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无抗性选择标记转OsSSSⅡ-2基因RNA干扰结构水稻的品质分析及其分子特性研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
符号说明第8-9页
一、文献综述第9-18页
    1.1 引言第9页
    1.2 软米水稻的研究现状第9-10页
    1.3 稻米淀粉的组成及结构第10-11页
    1.4 植物淀粉合成概述第11页
    1.5 参与淀粉合成的关键酶类的研究现状第11-16页
        1.5.1 ADPG焦磷酸化酶(AGPP)第12页
        1.5.2 淀粉合成酶第12-14页
        1.5.3 淀粉分支酶第14页
        1.5.4 淀粉去分支酶第14-16页
    1.6 稻米品质影响因素第16-17页
    1.7 RNA干扰机制以及应用第17页
    1.8 本研究的主要目的第17-18页
二、材料与方法第18-23页
    2.1 实验材料第18页
    2.2 PCR分析第18页
        2.2.1 水稻植株叶片总DNA的提取第18页
        2.2.2 PCR扩增第18页
    2.3 Real-time PCR分析第18-19页
        2.3.1 水稻胚乳总RNA的提取第18-19页
        2.3.2 第一链cDNA的合成第19页
        2.3.3 特异性引物实时定量PCR扩增第19页
    2.4 稻米品质的测定第19-21页
        2.4.1 样品前处理第19页
        2.4.2 水稻成熟种子中直链淀粉含量(AC)的测定第19页
        2.4.3 胶稠度的测定第19-20页
        2.4.4 淀粉粘滞性谱(RVA)分析第20页
        2.4.5 米饭食味计测定第20页
        2.4.6 米饭蒸煮食味的调查第20页
        2.4.7 农艺性状的调查第20-21页
    2.5 转基因水稻外源基因插入拷贝数鉴定第21页
    2.6 转基因水稻外源基因插入位点鉴定第21-22页
    2.7 统计分析第22-23页
三、结果与分析第23-35页
    3.1 无选择标记纯合转基因水稻的鉴定第23-24页
    3.2 转基因水稻的Real-time PCR分析第24页
    3.3 转基因水稻品质分析第24-31页
        3.3.1 转基因水稻成熟种子中的直链淀粉含量及胶稠度第24-26页
        3.3.2 转基因水稻成熟种子淀粉的RVA谱第26-28页
        3.3.3 转基因水稻的食味值测定第28页
        3.3.4 转基因水稻的农艺性状测定第28-31页
    3.4 转基因水稻的拷贝数鉴定第31-33页
    3.5 转基因水稻中T-DNA插入位点鉴定第33-35页
四、小结与讨论第35-37页
参考文献第37-40页
致谢第40-41页

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