| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 中英文缩略语 | 第5-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-21页 |
| 1. 白血病的治疗和耐药 | 第10-12页 |
| 2. 白血病干细胞 | 第12-13页 |
| 3. SP1和C-MYC的生物学特性 | 第13-18页 |
| 3.1 SP1的生物学特性 | 第14-16页 |
| 3.2 C-MYC的生物学特性 | 第16-18页 |
| 4. MICRORNA和白血病 | 第18-20页 |
| 5. 本研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二章 白血病干细胞白血病干细胞（LSC）的分离、培养和鉴定 | 第21-46页 |
| 2.1 前言 | 第21页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第21-25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-34页 |
| 2.3.1 LSC（CD34+CD38-）亚群含量的鉴定 | 第25页 |
| 2.3.2 LSC的分离 | 第25-26页 |
| 2.3.3 白血病干细胞的无血清培养 | 第26页 |
| 2.3.4 流式鉴定LSC的比例及细胞周期 | 第26页 |
| 2.3.5 多药耐药蛋白ABCB1（P-_(GP)）的检测 | 第26-27页 |
| 2.3.6 LSC耐药性的检测 | 第27页 |
| 2.3.7 软琼脂平板克隆形成实验 | 第27-28页 |
| 2.3.8 干性相关基因的检测 | 第28-30页 |
| 2.3.9 干性相关蛋白的检测 | 第30-32页 |
| 2.3.10共聚焦免疫染色 | 第32页 |
| 2.3.11裸鼠白血病模型的鉴定 | 第32-33页 |
| 2.3.12统计学分析 | 第33-34页 |
| 2.4 实验结果 | 第34-42页 |
| 2.4.1 LSC亚群含量的鉴定和分选 | 第34-35页 |
| 2.4.2 LSC的无血清培养 | 第35-36页 |
| 2.4.3 LSC细胞周期的鉴定 | 第36页 |
| 2.4.4 LSC干性基因和耐药蛋白的鉴定 | 第36-37页 |
| 2.4.5 LSC干性相关蛋白的免疫染色 | 第37-39页 |
| 2.4.6 LSC自我更新能力的鉴定 | 第39-40页 |
| 2.4.7 LSC耐药性的鉴定 | 第40页 |
| 2.4.8 裸鼠白血病模型的构建 | 第40-42页 |
| 2.5 讨论 | 第42-46页 |
| 第三章SP1和C-MYC通过SURVIVIN调控LSC的耐药性 | 第46-81页 |
| 3.1 引言 | 第46页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第46-50页 |
| 3.3 实验方法 | 第50-58页 |
| 3.3.1 细胞凋亡检测 | 第50页 |
| 3.3.2 抗凋亡蛋白芯片的检测 | 第50-51页 |
| 3.3.3 白血病患者外周血中单核细胞的分离 | 第51页 |
| 3.3.4 PCDNA3.1-SP1/C-MYC质粒构建 | 第51-52页 |
| 3.3.5 SURVIVIN启动子位点不同区域的质粒构建 | 第52-53页 |
| 3.3.6 各种点突变质粒的构建 | 第53-54页 |
| 3.3.7 SIRNA和质粒的转染 | 第54-55页 |
| 3.3.8 双荧光素酶活性分析 | 第55页 |
| 3.3.9 染色质免疫共沉淀 | 第55-57页 |
| 3.3.10统计学分析 | 第57-58页 |
| 3.4 实验结果 | 第58-76页 |
| 3.4.1 LSC 相对于 Non-LSC 具有更强的耐药性 | 第58-59页 |
| 3.4.2 SURVIVIN蛋白在LSC中特异性高表达 | 第59-64页 |
| 3.4.3 Survivin 在 LSC 抗凋亡和耐药方面的作用 | 第64-66页 |
| 3.4.4 转录和翻译过程共同调控SURVIVIN的表达 | 第66-67页 |
| 3.4.5 SURVIVIN基因启动子区域的分析 | 第67-69页 |
| 3.4.6 SP1和C-MYC共同激活SURVIVIN的转录 | 第69-71页 |
| 3.4.7 SP1功能的完整性是C-MYC激活SURVIVIN转录的前提 | 第71-72页 |
| 3.4.8 抑制SP1和C-MYC可以促进LSC的化疗敏感性 | 第72-74页 |
| 3.4.9 ERK/MSK/SP1信号轴调控SURVIVIN的表达 | 第74-76页 |
| 3.5 讨论 | 第76-81页 |
| 第四章 MICRORNA对于LSC的调的调控作用控作用 | 第81-98页 |
| 4.1 引言 | 第81页 |
| 4.2 材料与方法 | 第81-85页 |
| 4.3 实验方法 | 第85-88页 |
| 4.3.1 软琼脂平板克隆形成实验 | 第85页 |
| 4.3.2 靶蛋白 3’-UTR及突变体的构建 | 第85-86页 |
| 4.3.3 MIRNA含量的检测 | 第86页 |
| 4.3.4 双荧光素酶活性分析 | 第86-87页 |
| 4.3.5 MRNA及WESTERN实验 | 第87页 |
| 4.3.6 统计学分析 | 第87-88页 |
| 4.4 实验结果 | 第88-95页 |
| 4.4.1 MIR-203的表达分析 | 第88-89页 |
| 4.4.2 MIR-203靶向SURVIVIN的调控作用 | 第89-90页 |
| 4.4.3 MIR-203抑制LSC增殖并促进凋亡 | 第90-92页 |
| 4.4.4 mi R-203 调控“干性”相关蛋白 | 第92-93页 |
| 4.4.5 MIR-203靶向BMI-1 的调控作用 | 第93-95页 |
| 4.5 讨论 | 第95-98页 |
| 第五章 全文总结 | 第98-104页 |
| 参考文献 | 第104-118页 |
| 博士期间发表论文 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119页 |
