| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第11-22页 |
| 1.1 引言 | 第11页 |
| 1.2 高等植物转录因子概述 | 第11-13页 |
| 1.2.1 转录因子的结构 | 第11-12页 |
| 1.2.2 转录因子的功能 | 第12页 |
| 1.2.3 植物转录因子的分类 | 第12页 |
| 1.2.4 转录因子的调控作用 | 第12-13页 |
| 1.3 转录因子与植物次生代谢的关系 | 第13-14页 |
| 1.4 C2H2型锌指蛋白的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.4.1 C2H2型锌指蛋白的功能区 | 第15页 |
| 1.4.2 C2H2锌指蛋白与植物生长发育 | 第15页 |
| 1.4.3 C2H2锌指蛋白与植物抗逆性 | 第15-16页 |
| 1.5 水稻耐冷性研究 | 第16-18页 |
| 1.5.1 水稻耐冷生理变化 | 第16-17页 |
| 1.5.2 水稻耐冷性QTL研究进展 | 第17页 |
| 1.5.3 C2H2型锌指蛋白对水稻耐冷机制的调控 | 第17-18页 |
| 1.6 研究技术与策略 | 第18-21页 |
| 1.6.1 转基因水稻的分子鉴定 | 第18-19页 |
| 1.6.2 实时荧光定量PCR技术 | 第19页 |
| 1.6.3 实时荧光定量PCR的基本原理 | 第19页 |
| 1.6.4 基因表达分析 | 第19-20页 |
| 1.6.5 转基因水稻材料的耐冷性鉴定 | 第20页 |
| 1.6.6 亚细胞定位分析 | 第20页 |
| 1.6.7 免疫印记（Western Blotting）分析 | 第20页 |
| 1.6.8 生理生化指标分析 | 第20-21页 |
| 1.7 研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 第2章 水稻OsC2H2-12转基因材料的分子检测及Western Blot检测 | 第22-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 实验药品 | 第22-23页 |
| 2.1.2.1 基因测序及检测 | 第22页 |
| 2.1.2.2 Western Blot药品及配置 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-26页 |
| 2.2.1 分子检测 | 第24-26页 |
| 2.2.1.1 种子消毒 | 第24页 |
| 2.2.1.2 转基因株系的筛选 | 第24页 |
| 2.2.1.3 基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.1.4 PCR引物设计 | 第25页 |
| 2.2.1.5 PCR扩增程序及体系 | 第25-26页 |
| 2.2.2 Western Blot检测 | 第26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-33页 |
| 2.5 结论 | 第33-34页 |
| 第3章 OsC2H2-12基因的亚细胞定位分析 | 第34-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第34页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第34页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第34页 |
| 3.1.3 实验药品 | 第34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-40页 |
| 3.2.1 载体构建 | 第34页 |
| 3.2.2 PCR引物设计 | 第34-35页 |
| 3.2.3 水稻总RNA提取 | 第35页 |
| 3.2.4 反转录 | 第35-36页 |
| 3.2.5 目的基因扩增片段回收 | 第36-37页 |
| 3.2.6 BP重组反应 | 第37页 |
| 3.2.7 LR重组反应 | 第37-38页 |
| 3.2.8 高纯度小提中量试剂盒提取质粒DNA | 第38-39页 |
| 3.2.9 拟南芥原生质体制备及转化 | 第39-40页 |
| 3.3 结果与分析 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41页 |
| 3.5 结论 | 第41-42页 |
| 第4章 OsC2H2-12转基因水稻低温发芽率和苗期耐冷性鉴定 | 第42-46页 |
| 4.1 实验材料 | 第42页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第42页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第42页 |
| 4.2 实验方法 | 第42-43页 |
| 4.2.1 水稻芽期低温胁迫处理 | 第42页 |
| 4.2.2 水稻苗期低温胁迫处理 | 第42-43页 |
| 4.3 结果与分析 | 第43-45页 |
| 4.3.1 OsC2H2-12转基因株系低温发芽率 | 第43-44页 |
| 4.3.2 OsC2H2-12转基因水稻苗期耐冷性鉴定 | 第44-45页 |
| 4.4 讨论 | 第45页 |
| 4.5 结论 | 第45-46页 |
| 第5章 低温胁迫条件下OsC2H2-12基因在水稻苗期的表达分析 | 第46-51页 |
| 5.1 实验材料 | 第46页 |
| 5.1.1 样品材料 | 第46页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第46页 |
| 5.1.3 实验药品 | 第46页 |
| 5.2 实验方法 | 第46-49页 |
| 5.2.1 水稻苗期低温胁迫处理及取材 | 第46页 |
| 5.2.2 水稻叶片总RNA的提取 | 第46-47页 |
| 5.2.3 cDNA的合成 | 第47-48页 |
| 5.2.4 Real-timePCR引物的设计 | 第48-49页 |
| 5.3 结果与分析 | 第49-50页 |
| 5.3.1 RNA质量检测 | 第49页 |
| 5.3.2 低温胁迫下OsC2H2-12转基因水稻苗期基因表达差异分析 | 第49-50页 |
| 5.4 讨论 | 第50页 |
| 5.5 结论 | 第50-51页 |
| 第6章 低温胁迫下水稻苗期的逆境生理分析 | 第51-59页 |
| 6.1 实验材料 | 第51页 |
| 6.1.1 样品材料 | 第51页 |
| 6.1.2 主要仪器 | 第51页 |
| 6.1.3 实验药品 | 第51页 |
| 6.2 实验方法 | 第51-54页 |
| 6.2.1 水稻苗期低温胁迫处理及取材 | 第51-52页 |
| 6.2.2 叶绿素含量测定 | 第52页 |
| 6.2.3 可溶性糖含量测定 | 第52-53页 |
| 6.2.4 可溶性蛋白含量测定 | 第53页 |
| 6.2.5 过氧化物酶活性测定 | 第53-54页 |
| 6.3 结果与分析 | 第54-58页 |
| 6.3.1 低温胁迫对水稻叶绿素含量的影响 | 第54-55页 |
| 6.3.2 低温胁迫对水稻可溶性糖含量的影响 | 第55-56页 |
| 6.3.3 低温胁迫对可溶性蛋白含量的影响 | 第56-57页 |
| 6.3.4 低温胁迫对过氧化物酶的影响 | 第57-58页 |
| 6.4 讨论 | 第58页 |
| 6.5 结论 | 第58-59页 |
| 第7章 全文总结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 作者简介 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
