摘要 | 第2-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
引言 | 第10-12页 |
材料和方法 | 第12-25页 |
1. MES23.5 多巴胺能细胞系的培养 | 第12-13页 |
1.1 细胞来源及特性 | 第12页 |
1.2 常用试剂 | 第12页 |
1.3 实验仪器 | 第12页 |
1.4 液体配制 | 第12-13页 |
1.5 细胞培养步骤 | 第13页 |
2. 细胞摄铁功能及细胞内铁水平检测 | 第13-15页 |
2.1 实验试剂 | 第13页 |
2.2 实验仪器 | 第13-14页 |
2.3 液体配制 | 第14页 |
2.4 细胞培养与药物处理 | 第14-15页 |
2.5 细胞摄铁功能与细胞内铁水平检测 | 第15页 |
3. 细胞线粒体跨膜电位的检测 | 第15-16页 |
3.1 实验试剂 | 第15页 |
3.2 实验仪器 | 第15页 |
3.3 液体配制 | 第15-16页 |
3.4 细胞接种与药物处理 | 第16页 |
3.5 △Ψm检测 | 第16页 |
4. 免疫蛋白印记法检测IRP1、DMT1、Fpn1和nNOS蛋白水平 | 第16-20页 |
4.1 常用试剂 | 第16-17页 |
4.2 实验仪器 | 第17页 |
4.3 抗体 | 第17页 |
4.4 常用液体配制 | 第17-18页 |
4.5 细胞接种与药物处理 | 第18-19页 |
4.6 蛋白提取与定量检测 | 第19页 |
4.7 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳及转膜 | 第19-20页 |
5. 实时荧光定量PCR检测IRP1,DMT1+IRE和Fpn1的mRNA水平 | 第20-23页 |
5.1 实验试剂 | 第20页 |
5.2 实验仪器 | 第20页 |
5.3 液体配制 | 第20-21页 |
5.4 细胞接种与药物处理 | 第21页 |
5.5 RNA的提取及逆转录反应 | 第21-22页 |
5.6 荧光实时定量PCR | 第22-23页 |
6. 统计学处理 | 第23-25页 |
结果 | 第25-36页 |
1. NMDA对细胞摄铁能力和线粒体膜电位的影响 | 第25-26页 |
2. NMDA对细胞DMT1+IRE和Fpn1mRNA水平的影响 | 第26-27页 |
3. MK801对 6-OHDA诱导的细胞摄铁能力的影响 | 第27-28页 |
4. MK801对 6-OHDA诱导的细胞内铁水平的影响 | 第28-29页 |
5. MK801对 6-OHDA诱导的细胞DMT1+IRE和Fpn1 mRNA水平的影响 | 第29-30页 |
6. MK801对 6-OHDA诱导的细胞DMT1和Fpn1蛋白水平的影响 | 第30-31页 |
7. MK801对 6-OHDA诱导的细胞IRP1的mRNA和蛋白水平的影响 | 第31-33页 |
8. 6-OHDA对细胞nNOS蛋白水平的影响 | 第33页 |
9. 盐酸亚精胺对 6-OHDA诱导的细胞IRP1、DMT1+IRE和Fpn1 mRNA水平的影响 | 第33-36页 |
讨论 | 第36-40页 |
结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |
综述 | 第47-64页 |
参考文献 | 第57-64页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第64-65页 |
缩略词表 | 第65-68页 |
致谢 | 第68-69页 |