| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略语表 | 第12-14页 |
| 第一篇 文献综述 | 第14-42页 |
| 第一章 猪瘟病毒的研究进展 | 第14-35页 |
| 1. 猪瘟病毒的生物学特征 | 第14-18页 |
| 1.1 病原学特征 | 第14-15页 |
| 1.2 流行病学特征 | 第15-17页 |
| 1.3 临床症状和病理变化 | 第17-18页 |
| 2. 猪瘟病毒基因组的结构特征 | 第18-21页 |
| 2.1 猪瘟病毒结构蛋白及其功能 | 第19-20页 |
| 2.2 猪瘟病毒非结构蛋白及其功能 | 第20-21页 |
| 3. 猪瘟的诊断与检测 | 第21-25页 |
| 3.1 临床诊断 | 第22-23页 |
| 3.2 血清学诊断 | 第23-24页 |
| 3.3 病原学诊断 | 第24-25页 |
| 3.4 分子生物学检测 | 第25页 |
| 4. 猪瘟疫苗的研究进展 | 第25-26页 |
| 5. 猪瘟的综合防治措施 | 第26-29页 |
| 参考文献 | 第29-35页 |
| 第二章 热休克蛋白的研究进展 | 第35-42页 |
| 1. 热休克蛋白的分类及其生物学特性 | 第35-36页 |
| 1.1 热休克蛋白的分类 | 第35页 |
| 1.2 热休克蛋白的生物学特性 | 第35-36页 |
| 2. 热休克蛋白表达的影响因素 | 第36-37页 |
| 2.1 应激反应的影响 | 第36页 |
| 2.2 化学复合物的影响 | 第36-37页 |
| 2.3 细胞因子的影响 | 第37页 |
| 3. 热休克蛋白的生物学功能 | 第37-39页 |
| 3.1 热防御作用 | 第37页 |
| 3.2 分子伴侣 | 第37-38页 |
| 3.3 稳定细胞结构 | 第38页 |
| 3.4 协同免疫 | 第38页 |
| 3.5 抗细胞凋亡 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-42页 |
| 第二篇 实验部分 | 第42-80页 |
| 第一章 猪瘟病毒E0、E0-Hsp70重组质粒的克隆表达和纯化 | 第42-54页 |
| 1. 实验材料 | 第43-44页 |
| 1.1 菌种和质粒 | 第43页 |
| 1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 1.3 主要仪器和设备 | 第43-44页 |
| 2. 实验方法 | 第44-47页 |
| 2.1 引物设计 | 第44页 |
| 2.2 猪瘟病毒E0蛋白ORF的获取 | 第44-45页 |
| 2.3 原核表达载体的构建 | 第45-46页 |
| 2.4 重组质粒的原核表达 | 第46页 |
| 2.5 E0、E0-Hsp70和Hsp70的Western blot鉴定 | 第46页 |
| 2.6 融合蛋白E0、E0-Hsp70和Hsp70的纯化 | 第46-47页 |
| 3. 结果与分析 | 第47-50页 |
| 3.1 原核表达载体的构建 | 第48页 |
| 3.2 融合蛋白的Western blot鉴定 | 第48-49页 |
| 3.3 融合蛋白E0, E0-Hsp70和Hsp70的纯化 | 第49-50页 |
| 4. 讨论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 第二章 热休克蛋白Hsp70在小鼠上促进猪瘟病毒囊膜糖蛋白E0的免疫效果研究 | 第54-64页 |
| 1. 实验材料 | 第54-56页 |
| 1.1 菌种和质粒 | 第55页 |
| 1.2 实验动物 | 第55页 |
| 1.3 主要试剂 | 第55页 |
| 1.4 主要仪器和设备 | 第55-56页 |
| 2. 实验方法 | 第56-59页 |
| 2.1 免疫蛋白的准备 | 第56-57页 |
| 2.2 目的蛋白免疫小鼠并制备多克隆抗体 | 第57页 |
| 2.3 小鼠血清抗体的ELISA检测 | 第57页 |
| 2.4 淋巴细胞亚群检测 | 第57-58页 |
| 2.5 IFN-γ检测 | 第58-59页 |
| 3. 结果与分析 | 第59-61页 |
| 3.1 小鼠血清抗体水平检测 | 第59页 |
| 3.2 CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群增殖检测 | 第59-60页 |
| 3.3 IFN-γ细胞因子检测 | 第60-61页 |
| 4. 讨论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-64页 |
| 第三章 热休克蛋白Hsp70在小鼠和家兔上促进猪瘟病毒囊膜糖蛋白E2的免疫效果研究 | 第64-80页 |
| 1. 实验材料 | 第65-66页 |
| 1.1 菌种和质粒 | 第65页 |
| 1.2 实验动物 | 第65页 |
| 1.3 主要试剂 | 第65页 |
| 1.4 主要仪器和设备 | 第65-66页 |
| 2. 实验方法 | 第66-70页 |
| 2.1 免疫蛋白的准备 | 第66-67页 |
| 2.2 Hsp70在小鼠上促进E2的免疫效果研究 | 第67-69页 |
| 2.3 Hsp70在家兔上促进E2的免疫效果研究 | 第69-70页 |
| 3. 结果与分析 | 第70-76页 |
| 3.1 Hsp70在小鼠上促进E2的免疫效果研究 | 第70-73页 |
| 3.2 Hsp70在家兔上促进E2的免疫效果研究 | 第73-76页 |
| 4. 讨论 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-80页 |
| 全文总结 | 第80-82页 |
| 附录 | 第82-88页 |
| 1. ELISA中主要试剂的配制 | 第82页 |
| 2. SDS-PAGE中主要试剂的配制 | 第82-84页 |
| 3. Western blot分析中主要溶液的配制 | 第84页 |
| 4. 细胞培养中所用溶液的配制 | 第84-85页 |
| 5. 其它常用试剂的配制 | 第85-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第90页 |
