摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-31页 |
1 引言 | 第11页 |
2 大麦遗传转化方法研究 | 第11-13页 |
3 转基因技术在大麦遗传改良中的应用 | 第13-21页 |
3.1 大麦抗病虫基因研究进展 | 第13-16页 |
3.1.1 病毒抗性研究 | 第13-14页 |
3.1.2 真菌抗性研究 | 第14-16页 |
3.2 大麦非生物抗性研究进展 | 第16-17页 |
3.3 大麦品质改良基因研究进展 | 第17-19页 |
3.3.1 麦芽品质研究 | 第17-18页 |
3.3.2 营养品质研究 | 第18-19页 |
3.4 饲用酶转基因大麦研究 | 第19-20页 |
3.5 其他作用转基因大麦研究 | 第20-21页 |
4 大麦再生体系研究 | 第21-27页 |
4.1 受体材料 | 第21-22页 |
4.2 大麦再生能力影响因素研究 | 第22-23页 |
4.2.1 基因型 | 第22页 |
4.2.2 外植体材料 | 第22-23页 |
4.2.3 培养基成分 | 第23页 |
4.3 农杆菌遗传转化效率的影响因素研究 | 第23-27页 |
4.3.1 农杆菌菌株类型 | 第24页 |
4.3.2 受体材料基因型 | 第24-25页 |
4.3.3 外植体类型 | 第25页 |
4.3.4 培养基组成及侵染浓度对转化的影响 | 第25-26页 |
4.3.5 抗性基因的选择 | 第26-27页 |
5 microRNA分子简介及miR396基因研究进展 | 第27-30页 |
5.1 miRNA分子 | 第27页 |
5.2 miR396基因及研究进展 | 第27-30页 |
5.2.1 对细胞分裂的调控研究 | 第27-28页 |
5.2.2 对花器官形成的调控研究 | 第28-29页 |
5.2.3 耐逆性研究 | 第29页 |
5.2.4 其他方面研究 | 第29-30页 |
6 本实验的研究目的与意义 | 第30-31页 |
第二章 农杆菌介导大麦幼胚愈伤组织的遗传转化 | 第31-45页 |
1 材料与方法 | 第31-36页 |
1.1 供试材料和实验设计 | 第31页 |
1.2 培养基 | 第31-32页 |
1.3 转化载体 | 第32-33页 |
1.4 农杆菌介导大麦幼胚愈伤组织的转化方法 | 第33-36页 |
1.4.1 农杆菌活化和保存 | 第33-34页 |
1.4.2 幼胚接种 | 第34页 |
1.4.3 侵染和共培养 | 第34-35页 |
1.4.4 恢复培养 | 第35页 |
1.4.5 分化筛选培养 | 第35页 |
1.4.6 再生苗培养 | 第35页 |
1.4.7 春化和移栽 | 第35-36页 |
2 转基因To代植株PCR检测 | 第36-38页 |
2.1 抗性再生苗DNA的提取 | 第36-38页 |
2.1.1 提取DNA的试剂 | 第36页 |
2.1.2 CTAB法提取大麦总DNA | 第36-37页 |
2.1.3 电泳缓冲液 | 第37页 |
2.1.4 农杆菌质粒提取步骤 | 第37页 |
2.1.5 转化基因检测 | 第37-38页 |
3 数据统计和分析方法 | 第38页 |
4 结果与分析 | 第38-43页 |
4.1 GV3101菌株PCR检测结果 | 第38-39页 |
4.2 品种之间幼胚出愈率比较 | 第39页 |
4.3 不同品种间在同一筛选压下分化结果的比较 | 第39-40页 |
4.4 农杆菌介导大麦幼胚愈伤转基因植株的获得 | 第40-42页 |
4.5 农杆菌介导的幼胚愈伤转化过程数据统计 | 第42-43页 |
5 讨论 | 第43-45页 |
第三章 农杆菌介导大麦成熟胚愈伤组织的遗传转化 | 第45-56页 |
1 材料与方法 | 第45-48页 |
1.1 供试材料和方法 | 第45页 |
1.2 培养基 | 第45-46页 |
1.3 转化载体 | 第46页 |
1.4 农杆菌介导大麦成熟胚愈伤组织的转化方法 | 第46-48页 |
1.4.1 农杆菌活化和保存 | 第46页 |
1.4.2 成熟胚接种方法 | 第46-47页 |
1.4.3 侵染和共培养 | 第47-48页 |
1.4.4 恢复培养 | 第48页 |
1.4.5 分化、筛选培养 | 第48页 |
1.4.6 再生苗培养 | 第48页 |
1.5 数据统计和分析方法 | 第48页 |
2 转基因T_0代植株PCR检测 | 第48-49页 |
3 结果与分析 | 第49-54页 |
3.1 ABA对大麦成熟胚愈伤组织诱导的影响 | 第49-50页 |
3.2 不同侵染浓度和抑菌剂浓度对愈伤恢复的影响 | 第50-52页 |
3.3 成熟胚转基因植株的获得 | 第52-53页 |
3.3.1 成熟胚转化过程 | 第52-53页 |
3.3.2 PCR检测结果 | 第53页 |
3.4 成熟胚转化结果统计 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-69页 |
附录: MS培养基母液配制 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |