研究进展 | 第10-13页 |
| ·植物抗旱的生理基础 | 第10-11页 |
| ·植物抗旱的分子生物学基础 | 第11-13页 |
| ·全长cDNA 文库技术及其应用 | 第13-19页 |
| ·全长cDNA 文库的构建方法 | 第13-17页 |
| ·CAPture 方法 | 第13-14页 |
| ·Oligo-Capping 方法 | 第14页 |
| ·Cap-jumping 方法 | 第14-15页 |
| ·SMART 方法 | 第15-16页 |
| ·CAP-Trapper 方法 | 第16-17页 |
| ·全长cDNA 文库的应用 | 第17-19页 |
| ·进行基因功能注释 | 第17-18页 |
| ·进行功能基因组研究 | 第18页 |
| ·进行表达谱分析 | 第18页 |
| ·进行比较基因组研究 | 第18-19页 |
| ·沙冬青抗逆性分子生物学研究进展 | 第19-22页 |
| ·沙冬青简介 | 第19页 |
| ·沙冬青抗冻蛋白的分离、纯化与鉴定 | 第19-21页 |
| ·沙冬青抗逆相关基因的克隆与功能分析 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-33页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·植物材料及其处理 | 第22-23页 |
| ·试剂与酶 | 第23页 |
| ·培养基与溶液及其配制 | 第23-24页 |
| ·引物 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-32页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第24-26页 |
| ·mRNA 的分离纯化 | 第26页 |
| ·SMART 全长cDNA 文库的构建 | 第26-32页 |
| ·原始文库的环化及测序 | 第32-33页 |
| ·阳性克隆的序列测定 | 第33页 |
| ·序列分析 | 第33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-41页 |
| ·蒙古沙冬青总RNA 的提取及mRNA 分离纯化 | 第33-36页 |
| ·总 RNA 提取方法的改进 | 第33-34页 |
| ·总 RNA 的提取及检测 | 第34-35页 |
| ·mRNA 的分离纯化 | 第35-36页 |
| ·蒙古沙冬青 SMART 全长cDNA 文库的构建 | 第36-38页 |
| ·cDNA 的合成 | 第36页 |
| ·cDNA 的分级回收及其与载体连接 | 第36-37页 |
| ·连接产物的包装及文库的检测 | 第37-38页 |
| ·原始文库插入片段检测 | 第38页 |
| ·原始文库的扩增和滴度检测 | 第38页 |
| ·蒙古沙冬青 SMART cDNA 文库的环化、测序及序列分析 | 第38-41页 |
| ·原始文库的环化 | 第38-39页 |
| ·阳性克隆测序及序列分析 | 第39-40页 |
| ·Unigene 的功能注释与分类 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| ·关于总RNA 提取及mRNA 的分离与纯化 | 第41-42页 |
| ·构建SMART 全长cDNA 文库的技术问题 | 第42-43页 |
| ·全长cDNA 文库的质量评估 | 第43-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |