| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第1章 绪论 | 第13-24页 |
| 1.1 灵芝免疫调节蛋白的研究进展 | 第13-17页 |
| 1.1.1 灵芝免疫调节蛋白概述 | 第13-14页 |
| 1.1.2 灵芝免疫调节蛋白的生物学活性 | 第14-15页 |
| 1.1.3 LZ-8 的其他功能 | 第15-16页 |
| 1.1.4 重组灵芝免疫调节蛋白的构建和表达 | 第16-17页 |
| 1.2 肝癌治疗药物的研究进展 | 第17页 |
| 1.3 细胞内吞机制 | 第17-22页 |
| 1.3.1 吞噬 | 第18页 |
| 1.3.2 网格蛋白依赖的内吞 | 第18-19页 |
| 1.3.3 小窝/脂筏依赖的内吞 | 第19-20页 |
| 1.3.4 巨胞饮 | 第20-21页 |
| 1.3.5 网格蛋白和小窝蛋白非依赖的内吞作用 | 第21-22页 |
| 1.4 SRC 激酶 | 第22-23页 |
| 1.4.1 Src 激酶概述 | 第22页 |
| 1.4.2 Src 激酶和内吞的关系 | 第22-23页 |
| 1.5 论文的立题依据 | 第23-24页 |
| 第2章 重组灵芝免疫调节蛋白(RLZ-8)的重组表达、纯化及鉴定 | 第24-41页 |
| 2.1 实验仪器与试剂 | 第24-26页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第24页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.3 试剂配制 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-34页 |
| 2.2.1 rLZ-8 蛋白的全基因合成 | 第26-27页 |
| 2.2.2 重组质粒构建 | 第27-28页 |
| 2.2.3 重组质粒的转化和克隆 | 第28-29页 |
| 2.2.4 pGAPZα A-rLZ-8 转化 X-33 酵母 | 第29-30页 |
| 2.2.5 重组 X-33 酵母的分子生物学鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.6 rLZ-8 的摇瓶小量表达 | 第31页 |
| 2.2.7 rLZ-8 的 SDS-PAGE 与 Western Blot 鉴定 | 第31-32页 |
| 2.2.8 rLZ-8 大规模发酵 | 第32页 |
| 2.2.9 rLZ-8 精细纯化 | 第32-33页 |
| 2.2.10 rLZ-8 的 HPLC 鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.11 rLZ-8 的氨基酸 N 端测序鉴定 | 第34页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第34-40页 |
| 2.3.1 pGAPZα A-rLZ-8 重组表达载体构建 | 第34-36页 |
| 2.3.2 重组 X-33 酵母菌株的获得 | 第36页 |
| 2.3.3 DNA 水平检测 | 第36-37页 |
| 2.3.4 SDS-PAGE 蛋白质水平表达检测 | 第37页 |
| 2.3.5 Western Blot 检测 | 第37-38页 |
| 2.3.6 rLZ-8 工程菌株的大规模发酵 | 第38-39页 |
| 2.3.7 rLZ-8 的精细纯化 | 第39页 |
| 2.3.8 HPLC 进行 rLZ-8 纯度测定 | 第39-40页 |
| 2.3.9 rLZ-8 的 N 端氨基酸测序 | 第40页 |
| 2.4 小结 | 第40页 |
| 2.5 讨论 | 第40-41页 |
| 第3章 重组灵芝免疫调节蛋白（RLZ-8）进入 HEPG2 细胞途径的研究 | 第41-54页 |
| 3.1 实验仪器与试剂 | 第41-43页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第41页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第41-42页 |
| 3.1.3 试剂配制 | 第42-43页 |
| 3.2 实验方法 | 第43-46页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第43页 |
| 3.2.2 rLZ-8 与 Alexa Fluor 568 偶联 | 第43-44页 |
| 3.2.3 rLZ-8-Alexa Fluor 568 在 HepG2 细胞内的定位 | 第44页 |
| 3.2.4 WST-1 检测法 | 第44-45页 |
| 3.2.5 细胞内吞抑制实验 | 第45页 |
| 3.2.6 siRNA 干扰实验 | 第45-46页 |
| 3.2.7 统计学方法 | 第46页 |
| 3.3 实验结果 | 第46-51页 |
| 3.3.1 rLZ-8-Alexa Fluor 568 在 HepG2 细胞内的定位 | 第46-47页 |
| 3.3.2 抑制剂浓度的选择 | 第47-48页 |
| 3.3.3 抑制剂对 HepG2 细胞内吞作用影响 | 第48-50页 |
| 3.3.4 siRNA 干扰对内吞的影响 | 第50-51页 |
| 3.3 小结 | 第51-52页 |
| 3.4 讨论 | 第52-54页 |
| 第4章 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 作者简介 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
