| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 前言 | 第12-18页 |
| 第一部分 TRM序列在T20抗病毒活性中的重要作用 | 第18-39页 |
| 前言 | 第18-21页 |
| 1. 实验材料 | 第21-24页 |
| 1.1 实验所用细胞及感受态细胞 | 第21页 |
| 1.2 测序所需引物序列 | 第21页 |
| 1.3 突变引物序列 | 第21页 |
| 1.4 实验所用相关工具酶 | 第21页 |
| 1.5 主要试剂 | 第21-23页 |
| 1.6 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2. 实验方法 | 第24-30页 |
| 2.1 多肽合成 | 第24页 |
| 2.2 感受态细胞转化 | 第24页 |
| 2.3 质粒大提 | 第24-25页 |
| 2.4 HIV假病毒包装 | 第25页 |
| 2.5 假病毒滴度测定 | 第25-26页 |
| 2.6 圆二色谱(CD) | 第26-27页 |
| 2.7 等温滴定量热法(ITC) | 第27页 |
| 2.8 定点突变 | 第27-28页 |
| 2.9 Western Blot检测包膜蛋白Env突变质粒表达情况: | 第28-29页 |
| 2.10 包膜蛋白Env介导的膜融合过程检测 | 第29页 |
| 2.11 抗病毒实验 | 第29-30页 |
| 3. 实验结果 | 第30-36页 |
| 3.1 TRM的缺失严重影响T20抗病毒活性及其与相应NHR结合形成6-HB结构 | 第30-31页 |
| 3.2 T20序列中的TRM与NHR相应位置上的FPPR序列之间存在一定的相互作用 | 第31-32页 |
| 3.3 HIV-1_(NL4-3) gp41氨基端FPPR序列定点突变 | 第32-33页 |
| 3.4 FPPR突变对HIV-1包膜蛋白介导的膜融合能力及病毒单次侵染能力的影响 | 第33-35页 |
| 3.5 FPPR突变对病毒耐药性的影响 | 第35-36页 |
| 4. 讨论 | 第36-38页 |
| 5. 小结 | 第38-39页 |
| 第二部分 以T20序列为模板设计的脂肽膜融合抑制剂 | 第39-64页 |
| 前言 | 第39-41页 |
| 1. 实验材料 | 第41-44页 |
| 1.1 实验所用细胞、感受态细胞 | 第41页 |
| 1.2 HIV-1病毒包装所用质粒 | 第41-42页 |
| 1.3 主要试剂 | 第42-43页 |
| 1.4 各种实验耗材 | 第43页 |
| 1.5 实验所用仪器设备 | 第43-44页 |
| 2. 实验方法 | 第44-50页 |
| 2.1 多肽合成 | 第44页 |
| 2.2 感受态细胞转化 | 第44-45页 |
| 2.3 质粒大提 | 第45页 |
| 2.4 HIV假病毒包装 | 第45-46页 |
| 2.5 假病毒滴度测定 | 第46页 |
| 2.6 抗病毒实验 | 第46页 |
| 2.7 细胞毒性检测 | 第46-47页 |
| 2.8 圆二色谱(CD) | 第47页 |
| 2.9 多肽膜融合抑制实验 | 第47-48页 |
| 2.10 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE) | 第48页 |
| 2.11 等温滴定量热法(ITC) | 第48页 |
| 2.12 协同效应 | 第48-50页 |
| 3. 实验结果 | 第50-60页 |
| 3.1 脂肪酸(C_(16))修饰能显著增强T20△TRM多肽的抗病毒活性 | 第50-51页 |
| 3.2 脂肪酸(C_(16))修饰能显著增强T20△ TRM与NHR的结合能力 | 第51-53页 |
| 3.3 在多肽序列与脂肪酸之间Linker的添加严重减弱LP-40的抗病毒活性 | 第53-54页 |
| 3.4 脂肽膜融合抑制剂与gp41 NHR结合模式 | 第54-55页 |
| 3.5 脂肪酸(C16)修饰能够增强LP-40对HIV-1各亚型病毒株的抗病毒活性 | 第55页 |
| 3.6 脂肪酸(C16)修饰能够显著增强LP-40对HIV-1各亚型包膜蛋白介导的膜融合抑制活性 | 第55页 |
| 3.7 脂肽LP-40与LP-11联合用药表现出协同抗病毒活性 | 第55-58页 |
| 3.8 LP-40对HIV-1耐药突变株的抗病毒活性 | 第58-60页 |
| 4. 讨论 | 第60-63页 |
| 5. 小结 | 第63-64页 |
| 第三部分 以T1249序列为模板设计的脂肽膜融合抑制剂 | 第64-74页 |
| 前言 | 第64-66页 |
| 1. 实验材料 | 第66页 |
| 1.1 实验所用细胞、感受态细胞 | 第66页 |
| 1.2 主要试剂 | 第66页 |
| 2. 实验方法 | 第66-69页 |
| 2.1 多肽合成 | 第66-67页 |
| 2.2 HIV假病毒包装 | 第67页 |
| 2.3 假病毒滴度测定 | 第67页 |
| 2.4 抗病毒实验 | 第67-68页 |
| 2.5 细胞毒性检测 | 第68页 |
| 2.6 多肽膜融合抑制实验 | 第68-69页 |
| 3. 实验结果 | 第69-72页 |
| 3.1 以T1249序列为模板设计的脂肽膜融合抑制剂具有强有力的抗病毒活性 | 第69页 |
| 3.2 LP-46对不同亚型的HIV-1病毒株具有强有力的膜融合抑制能力 | 第69-71页 |
| 3.3 LP-46对T20耐药株及HIV-2/SIV病毒株同样表现出高强度的抗病毒能力 | 第71-72页 |
| 4. 讨论 | 第72-73页 |
| 5. 小结 | 第73-74页 |
| 全文结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 综述 | 第80-90页 |
| 参考文献 | 第87-90页 |
| 英文缩略语 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 个人简历 | 第92页 |
