| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-34页 |
| ·引言 | 第15-16页 |
| ·拟除虫菊酯类杀虫剂概述 | 第16-19页 |
| ·拟除虫菊酯杀虫剂的发展 | 第16页 |
| ·拟除虫菊酯杀虫物活性及主要品种物理性质 | 第16-17页 |
| ·拟除虫菊酯杀虫剂的作用方式和毒力 | 第17-18页 |
| ·拟除虫菊酯杀虫剂的残留及危害 | 第18-19页 |
| ·拟除虫菊酯杀虫剂残留的降解研究 | 第19-20页 |
| ·化学农药的微生物降解研究 | 第20-24页 |
| ·微生物与农药的作用方式 | 第20-22页 |
| ·影响微生物降解农药的因素 | 第22-23页 |
| ·微生物降解农药的作用机理 | 第23-24页 |
| ·拟除虫菊酯类农药残留的微生物降解研究 | 第24-32页 |
| ·拟除虫菊酯降解微生物的分离 | 第25-26页 |
| ·拟除虫菊酯农药的微生物降解途径 | 第26-31页 |
| ·拟除虫菊酯降解酶研究 | 第31页 |
| ·拟除虫菊酯降解基因的相关研究 | 第31-32页 |
| ·高效氯氟氰菊酯（Lambda-cyhalothrin）简介 | 第32-33页 |
| ·本文研究的目的与意义 | 第33-34页 |
| 第二章 拟除虫菊酯农药降解菌的分离与鉴定 | 第34-42页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·菌株、载体和环境样品 | 第34页 |
| ·培养基 | 第34页 |
| ·试剂与化学药品 | 第34页 |
| ·实验主要仪器 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-37页 |
| ·拟除虫菊酯降解菌株的富集与分离 | 第35页 |
| ·拟除虫菊酯降解菌株的鉴定 | 第35-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-40页 |
| ·高效氯氟氰菊酯降解菌的分离与筛选 | 第37页 |
| ·降解菌的形态特征与生理生化鉴定 | 第37-39页 |
| ·降解菌株 YZ-1 的 16S rDNA 分子发育鉴定 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 菌株 Ochrobactrum anthropi YZ-1 的降解特性测定 | 第42-56页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·实验菌株 | 第42页 |
| ·培养基 | 第42页 |
| ·药品与试剂 | 第42页 |
| ·试剂配制 | 第42页 |
| ·实验仪器 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-45页 |
| ·菌株 YZ-1 生长曲线的测定 | 第43页 |
| ·菌株 YZ-1 种子悬液的制备 | 第43页 |
| ·高效氯氟氰菊酯标准曲线的配制 | 第43页 |
| ·环境因子对菌株 YZ-1 降解能力的影响 | 第43-44页 |
| ·菌株 YZ-1 对不同浓度高效氯氟氰菊酯的降解 | 第44页 |
| ·菌株 YZ-1 对不同拟除虫菊酯底物的降解 | 第44页 |
| ·外加碳源或氮源对菌株 YZ-1 降解能力的影响 | 第44-45页 |
| ·菌株 YZ-1 对 3-苯氧基苯甲酸的降解 | 第45页 |
| ·高效氯氟氰菊酯残留的提取和气相色谱测定 | 第45页 |
| ·3-苯氧基苯甲酸残留的提取和高效液相色谱测定 | 第45页 |
| ·高效氯氰菊酯代谢中间产物的检测 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-55页 |
| ·高效氯氟氰菊酯标准曲线的绘制 | 第45-47页 |
| ·菌株 YZ-1 的生长特性 | 第47页 |
| ·温度对 YZ-1 降解能力的影响 | 第47-48页 |
| ·pH 对菌株 YZ-1 降解能力的影响 | 第48-49页 |
| ·接种量对菌株 YZ-1 降解能力的影响 | 第49-50页 |
| ·菌株 YZ-1 对不同浓度高效氯氟氰菊酯的降解 | 第50-51页 |
| ·菌株 YZ-1 对不同底物的降解 | 第51-52页 |
| ·外加碳氮源对菌株 YZ-1 降解能力的影响 | 第52-53页 |
| ·菌株 YZ-1 对 3-苯氧基苯甲酸的降解 | 第53-54页 |
| ·代谢产物的薄层层析分析 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| 第四章 菌株 YZ-1 基因组文库的构建及筛选 | 第56-68页 |
| ·实验材料 | 第56-57页 |
| ·菌株与质粒 | 第56页 |
| ·培养基 | 第56页 |
| ·限制性酶和试剂 | 第56页 |
| ·试剂配制 | 第56-57页 |
| ·实验仪器 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-61页 |
| ·菌株 YZ-1 基因组 DNA 的提取 | 第57页 |
| ·菌株 YZ-1 基因组 DNA 预酶切 | 第57页 |
| ·菌株 YZ-1 基因组 DNA 的大量酶切 | 第57页 |
| ·pUC18 质粒的提取 | 第57-58页 |
| ·质粒 DNA 的完全酶切及胶回收 | 第58页 |
| ·线性克隆载体的脱磷 | 第58-59页 |
| ·重组质粒载体的构建 | 第59页 |
| ·重组载体的转化 | 第59页 |
| ·目的克隆子的筛选与鉴定 | 第59-61页 |
| ·阳性克隆的酶切鉴定与 PCR 扩增 | 第61页 |
| ·重组质粒的测序分析与亚克隆 | 第61页 |
| ·结果与分析 | 第61-67页 |
| ·基因组的提取及部分酶切 | 第61-62页 |
| ·菌株 YZ-1 基因组的大量酶切及回收 | 第62-63页 |
| ·载体 pUC18 质粒的提取及酶切 | 第63-64页 |
| ·目的片段与载体连接、转化及文库的筛选 | 第64页 |
| ·阳性转化子的酶切鉴定和 PCR 扩增 | 第64-66页 |
| ·pUC18-I 测序分析和亚克隆 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| 第五章 pytY 基因的生物信息学分析 | 第68-77页 |
| ·实验材料 | 第68页 |
| ·实验方法 | 第68-69页 |
| ·PytY 蛋白一级结构预测 | 第68页 |
| ·PytY 蛋白的二级结构预测 | 第68页 |
| ·多序列比对分析 | 第68页 |
| ·PytY 蛋白保守结构域查询 | 第68-69页 |
| ·蛋白家族预测 | 第69页 |
| ·PytY 蛋白三级结构的预测 | 第69页 |
| ·结果与讨论 | 第69-77页 |
| ·PytY 蛋白一级结构预测结果 | 第69-70页 |
| ·PytY 蛋白二级结构预测结果 | 第70-71页 |
| ·多序列比对结果 | 第71-72页 |
| ·PytY 蛋白序列保守结构域分析 | 第72页 |
| ·蛋白家族分类查询结果 | 第72-73页 |
| ·PytY 蛋白三级结构预测结果分析 | 第73-77页 |
| 第六章 pytY 基因的表达、纯化和酶学性质研究 | 第77-101页 |
| ·实验材料 | 第77-79页 |
| ·菌株和质粒 | 第77-78页 |
| ·培养基 | 第78页 |
| ·工具酶、试剂盒及其它试剂 | 第78页 |
| ·试剂配制 | 第78-79页 |
| ·主要仪器设备 | 第79页 |
| ·实验方法 | 第79-88页 |
| ·pytY 降解基因工程菌的构建 | 第79-82页 |
| ·pytY 基因的诱导表达 | 第82-84页 |
| ·pytY 基因重组蛋白的纯化及 Western Blot | 第84-85页 |
| ·酶学性质研究 | 第85-88页 |
| ·结果与分析 | 第88-99页 |
| ·目的基因 pytY 的 PCR 扩增 | 第88页 |
| ·表达载体 pET30a 的提取与酶切 | 第88-89页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第89-92页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第92页 |
| ·重组蛋白的纯化和 Western Blot 验证 | 第92-93页 |
| ·纯化重组蛋白的酶学性质测定结果 | 第93-99页 |
| ·讨论 | 第99-101页 |
| 第七章 全文总结 | 第101-104页 |
| ·研究结果 | 第101-102页 |
| ·创新点 | 第102页 |
| ·研究展望 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 作者简历 | 第114页 |
