| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表（Abbreviation） | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 抗病毒天然免疫概述 | 第12-17页 |
| 1.1.1 抗病毒天然免疫简介 | 第12页 |
| 1.1.2 病原相关分子模式（PAMPs） | 第12页 |
| 1.1.3 模式识别受体（PRR） | 第12-15页 |
| 1.1.4 PRRs介导的天然免疫信号转导 | 第15-16页 |
| 1.1.5 IFN-β 转录激活机制 | 第16-17页 |
| 1.2 ETS家族蛋白及ELF4概述 | 第17-20页 |
| 1.2.1 ETS家族蛋白概述 | 第17页 |
| 1.2.2 ELF4简介 | 第17-20页 |
| 2 研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 3 材料和方法 | 第21-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第21-26页 |
| 3.1.1 细胞、毒株与菌株 | 第21页 |
| 3.1.2 载体与质粒 | 第21-22页 |
| 3.1.3 工具酶及主要试剂 | 第22-23页 |
| 3.1.4 Western blot实验所需材料 | 第23页 |
| 3.1.5 培养基及其配制 | 第23-24页 |
| 3.1.6 主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第24-25页 |
| 3.1.7 主要实验仪器及设备 | 第25-26页 |
| 3.1.8 分子生物学分析软件 | 第26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-42页 |
| 3.2.1 RNA的提取 | 第26页 |
| 3.2.2 cDNA的合成 | 第26-27页 |
| 3.2.3 目的基因的扩增 | 第27-29页 |
| 3.2.4 PCR产物检测 | 第29页 |
| 3.2.5 PCR产物回收纯化 | 第29-30页 |
| 3.2.6 PCR回收产物的酶切、回收及连接 | 第30-31页 |
| 3.2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第31-32页 |
| 3.2.8 连接产物的转化 | 第32页 |
| 3.2.9 重组质粒的制备与鉴定 | 第32-35页 |
| 3.2.10 SYBR Green I实时定量PCR | 第35-36页 |
| 3.2.11 干扰分子设计及合成 | 第36页 |
| 3.2.12 质粒的转染（脂质体介导的瞬时转染法） | 第36页 |
| 3.2.13 双荧光素酶报告基因检测 | 第36-37页 |
| 3.2.14 Western Blot检测目的基因在真核细胞中的表达 | 第37-38页 |
| 3.2.15 病毒滴度的测定 | 第38-40页 |
| 3.2.16 间接免疫荧光实验与激光共聚焦显微镜观察 | 第40页 |
| 3.2.17 统计学方法 | 第40-42页 |
| 4 结果与分析 | 第42-57页 |
| 4.1 猪ELF4基因的克隆 | 第42-43页 |
| 4.1.1 猪ELF4基因的扩增 | 第42页 |
| 4.1.2 猪ELF4基因真核表达质粒的构建及鉴定 | 第42-43页 |
| 4.2 猪ELF4基因序列分析 | 第43-45页 |
| 4.2.1 猪ELF4基因同源序列比对 | 第43-44页 |
| 4.2.2 猪ELF4基因进化树分析 | 第44-45页 |
| 4.3 猪ELF4基因组织表达差异分析 | 第45-46页 |
| 4.4 猪ELF4对IFN-β 产生的影响 | 第46-48页 |
| 4.4.1 超表达猪ELF4激活IFN-β-luc | 第46-47页 |
| 4.4.2 超表达猪ELF4激活IRF3-luc | 第47页 |
| 4.4.3 超表达猪ELF4不促进IRF3入核 | 第47-48页 |
| 4.5 猪ELF4诱导IFN-β 的功能域分析 | 第48-51页 |
| 4.5.1 猪ELF4突变体构建 | 第48-50页 |
| 4.5.2 猪ELF4激活IFN-β 的关键结构域 | 第50-51页 |
| 4.5.3 猪ELF4及其突变体的亚细胞定位 | 第51页 |
| 4.6 猪ELF4参与SeV，poly(I:C)及poly(dA:dT)诱导的IFN-β产生 | 第51-53页 |
| 4.7 猪ELF4对病毒增殖的影响 | 第53-55页 |
| 4.8 病毒感染对猪ELF4基因表达的影响 | 第55-57页 |
| 5 讨论与结论 | 第57-61页 |
| 5.1 讨论 | 第57-60页 |
| 5.1.1 猪ELF4组织表达情况分析 | 第57页 |
| 5.1.2 猪ELF4调控IFN-β 的分子机制初步研究 | 第57-58页 |
| 5.1.3 猪ELF4功能域分析 | 第58-60页 |
| 5.1.4 猪ELF4对病毒增殖影响的初步研究 | 第60页 |
| 5.2 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 附录 | 第68页 |
