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传染性鲑鱼贫血症病毒M1蛋白的结构与功能研究

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
缩略语表(Abbreviation)第11-15页
第1章 文献综述第15-29页
    1.1 正粘病毒第15-24页
        1.1.1 A型流感病毒的概述第15-19页
        1.1.2 传染性鲑鱼贫血症病毒的概述第19-24页
    1.2 M1蛋白第24-29页
第2章 材料与方法第29-47页
    2.1 材料第29-33页
        2.1.1 主要试剂第29页
        2.1.2 主要缓冲液以及凝胶的配制第29-33页
        2.1.3 主要仪器设备第33页
    2.2 方法第33-47页
        2.2.1 基因克隆以及质粒构建第33-38页
            2.2.1.2 目的基因的PCR扩增第34-35页
            2.2.1.3 PCR产物的电泳及回收第35-36页
            2.2.1.4 DNA片段和载体的酶切第36页
            2.2.1.5 DNA片段和载体的连接第36页
            2.2.1.6 连接产物的转化第36-37页
            2.2.1.7 重构的质粒提取和鉴定第37-38页
            2.2.1.8 本研究使用的载体和构建的重组质粒第38页
        2.2.2 蛋白的表达和纯化第38-40页
            2.2.2.1 蛋白的小量表达实验第38-39页
            2.2.2.2 标签蛋白的大量表达和纯化第39-40页
            2.2.2.3 蛋白质浓度的准确测定第40页
        2.2.3 晶体生长实验第40-41页
            2.2.3.1 结晶前蛋白的准备第40页
            2.2.3.2 结晶条件的初步筛选第40-41页
            2.2.3.3 结晶条件的优化第41页
        2.2.4 数据收集和结构解析第41-43页
            2.2.4.1 防冻剂的选择第41-42页
            2.2.4.2 数据收集第42页
            2.2.4.3 数据的处理第42页
            2.2.4.4 结构解析和修正第42-43页
        2.2.5 脂质体结合实验第43-44页
        2.2.6 荧光偏振分析第44-45页
        2.2.7 共迁移实验第45页
        2.2.8 ISAV的冷冻电子断层成像第45-46页
        2.2.9 Pull-down实验第46页
        2.2.10 转染实验第46-47页
第3章 结果与分析第47-85页
    3.1 M1及其他相关蛋白的纯化第47-48页
    3.2 M1蛋白晶体生长条件的筛选和优化第48-52页
    3.3 M1蛋白数据收集与结构解析第52-56页
    3.4 M1蛋白晶体结构特征第56-66页
        3.4.1 ISAV-M1蛋白单体的结构特征第56-60页
        3.4.2 ISAV-M1与FLUA-M1的结构比较第60-62页
        3.4.3 ISAV-M1的空间聚合状态第62-66页
    3.5 ISAV-M1的膜结合功能第66-70页
    3.6 ISAV-M1的RNA结合功能第70-74页
    3.7 低温冷冻电镜断层扫描技术研究ISAV病毒颗粒第74-76页
    3.8 ISAV M1和NEP的亚细胞定位第76-79页
    3.9 ISAV M1和NEP的相互作用第79页
    3.10 Hsc70与ISAV M1或/和NEP的共定位第79-81页
    3.11 Hsc70与ISAV M1或/和NEP的相互作用第81-85页
第4章 讨论第85-89页
第5章 总结第89-90页
参考文献第90-101页
致谢第101-102页
附录第102-103页

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