摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略词简表 | 第15-17页 |
第一章 绪论 | 第17-50页 |
1.1 骨的构造及发生 | 第17-22页 |
1.1.1 骨的构造 | 第17-18页 |
1.1.2 骨组织的形态结构 | 第18-20页 |
1.1.2.1 骨组织的细胞形态 | 第18-19页 |
1.1.2.2 骨基质 | 第19页 |
1.1.2.3 骨的矿化 | 第19-20页 |
1.1.3 骨的发生方式 | 第20页 |
1.1.4 骨的构塑与重建 | 第20-22页 |
1.2 移植骨的结构 | 第22-26页 |
1.2.1 移植骨的结构及性能要求 | 第22-23页 |
1.2.1.1 移植骨的结构要求 | 第22-23页 |
1.2.1.2 移植骨的性能要求 | 第23页 |
1.2.2 移植骨的种类 | 第23-25页 |
1.2.3 移植骨的植入 | 第25-26页 |
1.3 骨组织的再生修复 | 第26-38页 |
1.3.1 概述 | 第26-29页 |
1.3.2 再生修复支架的设计 | 第29-34页 |
1.3.3 骨再生修复与重建的生物因子 | 第34-38页 |
1.3.3.1 细胞 | 第35-36页 |
1.3.3.2 生物活性信号 | 第36-38页 |
1.4 微小RNA (microRNA) | 第38-48页 |
1.4.1 microRNA的现象与机理 | 第38-40页 |
1.4.2 microRNA与成骨 | 第40-43页 |
1.4.3 microRNA的载体 | 第43-46页 |
1.4.4 负载microRNA的再生医学支架 | 第46-48页 |
1.5 本论文研究目的、意义及主要研究内容 | 第48-50页 |
第二章 AuNPs/miR-29b的构建及其对成骨分化的影响研究 | 第50-77页 |
2.1 引言 | 第50-51页 |
2.2 材料与实验方法 | 第51-60页 |
2.2.1 实验试剂与仪器 | 第51-53页 |
2.2.2 聚乙烯亚胺修饰的金纳米颗粒(AuNPs)制备 | 第53页 |
2.2.3 AuNPs对miRNA的结合能力 | 第53-54页 |
2.2.4 AuNPs对miR-29b的保护能力 | 第54页 |
2.2.5 细胞培养 | 第54页 |
2.2.6 AuNPs/miR-29b细胞内吞能力 | 第54-55页 |
2.2.7 细胞活性评价 | 第55页 |
2.2.8 细胞的成骨分化 | 第55-59页 |
2.2.8.1 mRNA转录水平的实时定量分析 | 第55-57页 |
2.2.8.2 碱性磷酸酶活性测定 | 第57-58页 |
2.2.8.3 矿化基质测定 | 第58-59页 |
2.2.9 细胞内的分布研究 | 第59-60页 |
2.3 结果与讨论 | 第60-76页 |
2.3.1 PEI修饰AuNPs的制备及表征 | 第60-61页 |
2.3.2 AuNPs对miRNA的结合能力 | 第61-63页 |
2.3.3 AuNPs对miRNA的保护能力 | 第63-64页 |
2.3.4 AuNPs/miR-29b细胞内吞能力 | 第64-66页 |
2.3.5 细胞活性评价 | 第66-67页 |
2.3.6 AuNPs/miR-29b对细胞成骨分化的调控作用 | 第67-72页 |
2.3.6.1 成骨分化标志基因表达分析 | 第67-69页 |
2.3.6.2 碱性磷酸酶活性分析 | 第69-70页 |
2.3.6.3 矿化基质分析 | 第70-72页 |
2.3.7 AuNPs促进成骨分化的机制初步探讨 | 第72-76页 |
2.3.7.1 AuNPs和AuNPs/miR-29b细胞摄入量 | 第72-73页 |
2.3.7.2 AuNPs在细胞内的分布 | 第73-76页 |
本章小结 | 第76-77页 |
第三章 三维多孔凝胶支架的制备及性能研究 | 第77-98页 |
3.1 引言 | 第77-78页 |
3.2 材料与方法 | 第78-82页 |
3.2.1 实验试剂与仪器 | 第78-79页 |
3.2.2 明胶-海藻酸钠混合凝胶制备 | 第79页 |
3.2.3 凝胶三维大孔支架的快速成型 | 第79-80页 |
3.2.4 成型支架的后处理 | 第80页 |
3.2.5 结构与理化性能表征 | 第80-81页 |
3.2.5.1 全反射红外(FTIR-ATR)分析 | 第80页 |
3.2.5.2 支架形貌结构分析 | 第80页 |
3.2.5.3 支架的孔隙率及孔径分布 | 第80-81页 |
3.2.5.4 吸水溶胀性能 | 第81页 |
3.2.5.4 降解性能 | 第81页 |
3.2.5.5 力学性能 | 第81页 |
3.2.6 细胞相容性评价 | 第81-82页 |
3.2.6.1 细胞培养 | 第81-82页 |
3.2.6.2 细胞的粘附行为 | 第82页 |
3.3 结果与讨论 | 第82-96页 |
3.3.1 打印参数的探索 | 第82-84页 |
3.3.2 后处理工艺的原理及探索 | 第84-85页 |
3.3.3 支架理化性能表征 | 第85-95页 |
3.3.3.1 全反射红外(FTIR-ATR)分析 | 第85-86页 |
3.3.3.2 支架形貌结构分析 | 第86-90页 |
3.3.3.3 支架的孔隙率及孔径分布 | 第90-92页 |
3.3.3.4 吸水溶胀性能 | 第92-93页 |
3.3.3.5 降解性能 | 第93-94页 |
3.3.3.6 力学性能 | 第94-95页 |
3.3.4 细胞的粘附行为 | 第95-96页 |
本章小结 | 第96-98页 |
第四章 负载AuNPs/mi R-29b凝胶支架介导hMSCs成骨分化的体外研究 | 第98-117页 |
4.1 引言 | 第98页 |
4.2 材料与方法 | 第98-103页 |
4.2.1 实验试剂与仪器 | 第98-99页 |
4.2.2 负载miRNA的凝胶支架构建 | 第99-100页 |
4.2.3 miRNA在凝胶支架上的分布 | 第100页 |
4.2.4 miRNA在凝胶支架上的释放 | 第100-101页 |
4.2.5 细胞培养 | 第101页 |
4.2.6 细胞粘附 | 第101页 |
4.2.7 负载miRNA的凝胶支架的体外矿化表征 | 第101-102页 |
4.2.8 hMSCs成骨分化 | 第102-103页 |
4.3 结果与讨论 | 第103-116页 |
4.3.1 miRNA在凝胶支架上的分布 | 第103-107页 |
4.3.2 miRNA在凝胶支架上的释放行为 | 第107-108页 |
4.3.3 细胞在负载miRNA凝胶支架上的粘附行为 | 第108-110页 |
4.3.4 负载miRNA凝胶支架的体外矿化行为 | 第110-111页 |
4.3.5 负载miR-29b凝胶支架对hMSCs成骨分化行为的影响 | 第111-116页 |
本章小节 | 第116-117页 |
第五章 负载AuNPs/mi R-29b的凝胶支架体内异位成骨能力研究 | 第117-132页 |
5.1 引言 | 第117页 |
5.2 材料与方法 | 第117-121页 |
5.2.1 实验试剂与仪器 | 第117-118页 |
5.2.2 负载AuNPs/miR-29b的凝胶支架构建 | 第118-119页 |
5.2.3 细胞培养 | 第119页 |
5.2.4 植入材料的准备 | 第119页 |
5.2.5 实验动物 | 第119页 |
5.2.6 植入方法与分组 | 第119-120页 |
5.2.7 组织形态学观察 | 第120-121页 |
5.2.8 免疫荧光染色分析 | 第121页 |
5.2.9 micro-CT检测 | 第121页 |
5.3 结果与讨论 | 第121-131页 |
5.3.1 术后观察 | 第121-122页 |
5.3.2 组织学观察 | 第122-126页 |
5.3.3 OCN免疫组化 | 第126-127页 |
5.3.4 VEGF免疫组化 | 第127-129页 |
5.3.5 micro-CT检测新骨生成 | 第129-131页 |
本章小节 | 第131-132页 |
结论 | 第132-134页 |
本论文的创新性 | 第134-135页 |
参考文献 | 第135-154页 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第154-156页 |
致谢 | 第156-158页 |
附件 | 第158页 |