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脱落酸和乙烯在拟南芥气孔调节上的互作机制研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
缩写词第8-13页
1 前言第13-27页
    1.1 气孔与气孔运动第13页
    1.2 ABA信号转导与气孔运动第13-18页
        1.2.1 ABA受体成员第14-16页
        1.2.2 SnRK2激酶和PP2C A型磷酸酶第16-17页
        1.2.3 ABA信号调控离子通道和气孔关闭第17-18页
    1.3 乙烯信号转导研究进展第18-24页
        1.3.1 乙烯的生物功能及合成第18-19页
        1.3.2 乙烯受体家族第19-20页
        1.3.3 CTR1和MAPK信号级联第20-21页
        1.3.4 EIN2: 乙烯信号从内质网向细胞核传递的桥梁第21-22页
        1.3.5 乙烯信号重要的转录因子EIN3/EILs第22页
        1.3.6 F-box蛋白EBF1/EBF2、ETP1/ETP2介导的 26S蛋白酶途径第22-24页
    1.4 ABA信号与乙烯信号交叉机制研究进展第24-25页
    1.5 立题依据第25-27页
2 材料与方法第27-45页
    2.1 实验仪器设备第27-28页
    2.2 实验材料第28页
    2.3 常用实验试剂第28页
    2.4 常用溶液及培养基的配制第28-32页
        2.4.1 常用溶液的配制第28-29页
        2.4.2 常用培养基的配制第29页
        2.4.3 抗生素的配制第29页
        2.4.4 酵母双杂交相关溶液的配制第29-31页
        2.4.5 拟南芥原生质体分离及瞬时转化相关溶液的配制第31页
        2.4.6 蛋白表达纯化相关溶液的配制第31-32页
    2.5 实验所用的引物第32-34页
    2.6 实验方法第34-45页
        2.6.1 拟南芥的培养第34页
        2.6.2 拟南芥总RNA的提取(Trizol法)第34-35页
        2.6.3 反转录制备拟南芥cDNA第35页
        2.6.4 目的基因的扩增第35-36页
        2.6.5 1%琼脂糖凝胶的配制及电泳第36-37页
        2.6.6 琼脂糖凝胶电泳DNA的回收(Takara Agarose Gel DNA Purification Kit)第37页
        2.6.7 质粒的小量提取第37-38页
        2.6.8 酶切产物的连接(参照Takara DNA Ligation Kit Ver.2.0)第38-39页
        2.6.9 大肠杆菌超级感受态细胞的制备与转化第39页
        2.6.10 酵母感受态细胞制备、转化及显色反应第39-41页
        2.6.11 拟南芥原生质体的分离和瞬时转化第41-42页
        2.6.12 激光共聚焦显微镜观察双分子荧光互补第42页
        2.6.13 蛋白原核表达提取与纯化第42页
        2.6.14 蛋白免疫印迹(Western Blot)第42-45页
3 结果与分析第45-57页
    3.1 乙烯相关突变体干旱失水表型分析第45-48页
    3.2 酵母双杂交相关载体的构建第48-49页
    3.3 酵母双杂交显色反应第49-50页
    3.4 双分子荧光互补载体的构建第50-51页
    3.5 双分子荧光互补实验第51-53页
    3.6 融合蛋白表达载体的构建第53-54页
    3.7 MKK4融合蛋白表达纯化第54-57页
4 讨论第57-59页
    4.1 乙烯诱导拟南芥气孔关闭提高抗旱能力第57页
    4.2 OST1与乙烯信号途径中的成员存在互作关系第57-59页
5 结论第59-61页
参考文献第61-71页
致谢第71页

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