中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第9-22页 |
1.1 木质纤维素乙醇概述 | 第9-11页 |
1.1.1 木质纤维素 | 第9-10页 |
1.1.2 纤维素乙醇生产工艺概述 | 第10-11页 |
1.2 纤维素酶概述 | 第11-15页 |
1.2.1 纤维素酶来源 | 第12页 |
1.2.2 内切葡聚糖酶 | 第12-13页 |
1.2.3 β-葡萄糖苷酶 | 第13-14页 |
1.2.4 外切葡聚糖酶 | 第14页 |
1.2.5 纤维素酶系的协同作用 | 第14页 |
1.2.6 纤维素酶解影响因素 | 第14-15页 |
1.3 酿酒酵母概述 | 第15-17页 |
1.3.1 酿酒酵母简介 | 第15-16页 |
1.3.2 酿酒酵母的遗传转化 | 第16-17页 |
1.4 纤维素酶在酿酒酵母中的表达研究进展 | 第17-20页 |
1.4.1 纤维素酶基因在酿酒酵母中表达的影响因素 | 第17-18页 |
1.4.2 β-葡萄糖苷酶基因在酿酒酵母中的表达 | 第18-19页 |
1.4.3 内切葡聚糖酶基因在酿酒酵母中的表达 | 第19页 |
1.4.4 多种纤维素酶基因在酿酒酵母中的表达 | 第19-20页 |
1.5 研究目的和意义、内容和技术路线 | 第20-22页 |
1.5.1 研究目的和意义 | 第20页 |
1.5.2 研究内容 | 第20-21页 |
1.5.3 技术路线 | 第21-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-36页 |
2.1 实验材料 | 第22-28页 |
2.1.1 质粒和菌株 | 第22-23页 |
2.1.2 主要实验仪器 | 第23-24页 |
2.1.3 主要试剂 | 第24-25页 |
2.1.4 培养基 | 第25-26页 |
2.1.5 主要溶液 | 第26-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-36页 |
2.2.1 微生物培养 | 第28页 |
2.2.2 碱法小量提取大肠杆菌质粒 | 第28-29页 |
2.2.3 酿酒酵母染色体快速分离提取 | 第29页 |
2.2.4 酿酒酵母转化 | 第29-30页 |
2.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
2.2.6 PCR反应 | 第30-31页 |
2.2.7 内切葡聚糖酶活性测定 | 第31-32页 |
2.2.8 β-葡萄糖苷酶酶活测定 | 第32-33页 |
2.2.9 粘度测定 | 第33页 |
2.2.10 木质纤维素预处理 | 第33页 |
2.2.11 木质纤维素组分含量测定 | 第33-34页 |
2.2.12 发酵实验 | 第34-35页 |
2.2.13 HPLC测定发酵液组分 | 第35-36页 |
第三章 整合纤维素内切酶工业酿酒酵母的研究 | 第36-49页 |
3.1 整合纤维素内切酶基因酿酒酵母工业菌株的构建及初步评价 | 第36-43页 |
3.1.1 转化和筛选 | 第36-38页 |
3.1.2 生长曲线的测定 | 第38-39页 |
3.1.3 内切酶酶活及酶活稳定性的测定 | 第39-41页 |
3.1.4 蛋白电泳 | 第41-42页 |
3.1.5 工业菌株降解羧甲基纤维素的评价 | 第42-43页 |
3.2 工业菌株利用木质纤维素预处理物的发酵产醇评价 | 第43-48页 |
3.2.1 木质纤维素预处理 | 第43-44页 |
3.2.2 纤维素酶的酶活测定 | 第44页 |
3.2.3 工业菌株利用木质纤维素预处理物的发酵产醇评价 | 第44-47页 |
3.2.4 工业菌株利用木质纤维素预处理物的降粘效果评价 | 第47-48页 |
3.3 本章小结 | 第48-49页 |
第四章 整合纤维素内切酶和 β-葡萄糖苷酶双基因工业酿酒酵母的研究 | 第49-57页 |
4.1 整合纤维素内切酶和 β-葡萄糖苷酶双基因酿酒酵母工业菌株的构建 | 第49-51页 |
4.1.1 以Angle α 为出发菌株整合纤维素内切酶和 β-葡萄糖苷酶双基因酿酒酵母工业菌株的构建 | 第49-50页 |
4.1.2 以Angle BG3为出发菌株整合纤维素内切酶基因酿酒酵母工业菌株的构建 | 第50-51页 |
4.2 重组菌株的评价 | 第51-56页 |
4.2.1 生长曲线的测定 | 第51-52页 |
4.2.2 内切葡聚糖酶活性的测定 | 第52-53页 |
4.2.3 β-葡萄糖苷酶酶活曲线的测定 | 第53页 |
4.2.4 利用预处理木质纤维素的发酵产醇评价 | 第53-56页 |
4.3 本章小结 | 第56-57页 |
第五章 结论与展望 | 第57-59页 |
5.1 结论 | 第57-58页 |
5.2 展望 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-68页 |
附录 | 第68-71页 |
致谢 | 第71-72页 |