| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 引言 | 第8-13页 |
| 1.1 研究背景 | 第8页 |
| 1.2 研究现状 | 第8-9页 |
| 1.3 羽毛的基本构造 | 第9-10页 |
| 1.4 Shh信号通路简介 | 第10页 |
| 1.5 Shh信号通路在毛发和羽毛发育中的作用 | 第10-12页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第12页 |
| 1.7 主要研究内容 | 第12-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-34页 |
| 2.1 实验仪器 | 第13-14页 |
| 2.2 实验材料与试剂 | 第14-21页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第14页 |
| 2.2.2 实验用细胞系与菌种 | 第14页 |
| 2.2.3 实验药品及分子试剂 | 第14-15页 |
| 2.2.4 抗体信息 | 第15页 |
| 2.2.5 引物信息 | 第15-16页 |
| 2.2.6 溶液成分及配方 | 第16-21页 |
| 2.3 主要实验方法 | 第21-34页 |
| 2.3.1 化疗损伤毛发模型的建立 | 第21页 |
| 2.3.2 Wholemount观察羽毛形态 | 第21页 |
| 2.3.3 环巴胺或病毒干扰毛管再生 | 第21-22页 |
| 2.3.4 环巴胺干扰毛发毛囊的生长 | 第22页 |
| 2.3.5 小鼠化疗引起脱发的挽救实验 | 第22页 |
| 2.3.6 石蜡切片及HE染色 | 第22页 |
| 2.3.7 免疫荧光 | 第22-23页 |
| 2.3.8 一步法TUNEL检测 | 第23页 |
| 2.3.9 Trizol抽提RNA | 第23页 |
| 2.3.10 RNA反转录及PCR | 第23-25页 |
| 2.3.11 原位杂交探针制备 | 第25-29页 |
| 2.3.12 原位杂交 | 第29页 |
| 2.3.13 细胞的培养 | 第29-30页 |
| 2.3.13.1 细胞的传代 | 第29-30页 |
| 2.3.13.2 细胞的冻存 | 第30页 |
| 2.3.13.3 细胞的复苏 | 第30页 |
| 2.3.14 pll3.7-Shhi慢病毒包装 | 第30-31页 |
| 2.2.14.1 pll3.7-Shhi质粒 | 第30页 |
| 2.2.14.2 磷酸钙介导的质粒转染真核细胞 | 第30-31页 |
| 2.3.14.3 RNAi效率验证 | 第31页 |
| 2.3.15 蛋白SDS-PAGE电泳 | 第31-33页 |
| 2.3.15.1 电泳 | 第31-32页 |
| 2.3.15.2 转膜 | 第32页 |
| 2.3.15.3 封闭与抗体的孵育 | 第32-33页 |
| 2.3.15.4 曝光显色 | 第33页 |
| 2.3.16 数据统计 | 第33-34页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第34-60页 |
| 3.1 实验结果 | 第34-58页 |
| 3.1.1 以羽毛模型探究化疗药物损伤组织的机制 | 第34-44页 |
| 3.1.1.1 CYP引起羽毛生长出现缺陷 | 第34-35页 |
| 3.1.1.2 CYP选择性损伤羽毛分叉 | 第35-36页 |
| 3.1.1.3 CYP诱导羽毛分叉出现少量细胞凋亡 | 第36-37页 |
| 3.1.1.4 CYP抑制羽毛分叉细胞的增殖 | 第37-39页 |
| 3.1.1.5 CYP选择性抑制Shh信号 | 第39-40页 |
| 3.1.1.6 直接下调Shh信号重现分叉细胞的增殖抑制 | 第40-42页 |
| 3.1.1.7 测试其他化疗药物对羽毛的影响 | 第42-44页 |
| 3.1.2 在小鼠毛发模型中验证了Shh信号在化疗引起脱发中的关键作用 | 第44-51页 |
| 3.1.2.1 CYP引起小鼠毛囊损伤和毛发脱落 | 第44-45页 |
| 3.1.2.2 CYP下调毛囊中的Shh信号 | 第45-46页 |
| 3.1.2.3 CYP抑制毛囊细胞的增殖 | 第46-47页 |
| 3.1.2.4 下调Shh信号重现CYP引起的毛囊损伤 | 第47-50页 |
| 3.1.2.5 在毛发模型中测试其他化疗药物对毛发生长及Shh信号的影响 | 第50-51页 |
| 3.1.3 补充外源的Shh蛋白挽救CYP引起毛发的脱落 | 第51-53页 |
| 3.1.4 ROS和Stat1介导了化疗药物对Shh信号的下调 | 第53-57页 |
| 3.1.4.1 化疗药物引起ROS和Stat1的上升 | 第53-55页 |
| 3.1.4.2 ROS和Stat1会下调Shh信号 | 第55-56页 |
| 3.1.4.3 Vitamin E和AG490挽救CYP引起的毛发脱落 | 第56-57页 |
| 3.1.5 化疗药物会引起病人毛囊Shh信号的下调 | 第57-58页 |
| 3.2 讨论 | 第58-60页 |
| 3.2.1 以羽毛模型探究复杂分子调控的优势 | 第58页 |
| 3.2.2 Shh信号在化疗副反应中的关键作用 | 第58-59页 |
| 3.2.3 在化疗引起脱发中调控shh表达的上游因素 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 个人简历 | 第67页 |
