来自嗜热子囊菌的耐热重组木聚糖酶在巴斯德毕赤酵母中的异源表达
| 中英文缩略词对照表 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1.前言 | 第11-13页 |
| 2.材料与方法 | 第13-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第13-18页 |
| 2.1.1 酶与试剂 | 第13-15页 |
| 2.1.2 质粒与菌株 | 第15页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第15-16页 |
| 2.1.4 培养基以及常用溶液配制 | 第16-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-35页 |
| 2.2.1 大肠杆菌感受态细胞的制备方法 | 第18-19页 |
| 2.2.2 重组质粒的构建 | 第19-22页 |
| 2.2.3 质粒提取 | 第22-23页 |
| 2.2.4 重组毕赤酵母的构建 | 第23-25页 |
| 2.2.5 酵母基因组提取方法 | 第25-26页 |
| 2.2.6 重组菌株的筛选 | 第26页 |
| 2.2.7 重组木聚糖酶的表达 | 第26-27页 |
| 2.2.8 DNS法测定木聚糖酶酶活 | 第27-28页 |
| 2.2.9 蛋白浓度的标准测定方法 | 第28页 |
| 2.2.10 蛋白质的分离与纯化 | 第28-31页 |
| 2.2.11 SDS-PAGE蛋白电泳 | 第31页 |
| 2.2.12 酶谱分析 | 第31-32页 |
| 2.2.13 糖蛋白染色 | 第32页 |
| 2.2.14 糖基化类型的分析 | 第32-33页 |
| 2.2.15 pH对重组木聚糖酶XynA的影响 | 第33-34页 |
| 2.2.16 温度对重组木聚糖酶XynA的影响 | 第34页 |
| 2.2.17 金属离子对重组木聚糖酶的影响 | 第34页 |
| 2.2.18 脱墨实验 | 第34页 |
| 2.2.19 玉米芯的糖化实验 | 第34-35页 |
| 3 实验结果 | 第35-50页 |
| 3.1 重组菌株的构建与筛选 | 第35-36页 |
| 3.2 木聚糖酶的分离与纯化 | 第36-40页 |
| 3.3 重组木聚糖酶的SDS-PAGE分析 | 第40-41页 |
| 3.4 酶谱分析 | 第41页 |
| 3.5 糖蛋白染色 | 第41-42页 |
| 3.6 糖基化类型分析 | 第42-43页 |
| 3.7 pH对木聚糖酶的影响 | 第43-44页 |
| 3.8 温度对木聚糖酶的影响 | 第44-47页 |
| 3.9 金属离子对木聚糖酶酶活的影响 | 第47页 |
| 3.10 脱墨实验结果 | 第47-48页 |
| 3.11 玉米芯的糖化结果 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 6 展望 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 其他参与的课题 | 第61-64页 |
| 附录 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 课题综述 | 第66-79页 |
| 参考文献 | 第74-79页 |
