| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| 1.1 植物转录因子概述 | 第9-12页 |
| 1.1.1 转录因子的功能结构域 | 第9-10页 |
| 1.1.2 植物转录因子家族分类 | 第10-11页 |
| 1.1.3 植物转录因子的生物学功能 | 第11-12页 |
| 1.2 转录因子HD-Zip I概述 | 第12-14页 |
| 1.2.1 HD-ZipI亚家族的结构与分类 | 第12-13页 |
| 1.2.2 HD-Zip I亚家族的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3 HD-Zip家族与GA合成代谢、信号转导 | 第14-17页 |
| 1.3.1 高等植物GA的合成代谢途径 | 第15页 |
| 1.3.2 HD-Zip家族成员与GA合成代谢、信号转导 | 第15-17页 |
| 1.4 苹果转录因子MdHB1的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.4.1 MdHB1与果实的成熟衰老 | 第17-18页 |
| 1.4.2 MdHB1与GA的研究 | 第18页 |
| 1.4.3 MdHB1的其他研究 | 第18页 |
| 1.5 研究方法概述 | 第18-20页 |
| 1.5.1 基因的原核表达与多克隆抗体制备 | 第18-19页 |
| 1.5.2 Western blot试验 | 第19-20页 |
| 1.6 研究的目的意义 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-26页 |
| 2.1 材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 质粒载体和菌株 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.2 生物信息学分析 | 第22页 |
| 2.2.1 MdHB1蛋白结构预测 | 第22页 |
| 2.2.2 氨基酸的聚类分析 | 第22页 |
| 2.3 引物设计与表达载体的构建 | 第22-23页 |
| 2.4 MdHB1的原核表达、纯化与多克隆抗体的制备 | 第23页 |
| 2.5 间接ELISA法检测抗体效价 | 第23-24页 |
| 2.6 Western blot试验检测抗体的特异性 | 第24页 |
| 2.7 苹果果实的激素处理 | 第24页 |
| 2.8 VIGS瞬时转化苹果 | 第24页 |
| 2.9 RNA提取与实时荧光定量检测 | 第24页 |
| 2.10 苹果果肉内源GA3的提取与测定 | 第24-26页 |
| 第三章 结果与分析 | 第26-36页 |
| 3.1 MdHB1的生物信息学分析 | 第26-27页 |
| 3.1.1 MdHB1蛋白结构预测 | 第26-27页 |
| 3.1.2 氨基酸的聚类分析 | 第27页 |
| 3.2 MdHB1融合蛋白的表达与纯化 | 第27-29页 |
| 3.2.1 pET-28a-MdHB1(28a HB) 表达载体的构建 | 第27-28页 |
| 3.2.2 重组质粒 28aHB的表达与蛋白纯化 | 第28-29页 |
| 3.3 间接ELISA法测定MdHB1多克隆抗体的效价 | 第29-30页 |
| 3.4 MdHB1多克隆抗体特异性检测 | 第30-32页 |
| 3.4.1 pGEX-6p1MdHB1 (6pHB) 表达载体的构建 | 第30页 |
| 3.4.2 重组质粒 6pHB的原核表达 | 第30-31页 |
| 3.4.3 菌体总蛋白的western blot试验 | 第31-32页 |
| 3.4.4 苹果幼叶蛋白western blot试验 | 第32页 |
| 3.5 MdHB1对赤霉素(GA)处理的响应 | 第32页 |
| 3.6 MdHB1基因沉默对GA代谢的影响 | 第32-34页 |
| 3.7 MdHB1过表达烟草‘NC89’的验证 | 第34页 |
| 3.8 MdHB1过表达对GA代谢相关基因的影响 | 第34-36页 |
| 第四章 讨论 | 第36-39页 |
| 4.1 生物信息学对MdHB1的分析 | 第36页 |
| 4.2 MdHB1多克隆抗体的制备 | 第36-37页 |
| 4.3 苹果MdHB1的存在形式分析 | 第37页 |
| 4.4 苹果转录因子MdHB1参与GA的信号转导 | 第37-39页 |
| 第五章 结论与创新点 | 第39-40页 |
| 5.1 结论 | 第39页 |
| 5.2 创新点 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-47页 |
| 附录 | 第47-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简介 | 第51页 |
