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‘白鸡冠茶树响应光调控的基因差异及理化特征分析

摘要第11-15页
ABSTRACT第15-20页
缩略词表第21-22页
第一章 前言第22-36页
    1 新梢白化茶树生理生化及其叶色形成机理研究进展第22-27页
        1.1 茶树新梢白化类型第22-23页
            1.1.1 根据茶树与生态环境的关系分类第22页
            1.1.2 根据茶树新梢的颜色分类第22-23页
        1.2 生理水平研究第23页
            1.2.1 显微及超微结构研究第23页
            1.2.2 酶活性研究第23页
        1.3 生化水平研究第23-24页
        1.4 分子水平研究第24-27页
            1.4.1 茶树芽叶白化种质DNA分子标记研究第24-25页
            1.4.2 茶树新梢白化基因差异表达研究第25-26页
            1.4.3 与品质和叶色相关基因的克隆第26页
            1.4.4 茶树新梢白化蛋白质组学研究第26-27页
    2 植物白化叶色产生机制第27-30页
        2.1 外在因素第27页
        2.2 内在因素第27-30页
            2.2.1 光合色素生物合成途径中的基因突变第27-29页
            2.2.2 叶绿体分化与发育相关基因的突变第29页
            2.2.3 捕光色素蛋白复合体相关的基因突变第29-30页
            2.2.4 光敏色素生色团生物途径中基因突变第30页
            2.2.5 与光合系统无直接关系的基因突变第30页
    3 RNA-SEQ和DGE技术及其在基因差异表达中的应用第30-32页
        3.1 RNA-Seq和DGE技术原理及其优势第31页
        3.2 RNA-Seq和DGE技术在茶树基因差异表达上的应用现状及前景第31-32页
    4 本研究的目的及意义第32-33页
    5 研究内容第33-35页
        5.1 确定‘白鸡冠’茶树叶色白化的类型第33页
        5.2 ‘白鸡冠’茶树响应光调控的转录组特征分析第33页
        5.3 ‘白鸡冠’茶树响应光调控的基因表达谱差异分析第33页
        5.4 ‘白鸡冠’茶树响应光调控和叶色白化相关基因的挖掘第33页
        5.5 光照对‘白鸡冠’茶树超微结构及体内防御酶的影响研究第33-34页
        5.6 光照对‘白鸡冠’茶树主要呈味物质及香气组分的影响研究第34-35页
    6 技术路线第35-36页
第二章 光照和温度对‘白鸡冠,茶树新梢白化的影响第36-47页
    1 材料与方法第36-38页
        1.1 试验材料第36-37页
        1.2 试验方法第37-38页
            1.2.1 叶绿素含量检测第37-38页
            1.2.2 数据统计与分析第38页
    2 结果与分析第38-45页
        2.1 ‘白鸡冠’在自然条件下的表型及叶绿素积累特性第38-40页
            2.1.1 自然条件下表型特征第38-39页
            2.1.2 自然条件下光合色素分析第39-40页
        2.2 光照和温度对‘白鸡冠’茶树白化表型及色素含量的影响第40-45页
            2.2.1 光强和温度对‘白鸡冠’茶树表型及色素含量的影响第40-43页
            2.2.2 不同遮荫程度对‘白鸡冠’表型及叶绿素相对含量的影响第43-44页
            2.2.3 半叶法遮荫对‘白鸡冠’茶树白化表型和叶绿素的影响第44-45页
    3 讨论第45-46页
        3.1 光照对新梢白化茶树表型性状的影响第45-46页
        3.2 确定以外界遮荫进行取样第46页
    4 小结第46-47页
第三章 ‘白鸡冠’茶树叶片应答光照的转录组分析第47-62页
    1 材料与方法第47-51页
        1.1 试验材料第47页
        1.2 试验方法第47-51页
            1.2.1 茶树总RNA提取及质量检测第47-48页
            1.2.2 cDNA文库构建及Illumina高通量测序第48-49页
            1.2.3 数据评估、组装及功能注释第49-51页
    2 结果与分析第51-60页
        2.1 茶树总RNA提取质量分析第51-52页
        2.2 De novo转录本测序和组装结果第52-53页
        2.3 基因注释第53-60页
            2.3.1 功能注释结果统计第53-55页
            2.3.2 GO分类第55-57页
            2.3.3 KOG注释第57-58页
            2.3.4 KEGG通路注释第58-59页
            2.3.5 转录因子第59-60页
    3 讨论第60-61页
    4 小结第61-62页
第四章 ‘白鸡冠’茶树叶片差异基因表达谱(DGE)特征分析第62-79页
    1 材料与方法第62-64页
        1.1 试验材料第62页
        1.2 试验方法第62-64页
            1.2.1 RNA提取及质量检测第62页
            1.2.2 文库构建及测序第62页
            1.2.3 数据评估、组装及功能注释第62-63页
            1.2.4 基因表达水平分析第63页
            1.2.5 差异基因表达分析第63-64页
            1.2.6 上调和下调差异表达基因火山图第64页
            1.2.7 差异基因GO富集分析第64页
            1.2.8 差异基因KEGG富集分析第64页
    2 结果与分析第64-77页
        2.1 测序数据的产出和表达谱reads的注释第64-65页
        2.2 样品间相关性检验第65-66页
        2.3 不同处理组之间的差异表达基因分析第66-67页
        2.4 上调和下调差异表达基因火山图第67-68页
        2.5 差异表达基因GO功能富集分析第68-73页
            2.5.1 下调差异基因的GO富集分析第68-73页
            2.5.2 上调差异基因的GO富集分析第73页
        2.6 差异基因的KEGG代谢通路富集分析及其表达模式第73-77页
    3 讨论第77-78页
        3.1 无参转录组测序结合基因表达谱测序的适用性探讨第77页
        3.2 DGE技术的高重复性及其高通量第77-78页
        3.3 差异表达基因及其模式分析第78页
    4 小结第78-79页
第五章 ‘白鸡冠’茶树响应光调控及叶色相关基因挖掘第79-106页
    1 材料与方法第79-81页
        1.1 试验材料第79页
        1.2 试验方法第79-81页
            1.2.1 茶树共有差异表达基因维恩图第79页
            1.2.2 GO注释及DAG功能富集第79-80页
            1.2.3 实时荧光定量PCR验证第80-81页
    2 结果与分析第81-104页
        2.1 不同遮荫处理时间差异基因集分析第81-90页
            2.1.1 不同遮荫处理时间差异基因对比第81页
            2.1.2 处理组间共有上调差异表达基因GO注释及其功能富集第81-85页
            2.1.3 处理组间共有下调差异表达基因GO注释及其功能富集第85-88页
            2.1.4 处理组共有差异表达基因鉴定转录因子第88-90页
        2.2 处理组与对照组差异基因集分析第90-95页
            2.2.1 处理组与对照组差异基因对比第90-91页
            2.2.2 处理间(T6d_Z vs.T3d_Z)上调差异表达基因GO注释及其功能富集第91页
            2.2.3 处理间(T6d_Z vs.T3d_Z)下调差异表达基因GO注释及其功能富集第91-95页
        2.3 响应光调控及叶色相关基因实时荧光定量PCR验证第95-104页
            2.3.1 RNA电泳图第95-96页
            2.3.2 目的基因及内参基因扩增效率分析第96-97页
            2.3.3 荧光定量PCR验证DEGs第97-99页
            2.3.4 遮荫对‘白鸡冠’叶片叶绿素代谢途径关键基因表达的影响及其表达模式第99-100页
            2.3.5 ‘白鸡冠’不同叶位叶绿素代谢途径相关基因表达模式分析第100-104页
    3 讨论第104-105页
        3.1 响应光信号的转录因子第104-105页
        3.2 富集与细胞壁重构相关基因第105页
        3.3 叶绿素合成途径基因受抑制第105页
    4 小结第105-106页
第六章 ‘白鸡冠’茶树响应光调控的生理生化变化第106-126页
    1 材料与方法第107-112页
        1.1 试验材料第107-108页
        1.2 试验方法第108-112页
            1.2.1 叶绿体超微结构检测第108-109页
            1.2.2 茶树体内防御酶及丙二醛检测第109-111页
            1.2.3 光合色素测定第111页
            1.2.4 茶树主要呈味物质测定第111页
            1.2.5 茶树香气成分测定第111-112页
            1.2.6 数据统计与分析第112页
    2 结果与分析第112-123页
        2.1 光照对叶绿体超微结构的影响第112-115页
        2.2 光照对‘白鸡冠’茶树保护性酶酶活性及MDA变化第115-117页
            2.2.1 遮荫前‘白鸡冠’茶树保护性酶酶活性及MDA含量第115-116页
            2.2.2 遮荫处理对‘白鸡冠’茶树保护性酶酶活性及MDA的影响第116-117页
        2.3 光照对‘白鸡冠’光合色素的影响第117-118页
        2.4 光照对‘白鸡冠’主要呈味物质的影响第118-120页
            2.4.1 不同季节‘白鸡冠’主要呈味物质分析第118-119页
            2.4.2 光强对‘白鸡冠’主要呈味物质的影响第119-120页
        2.5 光强对‘白鸡冠’茶树香气的影响第120-123页
    3 讨论第123-125页
        3.1 光照对新梢白化茶树叶绿体结构的影响第123-124页
        3.2 光照对新梢白化茶树体内过氧化物酶的影响第124页
        3.3 光照对新梢白化茶树色素积累的影响第124页
        3.4 光照对新梢白化茶树主要呈味物质的影响第124-125页
        3.5 光照对‘白鸡冠’茶树香气成分的影响第125页
    4 小结第125-126页
第七章 总结与讨论第126-131页
    7.1 本研究主要研究结果第126-127页
    7.2 讨论第127-130页
        7.2.1 ‘白鸡冠’叶色表型及叶绿体发育与光合系统Ⅱ密切相关第127-128页
        7.2.2 遮荫降低光氧化损伤,修复叶绿体结构第128页
        7.2.3 ‘白鸡冠’白化表型与光合色素代谢和叶绿体发育密切相关第128-130页
    7.3 展望第130-131页
参考文献第131-139页
附录第139-150页
致谢第150-152页
作者简介第152-153页

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