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JZTX-V与Kv4.2通道相互作用机制的研究

中文摘要第3-5页
ABSTRACT第5-7页
第一章 多肽毒素研究进展第11-24页
    1.1 引言第11页
    1.2 多肽毒素第11-16页
        1.2.1 蜘蛛多肽毒素第11-14页
        1.2.2 其它多肽毒素第14-16页
    1.3 瞬时外向钾离子通道第16-21页
        1.3.1 钾离子通道的结构和分类第16-19页
        1.3.2 钾离子通道激活、失活机制第19页
        1.3.3 Kv4.2通道第19-20页
        1.3.4 钾离子通道的辅助亚基KChIP第20-21页
    1.4 钾离子通道毒素第21-22页
    1.5 本课题的研究背景和意义第22-24页
第二章 Kv4.2通道上与JZIX-V相互作用的关键残基的检测第24-41页
    2.1 前言第24-25页
    2.2 材料与方法第25-33页
        2.2.1. 试剂与材料第25页
        2.2.2 钠通道突变体的构建第25-30页
            2.2.2.1 突变体质粒构建第25-26页
            2.2.2.2 野生型Kv4.2质粒的甲基化第26-27页
            2.2.2.3 对野生型Kv4.2质粒进行体外定点突变第27-30页
        2.2.3 人陪肾细胞(HEK283T)细胞培养和转染第30-32页
            2.2.3.1 细胞冻存第30页
            2.2.3.2 细胞复苏第30-31页
            2.2.3.3 细胞传代第31页
            2.2.3.4 细胞转染第31-32页
        2.2.4 膜片钳活性分析第32-33页
    2.3 试验结果第33-39页
        2.3.1 JZTX-V与Kv4.2的相互作用第33-35页
            2.3.1.1 JZTX-V与野生型Kv4.2的浓效关系第33页
            2.3.1.2 JZTX-V对野生型Kv4.2激活动力学和失活动力学的影响第33-35页
            2.3.1.3 JZTX-V对野生型Kv4.2恢复时间常数的影响第35页
        2.3.2 Kv4.2通道突变体构建第35-37页
        2.3.3 JZTX-V和Kv4.2突变体相互作用第37-39页
    2.4 讨论第39-41页
第三章 JZTX-V突变体与Kv4.2通道相互作用第41-53页
    3.1 前言第41页
    3.2 材料与方法第41-46页
        3.2.1 试剂与材料第42页
        3.2.2 JZTX-V及突变体合成、纯化第42-45页
            3.2.2.1 JZTX-V及突变体合成第42-43页
            3.2.2.2 多肽的分离纯化第43页
            3.2.2.3 质谱鉴定第43-44页
            2.2.2.4 多肤毒素的复性第44页
            3.2.2.5 复性后多肽的分离纯化第44-45页
            3.2.2.6 质谱鉴定第45页
        3.2.3 脂质体转染第45-46页
        3.2.4 JZTX-V及突变体二级结构测定第46页
    3.3 试验结果第46-50页
        3.3.1 JZTX-V合成第46-48页
        3.3.2 JZTX-V及其突变体活性测定第48-50页
    3.4 讨论第50-53页
第四章 主要研究结论与进一步研究设想第53-54页
参考文献第54-65页
缩写表(中英文对照)第65-66页
致谢第66-68页

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