摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第1章 绪论(GOLPH2 基因与肝脏疾病密切相关) | 第11-21页 |
·GOLPH2 基因的发现与性质 | 第11-12页 |
·GOLPH2 与肝脏疾病关系密切 | 第12-13页 |
·肝炎与肝损伤 | 第13-15页 |
·基因敲除动物 | 第15-17页 |
·可变剪接(Alternative splicing) | 第17-19页 |
·总结 | 第19-21页 |
第2章 GOLPH2 基因表达谱分析 | 第21-32页 |
·实验材料 | 第21-22页 |
·实验动物 | 第21页 |
·特殊试剂 | 第21页 |
·常用溶液 | 第21-22页 |
·实验方法 | 第22-25页 |
·小鼠饲养 | 第22页 |
·Western blot | 第22-24页 |
·免疫组织化学 | 第24页 |
·组织免疫荧光 | 第24-25页 |
·实验结果 | 第25-30页 |
·概括 | 第25页 |
·消化系统 | 第25-26页 |
·生殖与泌尿系统 | 第26-27页 |
·神经系统 | 第27-28页 |
·造血与免疫系统 | 第28页 |
·内分泌系统 | 第28页 |
·呼吸系统和心脏 | 第28-29页 |
·总结 | 第29-30页 |
·分析与讨论 | 第30-32页 |
第3章 GOLPH2 基因敲除鼠的制备与初步分析 | 第32-48页 |
·实验材料 | 第32-33页 |
·实验动物 | 第32页 |
·生化试剂 | 第32页 |
·PCR 鉴定引物 | 第32-33页 |
·实验仪器 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-38页 |
·基本实验方法 | 第33-36页 |
·GOLPH2 Loxp 重组鼠制备 | 第36-37页 |
·敲除鼠繁育 | 第37页 |
·敲除鼠鉴定 | 第37-38页 |
·RNA Alternative splicing | 第38页 |
·实验结果 | 第38-45页 |
·选定敲除区域 | 第38-39页 |
·基因打靶结果 | 第39-40页 |
·敲除鼠繁育结果 | 第40-41页 |
·敲除鼠鉴定结果 | 第41-43页 |
·mRNA 可变剪接 | 第43-44页 |
·敲除鼠基本表型 | 第44-45页 |
·分析与讨论 | 第45-48页 |
第4章 GOLPH2 与炎症关系探索 | 第48-60页 |
·实验材料 | 第48-49页 |
·实验动物和细胞 | 第48页 |
·试剂和溶液 | 第48页 |
·抗体 | 第48-49页 |
·实验方法 | 第49-52页 |
·细胞培养 | 第49页 |
·原代肝细胞分离培养 | 第49-50页 |
·疟原虫接种和血虫水平检测 | 第50-51页 |
·LPS 肝炎模型 | 第51页 |
·细胞因子刺激实验 | 第51页 |
·Real-Time PCR 检测 | 第51-52页 |
·实验结果 | 第52-58页 |
·GOLPH2 与疟疾感染的关联 | 第52-54页 |
·GOLPH2 在LPS 肝炎模型中的表达 | 第54-56页 |
·GOLPH2 应对炎症因子的反应 | 第56-58页 |
·分析与讨论 | 第58-60页 |
第5章 GOLPH2 基因与肝损伤关系探索 | 第60-70页 |
·实验材料 | 第60-61页 |
·动物与细胞 | 第60页 |
·质粒 | 第60页 |
·特殊试剂 | 第60-61页 |
·实验方法 | 第61-63页 |
·CC14 肝损伤模型建立 | 第61页 |
·BrdU 标记检测细胞增殖 | 第61-62页 |
·高表达和低表达GOLPH2 的稳定细胞系筛选 | 第62-63页 |
·细胞迁移实验 | 第63页 |
·实验结果 | 第63-68页 |
·CC14 肝损伤模型的建立 | 第63-64页 |
·GOLPH2 在肝损伤后表达升高 | 第64-65页 |
·GOLPH2 缺失影响肝脏损伤后修复 | 第65-67页 |
·GOLPH2 对肝细胞增殖的影响 | 第67页 |
·GOLPH2 对细胞迁移的影响 | 第67-68页 |
·分析与讨论 | 第68-70页 |
第6章 总结 | 第70-73页 |
参考文献 | 第73-76页 |
附录1 缩略词表 | 第76-77页 |
致谢 | 第77页 |