摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩写词 | 第8-13页 |
1 前言 | 第13-27页 |
1.1 气孔与气孔运动 | 第13页 |
1.2 ABA信号转导与气孔运动 | 第13-18页 |
1.2.1 ABA受体成员 | 第14-16页 |
1.2.2 SnRK2激酶和PP2C A型磷酸酶 | 第16-17页 |
1.2.3 ABA信号调控离子通道和气孔关闭 | 第17-18页 |
1.3 乙烯信号转导研究进展 | 第18-24页 |
1.3.1 乙烯的生物功能及合成 | 第18-19页 |
1.3.2 乙烯受体家族 | 第19-20页 |
1.3.3 CTR1和MAPK信号级联 | 第20-21页 |
1.3.4 EIN2: 乙烯信号从内质网向细胞核传递的桥梁 | 第21-22页 |
1.3.5 乙烯信号重要的转录因子EIN3/EILs | 第22页 |
1.3.6 F-box蛋白EBF1/EBF2、ETP1/ETP2介导的 26S蛋白酶途径 | 第22-24页 |
1.4 ABA信号与乙烯信号交叉机制研究进展 | 第24-25页 |
1.5 立题依据 | 第25-27页 |
2 材料与方法 | 第27-45页 |
2.1 实验仪器设备 | 第27-28页 |
2.2 实验材料 | 第28页 |
2.3 常用实验试剂 | 第28页 |
2.4 常用溶液及培养基的配制 | 第28-32页 |
2.4.1 常用溶液的配制 | 第28-29页 |
2.4.2 常用培养基的配制 | 第29页 |
2.4.3 抗生素的配制 | 第29页 |
2.4.4 酵母双杂交相关溶液的配制 | 第29-31页 |
2.4.5 拟南芥原生质体分离及瞬时转化相关溶液的配制 | 第31页 |
2.4.6 蛋白表达纯化相关溶液的配制 | 第31-32页 |
2.5 实验所用的引物 | 第32-34页 |
2.6 实验方法 | 第34-45页 |
2.6.1 拟南芥的培养 | 第34页 |
2.6.2 拟南芥总RNA的提取(Trizol法) | 第34-35页 |
2.6.3 反转录制备拟南芥cDNA | 第35页 |
2.6.4 目的基因的扩增 | 第35-36页 |
2.6.5 1%琼脂糖凝胶的配制及电泳 | 第36-37页 |
2.6.6 琼脂糖凝胶电泳DNA的回收(Takara Agarose Gel DNA Purification Kit) | 第37页 |
2.6.7 质粒的小量提取 | 第37-38页 |
2.6.8 酶切产物的连接(参照Takara DNA Ligation Kit Ver.2.0) | 第38-39页 |
2.6.9 大肠杆菌超级感受态细胞的制备与转化 | 第39页 |
2.6.10 酵母感受态细胞制备、转化及显色反应 | 第39-41页 |
2.6.11 拟南芥原生质体的分离和瞬时转化 | 第41-42页 |
2.6.12 激光共聚焦显微镜观察双分子荧光互补 | 第42页 |
2.6.13 蛋白原核表达提取与纯化 | 第42页 |
2.6.14 蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第42-45页 |
3 结果与分析 | 第45-57页 |
3.1 乙烯相关突变体干旱失水表型分析 | 第45-48页 |
3.2 酵母双杂交相关载体的构建 | 第48-49页 |
3.3 酵母双杂交显色反应 | 第49-50页 |
3.4 双分子荧光互补载体的构建 | 第50-51页 |
3.5 双分子荧光互补实验 | 第51-53页 |
3.6 融合蛋白表达载体的构建 | 第53-54页 |
3.7 MKK4融合蛋白表达纯化 | 第54-57页 |
4 讨论 | 第57-59页 |
4.1 乙烯诱导拟南芥气孔关闭提高抗旱能力 | 第57页 |
4.2 OST1与乙烯信号途径中的成员存在互作关系 | 第57-59页 |
5 结论 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-71页 |
致谢 | 第71页 |