中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
英文缩写词表 | 第12-14页 |
前言 | 第14-16页 |
第一篇 文献综述 | 第16-40页 |
第一章 新城疫病毒的毒力 | 第16-28页 |
1.1 新城疫病毒毒力的确定 | 第17-18页 |
1.2 新城疫病毒 | 第18-19页 |
1.3 决定病毒毒力的主要因素 | 第19-22页 |
1.4 免疫逃逸与病毒毒力 | 第22-24页 |
1.5 复制与毒力 | 第24-28页 |
第二章 病毒的反向遗传学 | 第28-40页 |
2.1 不同类别基因组的反向遗传学 | 第29-31页 |
2.2 反向遗传学的方法 | 第31-36页 |
2.2.1 病毒反向遗传学的策略 | 第31-32页 |
2.2.2 不同启动子的使用 | 第32-34页 |
2.2.3 精确的基因组末端序列 | 第34-35页 |
2.2.4 病毒拯救效率的提高 | 第35-36页 |
2.3 建立反向遗传操作系统所面临的困难 | 第36-38页 |
2.4 进行反向遗传学是否需要界限 | 第38-40页 |
第二篇 研究内容 | 第40-102页 |
第一章 鹅源新城疫病毒 NA-1 株全长 cDNA 感染性克隆的构建 | 第40-66页 |
1.1 材料 | 第40-42页 |
1.1.1 病毒 | 第40-41页 |
1.1.2 主要试剂 | 第41页 |
1.1.3 仪器设备 | 第41页 |
1.1.4 试剂配制 | 第41-42页 |
1.2 方法 | 第42-54页 |
1.2.1 病毒的繁殖 | 第42-43页 |
1.2.2 病毒基因组的克隆 | 第43-48页 |
1.2.3 病毒感染性克隆的构建及分子标签的引入 | 第48-53页 |
1.2.4 病毒全基因组感染性克隆的鉴定 | 第53-54页 |
1.3 结果 | 第54-62页 |
1.3.1 病毒基因组六个片段的扩增 | 第54-56页 |
1.3.2 菌液 PCR 和酶切鉴定结果 | 第56-61页 |
1.3.3 全长感染性克隆 PCR 鉴定和酶切结果 | 第61-62页 |
1.4 讨论 | 第62-65页 |
1.5 小结 | 第65-66页 |
第二章 NA-1 株 NP 基因 5′非编码区的缺失及感染性克隆的构建 | 第66-80页 |
2.1 材料 | 第66-67页 |
2.1.1 质粒和细胞 | 第66页 |
2.1.2 主要试剂 | 第66页 |
2.1.3 仪器设备 | 第66-67页 |
2.1.4 试剂配制 | 第67页 |
2.2 方法 | 第67-71页 |
2.2.1 NP 基因 5′非编码区六个碱基的敲除 | 第67-69页 |
2.2.2 包含缺失位点的感染性克隆的构建及鉴定 | 第69-71页 |
2.3 结果 | 第71-75页 |
2.3.1 NP 基因 5′非编码区六个碱基的敲除结果 | 第71-73页 |
2.3.3 包含缺失位点的感染性克隆的鉴定结果 | 第73-75页 |
2.4 讨论 | 第75-78页 |
2.5 小结 | 第78-80页 |
第三章 鹅源新城疫病毒的拯救及生物学鉴定 | 第80-102页 |
3.1 材料 | 第80-82页 |
3.1.1 质粒和细胞 | 第80页 |
3.1.2 主要试剂 | 第80-81页 |
3.1.3 仪器设备 | 第81页 |
3.1.4 试剂配制 | 第81-82页 |
3.2 方法 | 第82-89页 |
3.2.1 质粒的提取 | 第82-83页 |
3.2.2 细胞的准备 | 第83-84页 |
3.2.3 病毒的拯救 | 第84-86页 |
3.2.4 对拯救的病毒进行鉴定 | 第86-88页 |
3.2.5 病毒毒力的测定 | 第88-89页 |
3.3 结果 | 第89-98页 |
3.3.1 病毒拯救过程中细胞与鸡胚病变情况 | 第89-91页 |
3.3.2 HA 实验结果 | 第91-92页 |
3.3.3 RT-PCR 实验结果 | 第92-93页 |
3.3.4 分子标签鉴定结果 | 第93-94页 |
3.3.5 电镜观察结果 | 第94-96页 |
3.3.6 病毒遗传稳定性鉴定结果 | 第96-97页 |
3.3.7 病毒生长动力学曲线结果 | 第97-98页 |
3.3.8 病毒毒力测定结果 | 第98页 |
3.4 讨论 | 第98-101页 |
3.5 小结 | 第101-102页 |
结论 | 第102-104页 |
参考文献 | 第104-120页 |
导师简介 | 第120-122页 |
作者简介及攻读学位期间发表的论文 | 第122-124页 |
致谢 | 第124页 |