| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 1 引言 | 第10-37页 |
| ·小麦赤霉病毒素研究进展 | 第10-25页 |
| ·小麦赤霉病概况 | 第10-13页 |
| ·真菌毒素污染现状及去毒技术 | 第13-14页 |
| ·脱氧学腐镰刀菌烯醇的研究概况 | 第14-25页 |
| ·降解赤霉病菌毒素的Tri101 基因研究进展 | 第25-29页 |
| ·Tri101 基因的结构及功能 | 第25-27页 |
| ·Tri101 基因的表达及应用 | 第27-28页 |
| ·展望 | 第28-29页 |
| ·小麦基因转化研究进展 | 第29-35页 |
| ·目前小麦转化的主要方法 | 第29-33页 |
| ·小麦基因转化存在的主要问题 | 第33-35页 |
| ·本文的研究目的、意义和技术路线 | 第35-37页 |
| ·研究目的和意义 | 第35页 |
| ·拟解决的关键问题 | 第35-36页 |
| ·研究的技术路线 | 第36-37页 |
| 2 禾谷镰刀菌形态观察及其 DON 毒素检测 | 第37-44页 |
| ·材料与方法 | 第37-38页 |
| ·试验材料 | 第37页 |
| ·禾谷镰刀菌培养 | 第37-38页 |
| ·禾谷镰刀菌DON 毒素提取 | 第38页 |
| ·禾谷镰刀菌DON 毒素测定 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-42页 |
| ·禾谷镰刀菌生长观察 | 第38-39页 |
| ·禾谷镰刀菌孢子形态观察 | 第39-40页 |
| ·DON 标准曲线方程的制作 | 第40-41页 |
| ·HPLC 检测样品 DON 浓度 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 3 禾谷镰刀菌降解毒素基因 Tri101 的克隆和序列分析 | 第44-56页 |
| ·材料与方法 | 第44-47页 |
| ·菌株来源 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·总RNA 的提取 | 第44页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第44-45页 |
| ·禾谷镰刀菌Tri101 基因的克隆及序列测定 | 第45-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-54页 |
| ·Tri101 基因序列分析 | 第47-49页 |
| ·Tri101 基因编码氨基酸序列分析 | 第49-52页 |
| ·Tri101 同源性和分子进化分析 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 4 降解赤霉病菌毒素 Tri101 基因的原核表达及多克隆抗体的制备和鉴定 | 第56-65页 |
| ·材料与方法 | 第56-59页 |
| ·试验材料 | 第56页 |
| ·目的基因原核表达载体的构建 | 第56-57页 |
| ·目的基因的诱导表达和 SDS-PAGE 分析 | 第57页 |
| ·融合蛋白的切胶回收 | 第57页 |
| ·融合蛋白抗血清的制备与纯化 | 第57-58页 |
| ·多克隆抗血清的 ELISA 及 Western blot 分析 | 第58-59页 |
| ·利用 GST-Tri101 抗体检测 Tri101 基因在感病小麦中的表达 | 第59页 |
| ·结果与分析 | 第59-64页 |
| ·Tri101 基因的克隆和原核表达载体的构建 | 第59-60页 |
| ·Tri101 基因的诱导表达和SDS-PAGE 分析 | 第60-61页 |
| ·不同诱导浓度表达产物量的比较 | 第61页 |
| ·表达产物的纯化及定量 | 第61页 |
| ·Tri101 基因兔抗多克隆抗体的效价测定 | 第61-62页 |
| ·多克隆抗体的特异性鉴定 | 第62-63页 |
| ·Western blot 分析感病小麦中目的基因的表达 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| 5 农杆菌介导Tri101 基因转化小麦生长点 | 第65-74页 |
| ·材料与方法 | 第65-68页 |
| ·试验材料 | 第65-66页 |
| ·F90623 总RNA 提取及cDNA 合成 | 第66页 |
| ·Tri101 基因植物表达载体的构建 | 第66页 |
| ·植物表达质粒向农杆菌的转化 | 第66-67页 |
| ·外源基因对小麦的转化 | 第67页 |
| ·转基因植株的筛选及鉴定 | 第67-68页 |
| ·结果与分析 | 第68-73页 |
| ·Tri101 基因植物表达载体的构建 | 第68-70页 |
| ·植物表达质粒向农杆菌的转化 | 第70页 |
| ·转基因植株的筛选及鉴定 | 第70-72页 |
| ·GUS 染色鉴定 | 第72页 |
| ·转化频率分析结果 | 第72-73页 |
| ·讨论 | 第73-74页 |
| 6 总讨论 | 第74-76页 |
| 7 创新点和今后的研究方向 | 第76-77页 |
| ·创新点 | 第76页 |
| ·今后的研究方向 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-92页 |
| 附录A | 第92-93页 |
| 附录B | 第93-94页 |
| 附录C | 第94-95页 |
| 附录D | 第95-96页 |
| 附录E | 第96-98页 |
| 附录F | 第98-99页 |
| 作者简介 | 第99页 |
