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弓形虫棒状体蛋白的表达及相互作用蛋白的筛选

摘要第6-7页
Abstract第7页
第一章 引言第11-17页
    1.1 弓形虫概述第11-14页
        1.1.1 弓形虫病第11页
        1.1.2 弓形虫简介第11-13页
        1.1.3 弓形虫生活史第13-14页
        1.1.4 弓形虫病危害第14页
    1.2 弓形虫棒状体蛋白第14-15页
    1.3 主要研究技术第15页
    1.4 本研究的目的与意义第15-17页
        1.4.1 本研究的目的第15-16页
        1.4.2 本研究的意义第16-17页
第二章 Rop28,Rop38的原核和真核表达第17-22页
    2.1 实验材料第17页
        2.1.1 菌株,质粒和细胞第17页
        2.1.2 主要试剂,耗材和仪器第17页
    2.2 实验步骤第17-19页
        2.2.1 Rop28,Rop38和TgTubulin序列分析和引物设计第17页
        2.2.2 Rop28,Rop38和TgTubulin基因的扩增和原核表达第17-18页
        2.2.3 Rop28和Rop38在哺乳动物细胞中表达第18-19页
    2.3 实验结果第19-21页
        2.3.1 Rop28和Rop38的序列分析第19页
        2.3.2 Rop28,Rop38的原核表达载体鉴定结果第19-20页
        2.3.3 Rop28和Rop38真核表达载体的鉴定结果第20-21页
        2.3.4 Rop28和Rop38在 293T细胞中的表达第21页
    2.4 讨论第21-22页
第三章 成纤维细胞和T细胞cDNA文库构建第22-28页
    3.1 实验材料第22页
        3.1.1 实验细胞第22页
        3.1.2 实验主要试剂及仪器第22页
        3.1.3 主要培养基及相关试剂第22页
    3.2 实验方法第22-25页
        3.2.1 cDNA模板链的合成第22-23页
        3.2.2 LD-PCR合成dscDNA及纯化第23页
        3.2.3 方法纯化dsDNA第23-24页
        3.2.4 HFF和CEM cDNA文库的制备与鉴定第24-25页
        3.2.5 酵母质粒PCR鉴定第25页
    3.3 实验结果第25-27页
        3.3.1 HFF和CEM cDNA文库电泳第25页
        3.3.2 文库滴度检测第25-27页
    3.4 讨论第27-28页
第四章 酵母双杂交筛选相互作用蛋白第28-36页
    4.1 实验材料第28页
        4.1.1 实验细胞第28页
        4.1.2 实验主要试剂及仪器第28页
        4.1.3 主要培养基及相关试剂第28页
    4.2 实验方法第28-30页
        4.2.1 构建诱饵载体第28-29页
        4.2.2 重组诱饵蛋白毒性及自激活检测第29页
        4.2.3 酵母诱饵筛选HFF和CEM cDNA文库第29页
        4.2.4 回转验证第29-30页
    4.3 实验结果第30-35页
        4.3.1 诱饵质粒PCR鉴定第30页
        4.3.2 诱饵质粒毒性及自激活验证第30-31页
        4.3.3 酵母双杂交筛和回转验证结果第31-35页
    4.4 讨论第35-36页
第五章 结论第36-37页
参考文献第37-41页
致谢第41-42页
作者简历第42页

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