| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩写词 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-25页 |
| 1.1 磷的生物学功能 | 第11-12页 |
| 1.1.1 磷是组成体内大分子的底物 | 第11页 |
| 1.1.2 磷是体内代谢活动的参与者 | 第11页 |
| 1.1.3 磷能提高植物的抗逆性 | 第11-12页 |
| 1.2 土壤中磷含量与分布现状 | 第12页 |
| 1.3 植物对磷胁迫的适应性机制 | 第12-15页 |
| 1.3.1 形态适应性 | 第12-14页 |
| 1.3.2 生理生化适应性 | 第14-15页 |
| 1.4 低磷胁迫的调控网络 | 第15-22页 |
| 1.4.1 磷信号中miRNA的作用 | 第15-20页 |
| 1.4.2 磷信号中的转录因子 | 第20-21页 |
| 1.4.3 激素与磷信号 | 第21-22页 |
| 1.4.4 糖与磷信号 | 第22页 |
| 1.5 论文的选题意义及依据 | 第22-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-45页 |
| 2.1 实验设备 | 第25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第25-26页 |
| 2.2.2 载体和菌株 | 第26页 |
| 2.3 实验试剂 | 第26页 |
| 2.4 DNA测序及引物的合成 | 第26-28页 |
| 2.5 常用培养基与溶液的配制 | 第28-32页 |
| 2.5.1 常用培养基 | 第28-29页 |
| 2.5.2 常用溶液的配制 | 第29-30页 |
| 2.5.3 抗生素溶液的配制 | 第30页 |
| 2.5.4 分离拟南芥叶肉原生质体及瞬时表达相关溶液 | 第30页 |
| 2.5.5 磷含量测定溶液 | 第30-31页 |
| 2.5.6 酵母单杂交实验所需溶液 | 第31-32页 |
| 2.5.7 GUS染液试剂 | 第32页 |
| 2.5.8 GUS酶活测定溶液 | 第32页 |
| 2.6 实验方法 | 第32-45页 |
| 2.6.1 拟南芥的培育方法 | 第32-33页 |
| 2.6.2 低磷培养基的配制及低磷胁迫方法 | 第33页 |
| 2.6.3 pH原位显示法 | 第33页 |
| 2.6.4 拟南芥杂交方法 | 第33-34页 |
| 2.6.5 无机磷浓度的测定 | 第34页 |
| 2.6.6 花青素含量的测定 | 第34页 |
| 2.6.7 β-葡糖苷酸酶（GUS）的组织化学染色 | 第34-35页 |
| 2.6.8 拟南芥总RNA提取（TRIZOL法） | 第35页 |
| 2.6.9 拟南芥RNA反转录成cDNA | 第35-36页 |
| 2.6.10 实时定量qRT-PCR检测基因表达 | 第36-37页 |
| 2.6.11 构建重组载体 | 第37-38页 |
| 2.6.12 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备与转化 | 第38-39页 |
| 2.6.13 重组质粒的验证 | 第39-40页 |
| 2.6.14 农杆菌转染拟南芥植株 | 第40页 |
| 2.6.15 转基因植株的筛选 | 第40-41页 |
| 2.6.16 瞬时表达分析实验（转原生质体法） | 第41-42页 |
| 2.6.17 酵母单杂交实验 | 第42-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-59页 |
| 3.1 低磷胁迫下 35S:MIM156与 35S: rSPL9突变体表型分析 | 第45-47页 |
| 3.1.1 低磷胁迫下 35S:MIM156与 35S:rSPL9突变体中无机磷含量升高 | 第45-46页 |
| 3.1.2 低磷胁迫下 35S:MIM156与 35S:rSPL9突变体根际酸化能力缺失 | 第46-47页 |
| 3.1.3 低磷胁迫下 35S:MIM156与 35S:rSPL9突变体花青素积累减少 | 第47页 |
| 3.1.4 低磷胁迫下 35S:MIM156与 35S:rSPL9突变体侧根长度和数目减少 | 第47页 |
| 3.2 miR156-SPL9参与低磷调控 | 第47-49页 |
| 3.3 miR399、miR156以及SPL9表达模式分析 | 第49-50页 |
| 3.4 miR399前体基因在 35S:MIM156与 35S:rSPL9突变体中的表达量 | 第50-52页 |
| 3.5 miR399前体基因启动子GTAC motif分析 | 第52-53页 |
| 3.6 SPL9直接调控miR399f表达 | 第53-55页 |
| 3.6.1 酵母单杂交结果 | 第53-54页 |
| 3.6.2 瞬时表达分析结果 | 第54-55页 |
| 3.7 SPL9::S1300-myc转基因材料载体的构建 | 第55-56页 |
| 3.8 低磷及低氮条件下突变体中的无机磷含量 | 第56-59页 |
| 4 讨论 | 第59-63页 |
| 4.1 miR156在调控植物低磷应答过程中有重要作用 | 第59页 |
| 4.2 SPL基因存在功能冗余 | 第59页 |
| 4.3 miR156-SPL9通过调节miR399参与了低磷调控 | 第59-60页 |
| 4.4 miR156-SPL9调控部分miR399前体基因 | 第60页 |
| 4.5 miR156可能作为组织者参与营养胁迫应答 | 第60页 |
| 4.6 miR156与miR827可能存在一定调控关系 | 第60-63页 |
| 5 结论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
