| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-28页 |
| 1.1 脂肪细胞生物学 | 第13-16页 |
| 1.1.1 脂肪细胞的起源 | 第13页 |
| 1.1.2 脂肪细胞的分化调控 | 第13-16页 |
| 1.2 肌细胞分化调控 | 第16-19页 |
| 1.2.1 肌细胞的发生过程 | 第16-17页 |
| 1.2.2 成肌分化的调控 | 第17-19页 |
| 1.3 Adipose的研究进展 | 第19-23页 |
| 1.3.1 Adipose的发现 | 第19-20页 |
| 1.3.2 Adipose的结构特征 | 第20-21页 |
| 1.3.3 Adipose在脂肪生物学中的功能 | 第21-23页 |
| 1.4 KLFs家族转录因子 | 第23-26页 |
| 1.4.1 KLFs家族转录因子概述 | 第23页 |
| 1.4.2 KLFs家族转录因子对脂肪形成的影响 | 第23-25页 |
| 1.4.3 KLFs家族转录因子对肌肉形成的影响 | 第25-26页 |
| 1.5 TNFa与人类疾病 | 第26-27页 |
| 1.5.1 TNFα与二型糖尿病 | 第26-27页 |
| 1.5.2 TNFα与肌肉萎缩症 | 第27页 |
| 1.6 研究的目的意义 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第28页 |
| 2.1.1 实验细胞 | 第28页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第28页 |
| 2.2 主要仪器和试剂 | 第28-31页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第28-29页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第29-30页 |
| 2.2.3 溶液配制 | 第30-31页 |
| 2.2.4 相关生物学软件 | 第31页 |
| 2.3 实验方法 | 第31-42页 |
| 2.3.1 基因组DNA的提取 | 第31-32页 |
| 2.3.2 启动子报告载体构建 | 第32页 |
| 2.3.3 质粒浓度和纯度检测 | 第32页 |
| 2.3.4 细胞培养、处理及转染 | 第32-33页 |
| 2.3.5 稳转细胞的筛选 | 第33-34页 |
| 2.3.6 双荧光素酶报告系统检测启动子活性 | 第34页 |
| 2.3.7 细胞总RNA提取 | 第34-35页 |
| 2.3.8 RNA浓度检测和反转录 | 第35页 |
| 2.3.9 实时定量PCR | 第35页 |
| 2.3.10 非放射性凝胶迁移率实验(EMSA) | 第35-37页 |
| 2.3.11 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第37-38页 |
| 2.3.12 C2C12细胞培养及成肌分化 | 第38页 |
| 2.3.13 3T3L1细胞培养及诱导成脂分化 | 第38-39页 |
| 2.3.14 蛋白质相互作用分析(co-IP) | 第39-40页 |
| 2.3.15 Western blot | 第40-41页 |
| 2.3.16 免疫荧光染色 | 第41页 |
| 2.3.17 油红O染色 | 第41页 |
| 2.3.18 线粒体染色 | 第41-42页 |
| 2.3.19 数据统计分析 | 第42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-68页 |
| 3.1 Adp启动子克隆与分析 | 第42-44页 |
| 3.2 猪Adp启动子活性及功能分析 | 第44-45页 |
| 3.3 KLF15对Adp基因的转录调控 | 第45-50页 |
| 3.3.1 KLF15对Adp基因mRNA表达的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.2 KLF15对Adp启动子活性的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.3 KLF15与Adp启动子的结合 | 第47-49页 |
| 3.3.4 KLF15对Adp启动子活性影响的位点依赖性 | 第49-50页 |
| 3.4 KLF6对Adp基因的转录调控 | 第50-51页 |
| 3.5 TNFα对Adp表达的影响 | 第51-56页 |
| 3.5.1 TNFα对Adp表达的影响 | 第51-54页 |
| 3.5.2 TNFα通过KLF15影响Adp转录 | 第54-56页 |
| 3.6 TNFα通过KLF15影响Adp在肌细胞分化中的作用 | 第56-60页 |
| 3.7 Adp对PPARγ转录调控 | 第60-65页 |
| 3.7.1 脂肪细胞分化过程中Adp表达变化 | 第60-62页 |
| 3.7.2 Adp对PPARγ转录的调控 | 第62-65页 |
| 3.8 在成脂分化过程中Adp对线粒体数量的影响 | 第65-68页 |
| 4 讨论与结论 | 第68-70页 |
| 创新点 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-82页 |
| 附表1 引物序列 | 第82-84页 |
| 研究生期间发表文章 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
