| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-23页 |
| 1.1 研究背景 | 第12页 |
| 1.2 肿瘤微环境 | 第12-15页 |
| 1.2.1 肿瘤微环境与肺癌相关性研究进展 | 第13页 |
| 1.2.2 肿瘤微环境在肿瘤免疫逃避中的作用 | 第13-14页 |
| 1.2.3 肿瘤微环境的临床意义 | 第14-15页 |
| 1.3 肿瘤与免疫逃逸 | 第15-17页 |
| 1.3.1 肿瘤免疫调节机制 | 第15-16页 |
| 1.3.2 T细胞与肿瘤免疫逃逸关系 | 第16页 |
| 1.3.3 肿瘤产生的细胞因子与免疫逃逸 | 第16-17页 |
| 1.4 IDO与肿瘤免疫逃逸 | 第17-20页 |
| 1.4.1 IDO的生物学特征 | 第17页 |
| 1.4.2 IDO在肿瘤免疫逃逸中的作用 | 第17-19页 |
| 1.4.3 IDO与T细胞的关系 | 第19页 |
| 1.4.4 IDO抑制剂研究进展 | 第19-20页 |
| 1.5 肺积方治疗作用研究进展 | 第20页 |
| 1.6 黄芪甲苷研究进展及应用 | 第20-21页 |
| 1.7 研究目标、内容、创新点及意义 | 第21-23页 |
| 1.7.1 研究目标 | 第21页 |
| 1.7.2 研究内容 | 第21页 |
| 1.7.3 研究创新点 | 第21-22页 |
| 1.7.4 研究意义 | 第22-23页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第23-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第23页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第23页 |
| 2.1.3 实验药物 | 第23页 |
| 2.1.4 常用生化和免疫试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.5 一般试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.6 试剂盒 | 第25页 |
| 2.2 仪器与设备 | 第25-27页 |
| 2.3 常用试剂配制 | 第27-29页 |
| 2.4 常用实验方法 | 第29-34页 |
| 2.4.1 高压灭菌 | 第29-30页 |
| 2.4.2 细胞培养 | 第30页 |
| 2.4.3 组织中总蛋白提取 | 第30-31页 |
| 2.4.4 蛋白定量 | 第31页 |
| 2.4.5 Western blot试验 | 第31-32页 |
| 2.4.6 总RNA提取 | 第32页 |
| 2.4.7 琼脂糖凝胶电泳 | 第32-33页 |
| 2.4.8 动物基础实验 | 第33-34页 |
| 第3章 肺积方和黄芪甲苷对IDO过表达原位肺癌模型免疫功能的影响 | 第34-47页 |
| 3.1 引言 | 第34-35页 |
| 3.2 实验材料 | 第35-36页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第35页 |
| 3.2.2 细胞株 | 第35页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第35-36页 |
| 3.2.4 主要设备 | 第36页 |
| 3.3 实验方法 | 第36-41页 |
| 3.3.1 药品和试剂配制 | 第36页 |
| 3.3.2 IDO过表达EGFP-2LL细胞株鉴定 | 第36-38页 |
| 3.3.3 小鼠原位肺癌模型建立 | 第38-39页 |
| 3.3.4 小鼠原位肺癌模型验证 | 第39页 |
| 3.3.5 肺积方和AS-Ⅳ对荷瘤小鼠整体生存质量的影响 | 第39页 |
| 3.3.6 肺积方和AS-Ⅳ对荷瘤小鼠整体免疫功能的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.7 MTT法检测脾脏T细胞和B细胞增殖能力 | 第40页 |
| 3.3.8 统计分析 | 第40-41页 |
| 3.4 实验结果 | 第41-46页 |
| 3.4.1 IDO过表达EGFP-2LL细胞形态学鉴定 | 第41页 |
| 3.4.2 IDO过表达EGFP-2LL细胞IDO基因水平表达 | 第41-42页 |
| 3.4.3 IDO过表达EGFP-2LL细胞IDO蛋白水平表达 | 第42-43页 |
| 3.4.4 小鼠原位肺癌模型建立及验证 | 第43-44页 |
| 3.4.5 肺积方和AS-Ⅳ对荷瘤小鼠整体生存质量的影响 | 第44-45页 |
| 3.4.6 肺积方和AS-Ⅳ对荷瘤小鼠免疫功能的影响 | 第45-46页 |
| 3.5 讨论 | 第46-47页 |
| 第4章 肺积方和黄芪甲苷对荷瘤小鼠肺癌微环境和外周免疫逃逸研究 | 第47-56页 |
| 4.1 引言 | 第47页 |
| 4.2 实验材料 | 第47-49页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第47-48页 |
| 4.2.2 主要设备 | 第48-49页 |
| 4.3 实验方法 | 第49-51页 |
| 4.3.1 药品和试剂配制 | 第49页 |
| 4.3.2 小鼠原位肺癌模型建立 | 第49页 |
| 4.3.3 血清收集 | 第49页 |
| 4.3.4 提取小鼠肿瘤中淋巴细胞 | 第49-50页 |
| 4.3.5 流式细胞术分析淋巴细胞中CD4~+和CD8~+T细胞亚群比例 | 第50页 |
| 4.3.6 ELISA法检测血清中IL-10及TGF-β水平 | 第50-51页 |
| 4.3.7 统计分析 | 第51页 |
| 4.4 实验结果 | 第51-55页 |
| 4.4.1 肺积方和AS-Ⅳ对肺癌微环境中CD4~+CD25~+Treg细胞影响 | 第51-53页 |
| 4.4.2 肺积方和AS-Ⅳ对肺癌微环境中CD8~+CD28~+CTL细胞影响 | 第53-54页 |
| 4.4.3 肺积方和AS-Ⅳ对外周血中免疫抑制因子分泌水平影响 | 第54-55页 |
| 4.5 讨论 | 第55-56页 |
| 第5章 肺积方和黄芪甲苷对荷瘤小鼠微环境IDO表达及酶活性作用研究 | 第56-65页 |
| 5.1 引言 | 第56页 |
| 5.2 实验材料 | 第56-57页 |
| 5.2.1 主要试剂 | 第56-57页 |
| 5.2.2 主要设备 | 第57页 |
| 5.3 实验方法 | 第57-59页 |
| 5.3.1 药品和试剂配制 | 第57-58页 |
| 5.3.2 小鼠原位肺癌模型建立 | 第58页 |
| 5.3.3 血清收集 | 第58页 |
| 5.3.4 肺癌组织中IDO表达水平检测 | 第58-59页 |
| 5.3.5 IDO体内酶活性检测 | 第59页 |
| 5.3.6 统计分析 | 第59页 |
| 5.4 实验结果 | 第59-63页 |
| 5.4.1 肺癌组织cDNA模板验证 | 第59-60页 |
| 5.4.2 肺癌组织中IDO mRNA表达水平 | 第60-61页 |
| 5.4.3 肺癌组织中IDO蛋白表达水平 | 第61-62页 |
| 5.4.4 外周血中色氨酸和犬尿氨酸含量 | 第62-63页 |
| 5.5 讨论 | 第63-65页 |
| 第6章 肺积方和黄芪甲苷对IDO介导的免疫相关机制作用研究 | 第65-75页 |
| 6.1 引言 | 第65页 |
| 6.2 实验材料 | 第65-67页 |
| 6.2.1 主要试剂 | 第66页 |
| 6.2.2 主要设备 | 第66-67页 |
| 6.3 实验方法 | 第67-68页 |
| 6.3.1 小鼠原位肺癌模型建立 | 第67页 |
| 6.3.2 肺癌组织中免疫检查点表达水平检测 | 第67页 |
| 6.3.3 肺癌组织中关键免疫相关基因mRNA表达水平检测 | 第67-68页 |
| 6.3.4 肺癌组织中关键免疫调控因子蛋白水平检测 | 第68页 |
| 6.3.5 血清中Th1免疫相关因子分泌水平检测 | 第68页 |
| 6.3.6 统计分析 | 第68页 |
| 6.4 实验结果 | 第68-73页 |
| 6.4.1 肺积方和AS-Ⅳ对肺癌微环境中免疫检查点表达水平研究 | 第68-69页 |
| 6.4.2 肺积方和AS-Ⅳ调控免疫检查点表达水平机制研究 | 第69-70页 |
| 6.4.3 肺积方和AS-Ⅳ调控关键免疫调控因子表达水平机制研究 | 第70-72页 |
| 6.4.4 肺积方和AS-Ⅳ调控免疫相关细胞因子分泌研究 | 第72-73页 |
| 6.5 讨论 | 第73-75页 |
| 第7章 结论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 论文发表情况 | 第88页 |
