| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 第1章 引言 | 第11-25页 |
| 1.1 研究概述 | 第11-12页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第12-19页 |
| 1.2.1 猪TTV基因组特性 | 第12-13页 |
| 1.2.2 猪TTV感染情况 | 第13-15页 |
| 1.2.3 猪TTV感染特点 | 第15-16页 |
| 1.2.4 猪TTV传播途径 | 第16-17页 |
| 1.2.5 猪TTV致病性研究 | 第17-18页 |
| 1.2.6 猪TTV检测方法 | 第18-19页 |
| 1.3 实时荧光定量PCR简介 | 第19-23页 |
| 1.3.1 实时荧光定量PCR原理 | 第19-20页 |
| 1.3.2 实时荧光PCR中重要参数 | 第20-21页 |
| 1.3.3 实时荧光定量PCR方法简介 | 第21-22页 |
| 1.3.4 实时荧光定量PCR方法优点 | 第22-23页 |
| 1.3.5 实时荧光定量PCR应用 | 第23页 |
| 1.4 研究目的意义和技术路线 | 第23-25页 |
| 1.4.1 研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第24-25页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第25-42页 |
| 2.1 实验材料和设备 | 第25-27页 |
| 2.1.1 工具酶和主要试剂 | 第25页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.1.3 溶液和培养基的配制 | 第26-27页 |
| 2.1.4 试验样本 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-42页 |
| 2.2.1 猪TTV1和TTV2阳性标准品的制备 | 第27-35页 |
| 2.2.2 猪TTV Taqman实时荧光定量PCR条件优化及方法的建立 | 第35-38页 |
| 2.2.3 猪TTV Taqman实时荧光定量PCR对临床样本的检测 | 第38页 |
| 2.2.4 猪TTV双重Taqman实时荧光定量PCR条件优化及方法的建立 | 第38-39页 |
| 2.2.5 猪TTV双重Taqman实时荧光定量PCR对临床样本的检测 | 第39-40页 |
| 2.2.6 对比试验-其他PCR方法对临床样本的检测 | 第40-42页 |
| 第3章 结果与分析 | 第42-70页 |
| 3.1 制备阳性标准品结果 | 第42-47页 |
| 3.1.1 巢式PCR扩增产物电泳图 | 第42-43页 |
| 3.1.2 菌落PCR电泳图 | 第43页 |
| 3.1.3 质粒酶切验证电泳图 | 第43-44页 |
| 3.1.4 质粒测定浓度 | 第44页 |
| 3.1.5 测序结果 | 第44-46页 |
| 3.1.6 重组质粒的稀释 | 第46-47页 |
| 3.2 猪TTV Taqman实时荧光定量PCR结果 | 第47-56页 |
| 3.2.1 猪TTV Taqman实时荧光定量PCR优化后的反应条件和体系 | 第47-51页 |
| 3.2.2 猪TTV Taqman实时荧光定量PCR特异性试验 | 第51-52页 |
| 3.2.3 猪TTV Taqman实时荧光定量PCR灵敏度试验 | 第52-53页 |
| 3.2.4 猪TTV Taqman实时荧光定量PCR重复性试验 | 第53-54页 |
| 3.2.5 猪TTV Taqman实时荧光定量PCR标准曲线 | 第54-56页 |
| 3.3 猪TTV Taqman实时荧光定量PCR对临床样本的检测结果 | 第56-59页 |
| 3.4 猪TTV双重Taqman实时荧光定量PCR结果 | 第59-65页 |
| 3.4.1 猪TTV双重TTV Taqman实时荧光定量PCR不交叉试验 | 第59页 |
| 3.4.2 猪TTV双重Taqman实时荧光定量PCR优化后的反应条件和体系 | 第59-60页 |
| 3.4.3 猪TTV双重Taqman实时荧光定量PCR特异性试验 | 第60-61页 |
| 3.4.4 猪TTV双重Taqman实时荧光定量PCR灵敏度试验 | 第61-62页 |
| 3.4.5 猪TTV双重Taqman实时荧光定量PCR重复性试验 | 第62-63页 |
| 3.4.6 猪TTV双重Taqman实时荧光定量PCR标准曲线 | 第63-65页 |
| 3.5 猪TTV双重Taqman实时荧光定量PCR临床样本的检测结果 | 第65-67页 |
| 3.6 对比试验结果 | 第67-70页 |
| 第4章 讨论与展望 | 第70-76页 |
| 4.1 讨论 | 第70-74页 |
| 4.2 下一步工作 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第82页 |
