| 中文摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 中文文摘 | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 绪论 | 第10-24页 |
| 1 羟化酶P4H | 第10-11页 |
| 2 胶原蛋白 | 第11-20页 |
| 2.1 胶原蛋白简介 | 第11页 |
| 2.2 胶原蛋白结构 | 第11-13页 |
| 2.3 胶原蛋白的种类 | 第13-16页 |
| 2.5 胶原原纤维的成核及调节 | 第16-17页 |
| 2.6 胶原蛋白的功能及应用 | 第17页 |
| 2.7 重组胶原蛋白的特点 | 第17-19页 |
| 2.8 重组微生物系统生产胶原蛋白的研究现状 | 第19-20页 |
| 3 毕赤酵母(Pichia pastoris) | 第20-22页 |
| 3.1 毕赤酵母生物学特征 | 第20-21页 |
| 3.2. 毕赤酵母表达系统的优缺点 | 第21-22页 |
| 3.3 毕赤酵母表达系统的应用现状 | 第22页 |
| 4 本课题研究的内容及意义 | 第22-24页 |
| 第一章 构建羟化酶的重组菌株 | 第24-36页 |
| 第一节 材料与方法 | 第24-32页 |
| 1.1 实验材料 | 第24-26页 |
| 1.2 实验方法 | 第26-32页 |
| 第二节 结果与分析 | 第32-35页 |
| 2.1 表达载体的构建与筛选 | 第32-35页 |
| 第三节 小结与讨论 | 第35-36页 |
| 第二章 胶原蛋白与羟化酶在毕赤酵母中共表达 | 第36-46页 |
| 第一节 实验材料 | 第36-43页 |
| 1.1 实验材料 | 第36-38页 |
| 1.2 实验方法 | 第38-43页 |
| 第二节 结果与分析 | 第43-45页 |
| 2.1 pARS2 proa1(Ⅲ)表达载体构建 | 第43-44页 |
| 2.2 Ⅲ型胶原蛋白在重组毕赤酵母中的表达 | 第44-45页 |
| 第三节 小结与讨论 | 第45-46页 |
| 第三章 胶原蛋白菌株pC7发酵条件的优化 | 第46-54页 |
| 第一节 材料和方法 | 第47-50页 |
| 1.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 1.2 实验方法 | 第48-50页 |
| 第二节 结果及分析 | 第50-53页 |
| 2.1 摇瓶发酵条件优化的结果 | 第50-51页 |
| 2.2 高密度发酵条件优化的结果 | 第51-53页 |
| 第三节 小结与讨论 | 第53-54页 |
| 第四章 胶原蛋白的分离纯化及性质分析 | 第54-66页 |
| 第一节 实验材料与方法 | 第54-58页 |
| 1.1 实验材料 | 第54-55页 |
| 1.2 实验方法 | 第55-58页 |
| 第二节 结果与分析 | 第58-64页 |
| 2.1 Ⅲ型胶原蛋白在胃蛋白酶水解后的SDS-PAGE | 第58-59页 |
| 2.2 NaCl盐析 | 第59页 |
| 2.3 离子交换层析结果 | 第59-60页 |
| 2.4 凝胶排阻层析结果 | 第60-61页 |
| 2.5 蛋白质谱分析结果 | 第61-62页 |
| 2.6 胶原蛋白三股螺旋结构分析 | 第62页 |
| 2.7 胶原蛋白成纤维电镜扫描结果 | 第62-64页 |
| 第三节 小结与讨论 | 第64-66页 |
| 第五章 结论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 个人简历 | 第78-82页 |