| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1.1 植物抗逆研究进展 | 第14-17页 |
| 1.1.1 植物对干旱的响应 | 第15页 |
| 1.1.2 植物对盐害的响应 | 第15-16页 |
| 1.1.3 植物对低温的响应 | 第16-17页 |
| 1.2 植物钙依赖性蛋白激酶(CDPKs)研究进展 | 第17-22页 |
| 1.2.1 CDPK的结构 | 第18-19页 |
| 1.2.2 CDPK的分布 | 第19-20页 |
| 1.2.3 CDPK的生理功能 | 第20-22页 |
| 1.3 研究的目的与意义 | 第22-24页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第24-33页 |
| 第一节 陆地棉GhCDPK1基因的克隆及其功能分析 | 第24-30页 |
| 1 实验材料 | 第24-25页 |
| 1.1 植物材料 | 第24页 |
| 1.2 实验菌株和质粒 | 第24页 |
| 1.3 主要酶和试剂 | 第24页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第24页 |
| 1.5 引物序列 | 第24-25页 |
| 2 实验方法 | 第25-30页 |
| 2.1 陆地棉GhCDPK1基因的克隆 | 第25页 |
| 2.2 陆地棉GhCDPK1基因的生物信息学分析 | 第25-26页 |
| 2.3 陆地棉GhCDPK1基因在逆境胁迫下的表达分析 | 第26页 |
| 2.4 陆地棉GhCDPK1基因植物表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.5 烟草的转化及转GhCDPK1基因烟草的分子鉴定 | 第27-28页 |
| 2.6 转GhCDPK1基因烟草的抗逆性分析 | 第28页 |
| 2.7 抗逆相关生理指标的测定 | 第28页 |
| 2.8 GhCDPK1基因亚细胞定位试验 | 第28-30页 |
| 第二节 天山雪莲Sik CDPK1基因的克隆及其功能分析 | 第30-33页 |
| 1 实验材料 | 第30页 |
| 1.1 植物材料 | 第30页 |
| 1.2 实验菌株 | 第30页 |
| 1.3 主要酶和试剂 | 第30页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第30页 |
| 1.5 引物序列 | 第30页 |
| 2 实验方法 | 第30-33页 |
| 2.1 天山雪莲Sik CDPK1基因的克隆 | 第30-31页 |
| 2.2 天山雪莲Sik CDPK1基因的生物信息学分析 | 第31页 |
| 2.3 天山雪莲Sik CDPK1基因在逆境胁迫下的表达分析 | 第31页 |
| 2.4 天山雪莲Sik CDPK1基因植物表达载体的构建 | 第31页 |
| 2.5 烟草的转化及转Sik CDPK1基因烟草的分子鉴定 | 第31页 |
| 2.6 转SikCDPK1基因烟草的抗逆性分析 | 第31-32页 |
| 2.7 抗逆相关生理指标的测定 | 第32-33页 |
| 第三章 结果与分析 | 第33-74页 |
| 第一节 陆地棉GhCDPK1基因的克隆及其功能分析 | 第33-54页 |
| 1 陆地棉GhCDPK1基因的克隆 | 第33-34页 |
| 1.1 棉花叶片总RNA的提取 | 第33页 |
| 1.2 PCR扩增目的基因 | 第33页 |
| 1.3 重组质粒pMD19-T-GhCDPK1的鉴定 | 第33-34页 |
| 2 陆地棉GhCDPK1基因的生物信息学分析 | 第34-40页 |
| 2.1 GhCDPK1基因编码蛋白的理化性质 | 第34-36页 |
| 2.2 GhCDPK1基因编码蛋白的保守结构域分析 | 第36页 |
| 2.3 GhCDPK1基因编码蛋白序列的同源性分析及进化树构建 | 第36-38页 |
| 2.4 GhCDPK1基因编码蛋白活性位点分析 | 第38页 |
| 2.5 GhCDPK1基因编码蛋白疏水性/亲水性的预测和分析 | 第38-39页 |
| 2.6 GhCDPK1基因编码蛋白信号肽预测和分析 | 第39页 |
| 2.7 GhCDPK1基因编码蛋白的亚细胞定位与跨膜结构的预测 | 第39-40页 |
| 2.8 GhCDPK1基因编码蛋白高级结构预测和分析 | 第40页 |
| 3 陆地棉GhCDPK1基因逆境胁迫下的表达分析 | 第40-42页 |
| 3.1 GhCDPK1基因在干旱胁迫下的表达分析 | 第41页 |
| 3.2 GhCDPK1基因在高盐胁迫下的表达分析 | 第41页 |
| 3.3 GhCDPK1基因在低温胁迫下的表达分析 | 第41-42页 |
| 4 陆地棉GhCDPK1基因植物表达载体的构建 | 第42-43页 |
| 4.1 目的基因片段的获得 | 第42页 |
| 4.2 表达载体的鉴定 | 第42-43页 |
| 4.3 植物表达载体转化GV3101根癌农杆菌 | 第43页 |
| 5 烟草的转化及转GhCDPK1基因烟草的分子鉴定 | 第43-45页 |
| 6 转GhCDPK1基因烟草的抗逆性分析 | 第45-52页 |
| 6.1 转GhCDPK1基因烟草抗旱性分析 | 第45-47页 |
| 6.2 转GhCDPK1基因烟草耐盐性分析 | 第47-49页 |
| 6.3 转GhCDPK1基因烟草抗寒性分析 | 第49-52页 |
| 7 GhCDPK1基因亚细胞定位实验 | 第52-54页 |
| 7.1 GhCDPK1基因亚细胞定位载体的构建 | 第52页 |
| 7.2 洋葱表皮瞬时表达 | 第52-54页 |
| 第二节 天山雪莲Sik CDPK1基因的克隆及其功能分析 | 第54-74页 |
| 1 天山雪莲Sik CDPK1基因的克隆 | 第54-55页 |
| 1.1 天山雪莲叶片总RNA的提取 | 第54页 |
| 1.2 PCR扩增目的基因 | 第54页 |
| 1.3 重组质粒pMD19-Sik CDPK1的鉴定 | 第54-55页 |
| 2 天山雪莲Sik CDPK1基因的生物信息学分析 | 第55-61页 |
| 2.1 Sik CDPK1基因编码蛋白的理化性质 | 第55-57页 |
| 2.2 Sik CDPK1基因编码蛋白的保守结构域分析 | 第57页 |
| 2.3 Sik CDPK1基因编码蛋白序列的同源性分析及进化树构建 | 第57-59页 |
| 2.4 Sik CDPK1基因编码蛋白活性位点分析 | 第59页 |
| 2.5 Sik CDPK1基因编码蛋白疏水性/亲水性的预测和分析 | 第59-60页 |
| 2.6 Sik CDPK1基因编码蛋白信号肽预测和分析 | 第60页 |
| 2.7 Sik CDPK1基因编码蛋白的亚细胞定位与跨膜结构的预测 | 第60-61页 |
| 2.8 Sik CDPK1基因编码蛋白高级结构预测和分析 | 第61页 |
| 3 Sik CDPK1基因逆境胁迫下的表达分析 | 第61-63页 |
| 3.1 Sik CDPK1基因在干旱胁迫下的表达分析 | 第61-62页 |
| 3.2 Sik CDPK1基因在高盐胁迫下的表达分析 | 第62页 |
| 3.3 Sik CDPK1基因在低温胁迫下的表达分析 | 第62-63页 |
| 4 天山雪莲Sik CDPK1基因植物表达载体的构建 | 第63-64页 |
| 4.1 目的基因片段的获得 | 第63页 |
| 4.2 表达载体的鉴定 | 第63-64页 |
| 4.3 植物表达载体转化GV3101根癌农杆菌 | 第64页 |
| 5 烟草的转化及转SikCDPK1基因烟草的分子鉴定 | 第64-65页 |
| 6 转SikCDPK1基因烟草的抗逆性分析 | 第65-74页 |
| 6.1 转SikCDPK1基因烟草抗旱性分析 | 第65-68页 |
| 6.2 转SikCDPK1基因烟草耐盐性分析 | 第68-70页 |
| 6.3 转SikCDPK1基因烟草抗寒性分析 | 第70-74页 |
| 第四章 结论与展望 | 第74-78页 |
| 4.1 陆地棉GhCDPK1基因的克隆及其功能分析 | 第74-75页 |
| 4.2 天山雪莲SikCDPK1基因的克隆及其功能分析 | 第75-76页 |
| 4.3 展望 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 附录 | 第86-90页 |
| 附录一 主要培养基、溶液配制 | 第86-87页 |
| 附录二 主要分子实验方法 | 第87-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 作者简介 | 第91-92页 |
| 导师评阅表 | 第92页 |
