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拟南芥LecRK-8A基因调控种子大小分子机理研究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
缩略词第14-16页
第1章 绪论第16-31页
    1.1 受体蛋白激酶第16-17页
    1.2 凝集素类受体蛋白激酶第17-19页
        1.2.1 Lec RK结构第17-18页
        1.2.2 Lec RK信号转导途径第18-19页
    1.3 Lec RK生理功能第19-24页
        1.3.1 参与抗病虫响应第19-21页
        1.3.2 参与固氮反应第21页
        1.3.3 参与非生物胁迫响应第21-22页
        1.3.4 参与植物激素信号通路的调控第22-23页
        1.3.5 参与植物生长发育的调节第23-24页
    1.4 拟南芥种子发育调控第24-29页
        1.4.1 BR参与的种子发育调控过程第24-25页
        1.4.2 CTK参与的种子发育调控过程第25-26页
        1.4.3 AUX参与的种子发育调控过程第26页
        1.4.4 ABA参与的种子发育调控过程第26-27页
        1.4.5 泛素化途径调控种子发育第27-28页
        1.4.6 其他因子调控种子大小第28-29页
    1.5 本论文的目的、意义及内容第29-31页
第2章 Lec RK-8A生物信息学分析第31-37页
    2.1 实验材料第31页
    2.2 实验方法第31-32页
        2.2.1 不同时期及不同组织表达分析第31页
        2.2.2 启动子顺式作用元件分析第31页
        2.2.3 蛋白结构及亚细胞定位分析第31-32页
    2.3 实验结果第32-35页
        2.3.1 不同时期及不同组织表达分析第32页
        2.3.2 启动子顺式作用元件分析第32-34页
        2.3.3 蛋白结构及亚细胞定位分析第34-35页
    2.4 讨论第35页
    2.5 小结第35-37页
第3章 Lec RK-8A缺失突变体鉴定及过表达株系构建第37-50页
    3.1 实验材料、试剂与仪器第37-40页
        3.1.1 实验材料第37页
        3.1.2 实验试剂第37-39页
        3.1.3 实验仪器第39-40页
    3.2 实验方法第40-46页
        3.2.1 DNA提取第40页
        3.2.2 三引物法PCR第40页
        3.2.3 高保真PCR(Primer STAR)第40-41页
        3.2.4 DNA纯化第41页
        3.2.5 Gateway法构建载体第41-42页
        3.2.6 大肠杆菌热激转化第42页
        3.2.7 菌液PCR第42-43页
        3.2.8 质粒提取第43页
        3.2.9 农杆菌电击转化第43-44页
        3.2.10 拟南芥花絮转染第44页
        3.2.11 转基因株系筛选第44页
        3.2.12 RNA提取第44-45页
        3.2.13 RNA逆转录第45页
        3.2.14 RT-PCR第45-46页
    3.3 实验结果第46-48页
        3.3.1 缺失突变体鉴定第46-47页
        3.3.2 过表达株系构建第47-48页
    3.4 讨论第48-49页
    3.5 本章小结第49-50页
第4章 Lec RK-8A参与种子大小调控研究第50-58页
    4.1 实验材料、试剂与仪器第51页
        4.1.1 实验材料第51页
        4.1.2 实验仪器第51页
        4.1.3 实验试剂第51页
    4.2 实验方法第51-53页
        4.2.1 拟南芥培养及收种第51-52页
        4.2.2 种子大小测量第52页
        4.2.3 种子的显微观察第52页
        4.2.4 成熟绿色果荚种子的观察第52页
        4.2.5 百粒重统计第52页
        4.2.6 不同发育时期胚的显微观察第52页
        4.2.7 杂交第52-53页
    4.3 实验结果第53-56页
        4.3.1 Lec RK-8A影响种子大小第53-54页
        4.3.2 Lec RK-8A在球形胚期之前开始调控种子发育过程第54-55页
        4.3.3 Lec RK-8A母系影响种子发育过程第55-56页
    4.4 讨论第56-57页
    4.5 本章小结第57-58页
第5章 Lec RK-8a调控种子发育分子机制研究第58-71页
    5.1 试验材料、试剂及方法第59-60页
        5.1.1 实验材料第59页
        5.1.2 实验试剂第59-60页
        5.1.3 实验仪器第60页
    5.2 实验方法第60-64页
        5.2.1 35S::Lec RK-8A-GFP载体构建第60-62页
        5.2.2 proLec RK-8A::GUS载体构建第62-63页
        5.2.3 ABA及BR处理野生型幼苗及RNA提取和逆转录第63页
        5.2.4 果荚RNA提取第63-64页
    5.3 实验结果第64-68页
        5.3.1 35S::Lec RK-8A-GFP载体构建成功第64-65页
        5.3.2 ProLec RK-8A::GUS载体成功构建第65-66页
        5.3.3 Lec RK-8A通过调控MINI3表达影响种子发育第66页
        5.3.4 Lec RK-8A与ABI5弥补调控机制探究第66-68页
    5.4 讨论第68-70页
    5.5 本章小结第70-71页
结论第71-72页
参考文献第72-81页
附录 攻读学位期间所发表学术论文目录第81-83页
致谢第83页

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