| 缩写表 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-24页 |
| 第一节 核磁共振在研究蛋白质结构中的应用 | 第12-18页 |
| ·核磁共振技术的历史 | 第12-13页 |
| ·核磁共振技术对生物大分子溶液结构的测定 | 第13-14页 |
| ·核磁共振技术对生物大分子溶液结构的测定的基本流程 | 第14-16页 |
| ·核磁共振技术对蛋白与蛋白间相互作用的测定 | 第16-18页 |
| 第二节 CUE 结构域与泛素 | 第18-22页 |
| 第三节 CUEDC2 的研究背景 | 第22-24页 |
| 第二章 CUEDC2 溶液结构初步探索 | 第24-33页 |
| 第一节 核磁样品的制备和优化 | 第24-29页 |
| ·仪器和试剂 | 第24页 |
| ·CUEDC2(1-190) 核磁共振样品的准备 | 第24-29页 |
| ·CUEDC2(1-190) 重组质粒的构建 | 第25页 |
| ·融合蛋白质His-CUEDC2(1-190)的表达和纯化 | 第25-27页 |
| ·关于蛋白的稳定性实验 | 第27页 |
| ·核磁共振所用标记蛋白的表达和纯化 | 第27-28页 |
| ·核磁共振样品制备 | 第28-29页 |
| 第二节 NMR 实验与化学位移归属 | 第29-33页 |
| ·CUEDC2(1-190) 的多维核磁共振实验 | 第29页 |
| ·谱图处理 | 第29页 |
| ·序列相关性化学位移归属 | 第29-30页 |
| ·His-CUEDC2(1-190)的一维1H 实验和1H-15N HSQC 实验结果 | 第30-31页 |
| ·化学位移归属结果 | 第31-33页 |
| 第三章 CUEDC2 各截段体与泛素的相互作用初步探索 | 第33-48页 |
| 第一节 CUEDC2 各截断体与泛素蛋白的制备 | 第33-37页 |
| ·CUEDC2 各截断体的样品的制备 | 第33-34页 |
| ·CUEDC2(133-190)结构域的样品制备与鉴定 | 第33-34页 |
| ·泛素蛋白溶液的制备 | 第34-37页 |
| ·泛素的克隆、表达纯化 | 第34-36页 |
| ·泛素的鉴定 | 第36-37页 |
| 第二节 CUEDC2 各截断体与泛素体外生物学的相互作用 | 第37-42页 |
| ·CUEDC2(1-190)与泛素的体外相互作用 | 第37-38页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE 鉴定相互作用结果 | 第38-39页 |
| ·免疫共沉淀鉴定相互作用结果 | 第39-42页 |
| 第三节 HSQC 谱监测CUEDC2(1-190)与泛素的相互作用 | 第42-47页 |
| ·NMR 二维1H-15N HSQC 谱监测CUEDC2(1-190)与Ub 的相互作用 | 第42-47页 |
| ·CUEDC2(1-190)与泛素的相互作用在二维谱中监测结果 | 第42-45页 |
| ·相互作用复合物的稳定性观察 | 第45-47页 |
| 第四节 本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 CUEDC2（1-133）初始结构的研究 | 第48-59页 |
| 第一节 蛋白质样品的制备 | 第48-50页 |
| ·CUEDC2(1-133) 的克隆、蛋白质的表达和纯化 | 第48-50页 |
| ·CUEDC2(1-133) 重组质粒的构建 | 第48页 |
| ·CUEDC2(1-133) 的克隆、蛋白质的表达和纯化 | 第48-49页 |
| ·CUEDC2(1-133) 13C、15N 标记蛋白的表达纯化 | 第49-50页 |
| 第二节 CUEDC2(1-133)的多维核磁共振实验与化学位移归属 | 第50-59页 |
| ·CUEDC2(1-133) 的多维核磁共振实验 | 第50页 |
| ·CUEDC2(1-133) 与CUEDC2(1-190）二维1H-15N HSQC 谱图比对分析 | 第50-51页 |
| ·谱图处理 | 第51-52页 |
| ·序列相关性化学位移归属 | 第52-54页 |
| ·初始结构计算 | 第54-59页 |
| ·CUEDC2(1-133)的二级结构分析 | 第54-55页 |
| ·CUEDC2(1-133)的初始结构计算 | 第55-56页 |
| ·CUEDC2(1-133)的溶液结构计算过程如下 | 第56-57页 |
| ·CUEDC2(1-133)的初始结构 | 第57-59页 |
| 第五章 总结与展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 综述：核磁共振技术在结构解析与生物学功能上的应用 | 第64-72页 |
| 参考文献 | 第70-72页 |
| 附录 | 第72-84页 |
| 附录一 | 第72-73页 |
| 附录二 | 第73-74页 |
| 附录三 | 第74-83页 |
| 附录四 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
