中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
本研究中所使用的缩略语 | 第10-11页 |
前言 | 第11-19页 |
1 鼠疫的危害 | 第11-12页 |
2 鼠疫菌病原学和传播的研究概况 | 第12-15页 |
·鼠疫菌的生理生化特征 | 第12-13页 |
·鼠疫菌的传播和致病过程 | 第13-14页 |
·鼠疫菌传播中的环境压力研究概况 | 第14-15页 |
3 非编码 RNA 的研究概况 | 第15-18页 |
·ncRNA 在生命活动中发挥至关重要的作用 | 第15-16页 |
·细菌中的 sRNA | 第16-17页 |
·鼠疫菌中 sRNA 的研究现状 | 第17-18页 |
4 研究目的和意义 | 第18-19页 |
第一章 鼠疫菌非编码 RNA 的 cDNA 文库构建 | 第19-53页 |
1 引言 | 第19-20页 |
2 CDNA 文库的构建策略 | 第20-21页 |
3 实验材料 | 第21-25页 |
·菌株和载体 | 第21页 |
·细菌培养基 | 第21-24页 |
·试剂与耗材 | 第24-25页 |
4 实验方法 | 第25-42页 |
·细菌培养 | 第25-26页 |
·总 RNA 的提取及质量检测 | 第26-28页 |
·总 RNA 的片段分离 | 第28-31页 |
·去除 rRNA 和高峰度重复序列 | 第31-34页 |
·连接 3’和 5’接头 | 第34-38页 |
·逆转录 | 第38-39页 |
·定向克隆 | 第39-42页 |
5 结果与讨论 | 第42-52页 |
·RNA 的质量监控 | 第42-43页 |
·cDNA 文库的构建 | 第43-49页 |
·cDNA 文库的测序结果及分析 | 第49-52页 |
6 结论 | 第52-53页 |
第二章 SRNA 的验证 | 第53-92页 |
1 引言 | 第53-54页 |
2 实验方案 | 第54-55页 |
3 实验材料与方法 | 第55-67页 |
·试剂与耗材 | 第55页 |
·制备 Northern Blot 探针 | 第55-57页 |
·Northern Blot 杂交验证 | 第57-60页 |
·Real‐time PCR | 第60-62页 |
·3’RACE | 第62-64页 |
·alkA 启动子缺失突变株的构建与分析 | 第64-67页 |
4 结果与讨论 | 第67-91页 |
·Antisense sRNA(AS sRNA) | 第67-76页 |
·基因间区 sRNA(IGR sRNA) | 第76-79页 |
·possible IGR operon sRNA 的研究 | 第79-80页 |
·跨 2 个 ORF 的 sRNA | 第80-83页 |
·Repetitive sRNA 的验证与研究 | 第83-85页 |
·UTR sRNA 的验证 | 第85-88页 |
·已知 sRNA 的分析 | 第88-90页 |
·RACE 实验结果 | 第90页 |
·鼠疫菌 sRNA 的二级结构分析 | 第90-91页 |
5 结论 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-97页 |
文献综述 | 第97-112页 |
参考文献 | 第107-112页 |
附录 1 | 第112-123页 |
附录 2 | 第123-131页 |
个人简历 | 第131-132页 |
致谢 | 第132-133页 |