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具有高降粘活性的生产木质纤维素乙醇的酿酒酵母工业菌株的开发

中文摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一章 文献综述第9-22页
    1.1 木质纤维素乙醇概述第9-11页
        1.1.1 木质纤维素第9-10页
        1.1.2 纤维素乙醇生产工艺概述第10-11页
    1.2 纤维素酶概述第11-15页
        1.2.1 纤维素酶来源第12页
        1.2.2 内切葡聚糖酶第12-13页
        1.2.3 β-葡萄糖苷酶第13-14页
        1.2.4 外切葡聚糖酶第14页
        1.2.5 纤维素酶系的协同作用第14页
        1.2.6 纤维素酶解影响因素第14-15页
    1.3 酿酒酵母概述第15-17页
        1.3.1 酿酒酵母简介第15-16页
        1.3.2 酿酒酵母的遗传转化第16-17页
    1.4 纤维素酶在酿酒酵母中的表达研究进展第17-20页
        1.4.1 纤维素酶基因在酿酒酵母中表达的影响因素第17-18页
        1.4.2 β-葡萄糖苷酶基因在酿酒酵母中的表达第18-19页
        1.4.3 内切葡聚糖酶基因在酿酒酵母中的表达第19页
        1.4.4 多种纤维素酶基因在酿酒酵母中的表达第19-20页
    1.5 研究目的和意义、内容和技术路线第20-22页
        1.5.1 研究目的和意义第20页
        1.5.2 研究内容第20-21页
        1.5.3 技术路线第21-22页
第二章 材料与方法第22-36页
    2.1 实验材料第22-28页
        2.1.1 质粒和菌株第22-23页
        2.1.2 主要实验仪器第23-24页
        2.1.3 主要试剂第24-25页
        2.1.4 培养基第25-26页
        2.1.5 主要溶液第26-28页
    2.2 实验方法第28-36页
        2.2.1 微生物培养第28页
        2.2.2 碱法小量提取大肠杆菌质粒第28-29页
        2.2.3 酿酒酵母染色体快速分离提取第29页
        2.2.4 酿酒酵母转化第29-30页
        2.2.5 琼脂糖凝胶电泳第30页
        2.2.6 PCR反应第30-31页
        2.2.7 内切葡聚糖酶活性测定第31-32页
        2.2.8 β-葡萄糖苷酶酶活测定第32-33页
        2.2.9 粘度测定第33页
        2.2.10 木质纤维素预处理第33页
        2.2.11 木质纤维素组分含量测定第33-34页
        2.2.12 发酵实验第34-35页
        2.2.13 HPLC测定发酵液组分第35-36页
第三章 整合纤维素内切酶工业酿酒酵母的研究第36-49页
    3.1 整合纤维素内切酶基因酿酒酵母工业菌株的构建及初步评价第36-43页
        3.1.1 转化和筛选第36-38页
        3.1.2 生长曲线的测定第38-39页
        3.1.3 内切酶酶活及酶活稳定性的测定第39-41页
        3.1.4 蛋白电泳第41-42页
        3.1.5 工业菌株降解羧甲基纤维素的评价第42-43页
    3.2 工业菌株利用木质纤维素预处理物的发酵产醇评价第43-48页
        3.2.1 木质纤维素预处理第43-44页
        3.2.2 纤维素酶的酶活测定第44页
        3.2.3 工业菌株利用木质纤维素预处理物的发酵产醇评价第44-47页
        3.2.4 工业菌株利用木质纤维素预处理物的降粘效果评价第47-48页
    3.3 本章小结第48-49页
第四章 整合纤维素内切酶和 β-葡萄糖苷酶双基因工业酿酒酵母的研究第49-57页
    4.1 整合纤维素内切酶和 β-葡萄糖苷酶双基因酿酒酵母工业菌株的构建第49-51页
        4.1.1 以Angle α 为出发菌株整合纤维素内切酶和 β-葡萄糖苷酶双基因酿酒酵母工业菌株的构建第49-50页
        4.1.2 以Angle BG3为出发菌株整合纤维素内切酶基因酿酒酵母工业菌株的构建第50-51页
    4.2 重组菌株的评价第51-56页
        4.2.1 生长曲线的测定第51-52页
        4.2.2 内切葡聚糖酶活性的测定第52-53页
        4.2.3 β-葡萄糖苷酶酶活曲线的测定第53页
        4.2.4 利用预处理木质纤维素的发酵产醇评价第53-56页
    4.3 本章小结第56-57页
第五章 结论与展望第57-59页
    5.1 结论第57-58页
    5.2 展望第58-59页
参考文献第59-68页
附录第68-71页
致谢第71-72页

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