| 摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第16-34页 |
| 1.1 石油的基本性质及对生态环境的危害 | 第16-17页 |
| 1.1.1 石油基本性质 | 第16页 |
| 1.1.2 石油污染的危害及大庆油田石油污染现状 | 第16-17页 |
| 1.2 微生物修复石油污染土壤技术 | 第17-19页 |
| 1.2.1 生物修复技术概述 | 第17页 |
| 1.2.2 石油降解微生物 | 第17-18页 |
| 1.2.3 石油降解复合菌群在石油污染修复中的应用 | 第18页 |
| 1.2.4 耐高温石油降解菌在石油污染环境修复中的应用 | 第18-19页 |
| 1.3 石油污染土壤的堆肥修复技术 | 第19-21页 |
| 1.3.1 堆肥修复石油污染土壤的现状 | 第19-20页 |
| 1.3.2 堆肥影响因素 | 第20-21页 |
| 1.4 堆肥修复石油污染土壤的强化方法 | 第21-24页 |
| 1.4.1 生物表面活性剂强化堆肥修复 | 第21-23页 |
| 1.4.2 外源菌剂强化堆肥修复 | 第23-24页 |
| 1.5 石油降解的关键基因 | 第24-26页 |
| 1.6 分子生物学在微生物修复领域的应用 | 第26-31页 |
| 1.7 本研究的目的意义和主要内容 | 第31-34页 |
| 1.7.1 研究的目的意义 | 第31-32页 |
| 1.7.2 研究的主要内容 | 第32页 |
| 1.7.3 试验技术路线 | 第32-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-54页 |
| 2.1 试验材料 | 第34-37页 |
| 2.1.1 试验样品 | 第34-35页 |
| 2.1.2 试验培养基 | 第35页 |
| 2.1.3 试验药品及试剂 | 第35-36页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第36-37页 |
| 2.1.5 分析软件 | 第37页 |
| 2.2 耐高温石油降解菌群的筛选及性能测定 | 第37-40页 |
| 2.2.1 耐高温石油降解菌的筛选 | 第37-38页 |
| 2.2.2 石油降解复合菌群的组成 | 第38页 |
| 2.2.3 复合菌群降解条件的优化 | 第38-39页 |
| 2.2.4 复合菌群对原油组分降解效果分析 | 第39-40页 |
| 2.3 糖脂类表面活性剂产生菌的筛选及性能研究 | 第40-44页 |
| 2.3.1 生物表面活性剂产生菌的筛选 | 第40-41页 |
| 2.3.2 菌种鉴定 | 第41页 |
| 2.3.3 发酵条件初步优化 | 第41-42页 |
| 2.3.4 表面活性剂化学性质的定性分析 | 第42-43页 |
| 2.3.5 生物表面活性剂性能的测定 | 第43-44页 |
| 2.3.6 生物表面活性剂对石油污染土壤修复的影响 | 第44页 |
| 2.4 石油污染土壤的强化堆肥处理研究 | 第44-47页 |
| 2.4.1 石油污染土壤的堆肥处理技术 | 第44-45页 |
| 2.4.2 堆肥参数的测定 | 第45-46页 |
| 2.4.3 堆肥过程石油烃降解率及生物反应动力学分析 | 第46页 |
| 2.4.4 堆肥样品的气相色谱（GC-FID ）分析 | 第46-47页 |
| 2.5 堆肥修复体系中细菌群落及多样性的研究 | 第47-50页 |
| 2.5.1 堆肥样品DNA的提取 | 第47-48页 |
| 2.5.2 堆肥样品细菌DNA的PCR扩增 | 第48页 |
| 2.5.3 堆肥样品的高通量测序检测 | 第48-50页 |
| 2.6 堆肥修复体系中ALKB多样性及定量分析 | 第50-54页 |
| 2.6.1 AlkB基因的克隆文库构建 | 第50-52页 |
| 2.6.2 AlkB克隆文库序列测定及分析 | 第52页 |
| 2.6.3 AlkB基因的荧光定量PCR检测（Real Time-PCR） | 第52-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-105页 |
| 3.1 耐高温石油降解菌群的筛选及性能测定 | 第54-62页 |
| 3.1.1 耐高温石油烃降解菌群的筛选及遗传稳定性 | 第54-56页 |
| 3.1.2 石油降解复合菌群的组成 | 第56-57页 |
| 3.1.3 复合菌群降解条件的优化 | 第57-62页 |
| 3.1.4 复合菌群对原油组分降解效果分析 | 第62页 |
| 3.2 糖脂类表面活性剂产生菌的筛选及性能研究 | 第62-73页 |
| 3.2.1 生物表面活性剂产生菌的筛选 | 第62-63页 |
| 3.2.2 菌种鉴定 | 第63-65页 |
| 3.2.3 发酵条件初步优化 | 第65-67页 |
| 3.2.4 表面活性剂化学性质的定性分析 | 第67-69页 |
| 3.2.5 鼠李糖脂表面活性剂性能的测定 | 第69-71页 |
| 3.2.6 生物表面活性剂对石油污染土壤修复的影响 | 第71-73页 |
| 3.3 石油污染土壤的强化堆肥处理研究 | 第73-85页 |
| 3.3.1 堆肥参数的测定 | 第73-79页 |
| 3.3.2 堆肥过程石油烃降解率及生物反应动力学分析 | 第79-80页 |
| 3.3.3 堆肥样品的GC-FID分析结果 | 第80-85页 |
| 3.4 堆肥修复体系中细菌群落及多样性的研究 | 第85-97页 |
| 3.4.1 堆肥样品DNA的提取 | 第85-86页 |
| 3.4.2 堆肥样品总DNA的PCR扩增 | 第86页 |
| 3.4.3 高通量测序数据分析 | 第86-97页 |
| 3.5 堆肥修复体系中ALKB多样性及定量分析 | 第97-105页 |
| 3.5.1 AlkB克隆文库分析 | 第97-101页 |
| 3.5.2 AlkB基因的荧光定量PCR分析 | 第101-105页 |
| 4 讨论 | 第105-110页 |
| 4.1 耐高温复合菌群的筛选及应用 | 第105页 |
| 4.2 鼠李糖脂表面活性剂的应用 | 第105-106页 |
| 4.3 不同堆肥修复体系对石油降解的影响 | 第106页 |
| 4.4 堆肥修复体系中细菌群落与石油降解的关系 | 第106-108页 |
| 4.5 堆肥修复体系中ALKB功能基因与石油降解的关系 | 第108-110页 |
| 5 结论 | 第110-112页 |
| 6 创新点 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-126页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第126页 |
