拟南芥中逆境胁迫基因的筛选及功能初步分析
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩写词 | 第8-12页 |
| 1 前言 | 第12-28页 |
| 1.1 植物对逆境胁迫的应答机制 | 第12-13页 |
| 1.2 植物低温应答研究现状 | 第13-21页 |
| 1.2.1 低温对植物的伤害 | 第13-14页 |
| 1.2.2 低温信号的感知 | 第14-16页 |
| 1.2.3 参与低温胁迫响应的第二信使 | 第16-17页 |
| 1.2.4 转录调控 | 第17-18页 |
| 1.2.5 转录后调控 | 第18-19页 |
| 1.2.6 翻译后调控 | 第19-20页 |
| 1.2.7 低温响应和植物激素 | 第20-21页 |
| 1.3 盐胁迫对植物的影响 | 第21-22页 |
| 1.4 干旱胁迫对植物的影响 | 第22页 |
| 1.5 ABA在逆境胁迫中的作用 | 第22-23页 |
| 1.6 Ca~(2+)信号及其测量 | 第23-25页 |
| 1.6.1 Ca~(2+)信号的特点 | 第23-24页 |
| 1.6.2 Ca~(2+)浓度的检测 | 第24-25页 |
| 1.7 NLP家族简介 | 第25-28页 |
| 2 立题依据 | 第28-30页 |
| 3 材料与方法 | 第30-46页 |
| 3.1 实验材料 | 第30页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第30页 |
| 3.1.2 质粒、载体和菌株 | 第30页 |
| 3.1.3 试剂 | 第30页 |
| 3.2 实验设备 | 第30-31页 |
| 3.3 常用培养基及溶液 | 第31-32页 |
| 3.3.1 常用培养基 | 第31页 |
| 3.3.2 常用的溶液 | 第31-32页 |
| 3.4 PCR引物 | 第32-34页 |
| 3.5 生物信息学分析 | 第34-35页 |
| 3.5.1 常用的生物学软件 | 第34页 |
| 3.5.2 生物信息学分析网站 | 第34-35页 |
| 3.6 实验方法 | 第35-46页 |
| 3.6.1 材料的种植 | 第35页 |
| 3.6.2 T-DNA插入纯合体鉴定 | 第35-36页 |
| 3.6.3 拟南芥基因组DNA的提取 | 第36页 |
| 3.6.4 PCR扩增体系 | 第36-38页 |
| 3.6.5 杂交 | 第38-39页 |
| 3.6.6 拟南芥总RNA的提取 | 第39页 |
| 3.6.7 RNA反转录cDNA | 第39-40页 |
| 3.6.8 感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| 3.6.9 转化 | 第41页 |
| 3.6.10 载体的构建 | 第41-43页 |
| 3.6.11 农杆菌转染拟南芥 | 第43页 |
| 3.6.12 转基因植株的筛选 | 第43-44页 |
| 3.6.13 胞质Ca~(2+)浓度的检测 | 第44-46页 |
| 4 结果与分析 | 第46-62页 |
| 4.1 逆境胁迫调控基因的筛选 | 第46-48页 |
| 4.2 拟南芥T-DNA插入突变体的获得 | 第48-50页 |
| 4.3 纯合体鉴定 | 第50-51页 |
| 4.4 低温刺激时突变体Ca~(2+)浓度检测 | 第51-53页 |
| 4.4.1 转水母发光蛋白株系的获得 | 第51-52页 |
| 4.4.2 胞质Ca~(2+)浓度检测 | 第52-53页 |
| 4.5 逆境胁迫时突变基因功能分析 | 第53-54页 |
| 4.6 AtARG10功能分析 | 第54-62页 |
| 4.6.1 AtARG10生物信息学分析 | 第55-57页 |
| 4.6.2 胞质Ca~(2+)浓度检测 | 第57页 |
| 4.6.3 根伸长分析 | 第57页 |
| 4.6.4 萌发及子叶变绿分析 | 第57-59页 |
| 4.6.5 生长发育情况 | 第59页 |
| 4.6.6 AtARG10突变体编码信息 | 第59-60页 |
| 4.6.7 相关载体的构建 | 第60-62页 |
| 5 讨论 | 第62-64页 |
| 5.1 目的基因的筛选 | 第62页 |
| 5.2 胞质Ca~(2+)浓度的检测 | 第62-63页 |
| 5.3 逆境胁迫突变体的分析 | 第63-64页 |
| 6 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
