| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第9-18页 |
| 1 热激蛋白 | 第10页 |
| 2 分子伴侣 | 第10-11页 |
| 3 J-蛋白 | 第11-15页 |
| 3.1 J-蛋白的结构及多样性 | 第11-12页 |
| 3.2 J-蛋白的生理功能 | 第12-15页 |
| 3.2.1 J-蛋白作为辅分子伴侣与HSP70 组成分子伴侣机器 | 第12-13页 |
| 3.2.2 J-蛋白参与信号转导过程 | 第13-14页 |
| 3.2.3 J-蛋白对环境刺激的反应及其它作用 | 第14-15页 |
| 4 拟南芥中J-蛋白研究 | 第15-16页 |
| 4.1 拟南芥简介 | 第15页 |
| 4.2 拟南芥中J-蛋白的研究 | 第15-16页 |
| 5 报告基因知识 | 第16-18页 |
| 5.1 绿色荧光蛋白特性 | 第16-17页 |
| 5.2 GFP 作为报告基因在分子生物学研究中的应用 | 第17-18页 |
| 材料和方法 | 第18-26页 |
| 1 实验材料 | 第18页 |
| 2 试剂及实验设备 | 第18页 |
| 3 实验方法 | 第18-26页 |
| 3.1 拟南芥的种植 | 第18-19页 |
| 3.2 植物基因组DNA 小量提取 | 第19页 |
| 3.3 PCR 扩增目的片断 | 第19-20页 |
| 3.4 RNA 的提取 | 第20页 |
| 3.5 RT-PCR 检测基因转录本的有无 | 第20-21页 |
| 3.6 目的片段的亚克隆及鉴定 | 第21页 |
| 3.7 DNA 琼脂糖电泳 | 第21-22页 |
| 3.8 质粒DNA 的小量提取（碱裂解法） | 第22页 |
| 3.9 DNA 酶切 | 第22页 |
| 3.10 DNA 片段的回收 | 第22页 |
| 3.11 DNA 片段的连接 | 第22页 |
| 3.12 CACL_2 法细菌感受态细胞的制备 | 第22页 |
| 3.13 细菌转化 | 第22-23页 |
| 3.14 农杆菌感受态细胞的制备 | 第23页 |
| 3.15 农杆菌的转化及鉴定 | 第23页 |
| 3.16 拟南芥的转化及筛选 | 第23-24页 |
| 3.17 突变体表型观察 | 第24页 |
| 3.18 突变体在环境胁迫下的耐性分析 | 第24-26页 |
| 3.18.1 热激处理 | 第24页 |
| 3.18.2 冷胁迫 | 第24页 |
| 3.18.3 冻胁迫 | 第24页 |
| 3.18.4 盐胁迫 | 第24-25页 |
| 3.18.5 旱胁迫 | 第25-26页 |
| 结果与分析 | 第26-55页 |
| 第一部分 拟南芥ATJ72 功能及亚细胞定位的研究 | 第26-40页 |
| 1 ATJ72 基因的功能 | 第26-35页 |
| 1.1 ATJ72 基因T-DNA 插入纯合突变体的筛选与鉴定 | 第26-28页 |
| 1.1.1 AtJ72 基因T-DNA 插入位点 | 第26页 |
| 1.1.2 纯合突变体的筛选 | 第26-27页 |
| 1.1.3 突变体中T-DNA 插入拷贝数的鉴定 | 第27-28页 |
| 1.1.4 突变体中AtJ72 基因转录本的鉴定（RT-PCR） | 第28页 |
| 1.2 ATJ72 在植物生长发育过程中的功能 | 第28-32页 |
| 1.2.1 AtJ72 突变对根生长的影响 | 第28-29页 |
| 1.2.2 AtJ72 突变对莲座发育的影响 | 第29页 |
| 1.2.3 AtJ72 突变对抽苔时间的影响 | 第29-30页 |
| 1.2.4 AtJ72 突变对茎高的影响 | 第30页 |
| 1.2.5 AtJ72 突变对下胚轴伸长的影响 | 第30-31页 |
| 1.2.6 AtJ72 突变体与野生型生长进程的比较 | 第31-32页 |
| 1.3 ATJ72 在植物对环境适应中的作用 | 第32-35页 |
| 1.3.1 热激胁迫 | 第32页 |
| 1.3.2 冷、冻胁迫 | 第32-33页 |
| 1.3.3 盐胁迫 | 第33-34页 |
| 1.3.4 水分胁迫 | 第34-35页 |
| 2 ATJ72 蛋白的亚细胞定位 | 第35-40页 |
| 2.1 ATJ72 基因的克隆 | 第35-36页 |
| 2.1.1 RT-PCR 扩增AtJ72 基因 | 第35-36页 |
| 2.1.2 PCR 产物的测序 | 第36页 |
| 2.2 PCAMBIA1300-35S : ATJ72-GFP 双元表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 2.3 ATJ72-GFP 融合基因的遗传转化 | 第37-39页 |
| 2.3.1 双元载体转化农杆菌GV3101 | 第37-38页 |
| 2.3.2 农杆菌转化拟南芥及阳性苗的筛选 | 第38-39页 |
| 2.4 ATJ72 蛋白亚细胞定位的检测 | 第39-40页 |
| 第二部分 拟南芥AtJ70 功能的研究 | 第40-48页 |
| 1 ATJ70 基因T-DNA 插入突变体的鉴定 | 第40-42页 |
| 1.1 ATJ70 基因T-DNA 插入位点 | 第40页 |
| 1.2 ATJ70 基因T-DNA 插入纯合突变体的筛选 | 第40-41页 |
| 1.3 突变体T-DNA 插入拷贝数的鉴定 | 第41页 |
| 1.4 突变体ATJ70 转录本的鉴定（RT-PCR） | 第41-42页 |
| 2 ATJ70 突变体表型的观察 | 第42-45页 |
| 2.1 ATJ70 突变对根生长的影响 | 第42-43页 |
| 2.2 ATJ70 突变对莲座生长的影响 | 第43页 |
| 2.3 ATJ70 突变对茎高的影响 | 第43-44页 |
| 2.4 ATJ70 突变体与野生型生长进程的比较 | 第44-45页 |
| 3 ATJ70 突变体在环境胁迫下的耐性分析 | 第45-48页 |
| 3.1 热激胁迫 | 第45-46页 |
| 3.2 冷，冻胁迫 | 第46-47页 |
| 3.3 盐胁迫 | 第47-48页 |
| 第三部分 拟南芥ATJ24 功能的研究 | 第48-55页 |
| 1 ATJ24 基因T-DNA 插入突变体的鉴定 | 第48-50页 |
| 1.1 ATJ24 基因T-DNA 插入位点 | 第48页 |
| 1.2 ATJ24 基因T-DNA 插入纯合突变体的筛选 | 第48-49页 |
| 1.3 突变体T-DNA 插入拷贝数的鉴定 | 第49页 |
| 1.4 突变体ATJ24 转录本的鉴定（RT-PCR） | 第49-50页 |
| 2 ATJ24 突变体表型的观察 | 第50-52页 |
| 2.1 ATJ24 突变对根生长的影响 | 第50-51页 |
| 2.2 ATJ24 突变对莲座发育的影响 | 第51页 |
| 2.3 ATJ24 突变对茎高的影响 | 第51-52页 |
| 3 ATJ24 基因突变体在环境胁迫下的耐性分析 | 第52-55页 |
| 3.1 热激胁迫 | 第52页 |
| 3.2 冷、冻胁迫 | 第52-53页 |
| 3.3 盐胁迫 | 第53-55页 |
| 讨论 | 第55-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 缩写表 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
