| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 昆虫先天免疫防御系统概述 | 第11-14页 |
| 1.1.1 昆虫体液免疫 | 第11-13页 |
| 1.1.2 昆虫细胞免疫 | 第13-14页 |
| 1.1.3 昆虫黑化反应 | 第14页 |
| 1.2 昆虫免疫稳态的研究 | 第14-17页 |
| 1.2.1 昆虫免疫稳态调控分子的分类 | 第14-15页 |
| 1.2.2 昆虫免疫稳态调控分子Caspar的筛选与鉴定 | 第15-16页 |
| 1.2.3 昆虫免疫稳态调控分子Caspar的作用机制研究 | 第16-17页 |
| 1.3 家蚕免疫负调控分子研究现状 | 第17-21页 |
| 1.3.1 家蚕先天免疫的研究现状 | 第17-18页 |
| 1.3.2 家蚕免疫稳态调控分子BmFAF的研究现状 | 第18-21页 |
| 第二章 引言 | 第21-23页 |
| 2.1 研究背景及目的意义 | 第21页 |
| 2.2 研究内容 | 第21-22页 |
| 2.3 技术路线 | 第22-23页 |
| 第三章 家蚕免疫稳态调控分子BmFAF的功能研究 | 第23-45页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第23-25页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第23页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第23-25页 |
| 3.2 实验方法 | 第25-34页 |
| 3.2.1 BmFAF结构域预测和多序列比对 | 第25-26页 |
| 3.2.2 不同物种FAF家族成员UBX结构域系统进化树构建 | 第26页 |
| 3.2.3 BmFAF时空表达谱和免疫诱导表达谱构建 | 第26-29页 |
| 3.2.4 细胞水平干涉和过表达BmFAF | 第29-34页 |
| 3.2.5 个体水平干涉和过表达BmFAF | 第34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-42页 |
| 3.3.1 BmFAF结构域预测和多序列比对 | 第34-35页 |
| 3.3.2 不同物种FAF家族成员UBX结构域系统进化树 | 第35页 |
| 3.3.3 BmFAF时空表达谱和免疫诱导表达谱构建 | 第35-37页 |
| 3.3.4 细胞水平干涉和过表达BmFAF | 第37-41页 |
| 3.3.5 个体水平干涉BmFAF后的家蚕存活率分析 | 第41-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-45页 |
| 第四章 家蚕BmFAF的作用机制研究 | 第45-75页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第45-48页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第45页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第45-48页 |
| 4.2 实验方法 | 第48-63页 |
| 4.2.1 Relish与Relish_(act)真核表达载体构建 | 第48-54页 |
| 4.2.2 Dredd真核表达载体构建 | 第54-57页 |
| 4.2.3 ubiquitin原核表达载体构建 | 第57-58页 |
| 4.2.4 Dredd切割活化Relish的Western blotting和酶活实验验证 | 第58页 |
| 4.2.5 BmFAF抑制Relish_(act)的活性的Western blotting和酶活实验验证 | 第58-59页 |
| 4.2.6 BmFAF结合泛素化蛋白的GST pull down实验验证 | 第59-62页 |
| 4.2.7 BmFAF通过泛素蛋白酶体途径降解Relish_(act)的实验验证 | 第62-63页 |
| 4.3 结果与分析 | 第63-72页 |
| 4.3.1 Relish、Relish_(act)以及Dredd的真核表达载体构建 | 第63-66页 |
| 4.3.2 ubiquitin的原核表达载体构建 | 第66页 |
| 4.3.3 Dredd切割Relish使其活化 | 第66-68页 |
| 4.3.4 BmFAF在蛋白水平抑制Relish_(act)的活性 | 第68-70页 |
| 4.3.5 BmFAF通过相互作用促进Relish_(act)泛素化降解 | 第70-72页 |
| 4.4 讨论 | 第72-75页 |
| 第五章 家蚕BmFAF的主要功能域研究 | 第75-85页 |
| 5.1 材料与试剂 | 第75-76页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第75页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第75-76页 |
| 5.2 实验方法 | 第76-79页 |
| 5.2.1 BmFAF截短突变体的真核表达载体构建 | 第76-79页 |
| 5.2.2 UBA结构域抑制Relish_(act)活性的Western blotting和酶活实验 | 第79页 |
| 5.2.3 UBA结构域结合泛素化蛋白 | 第79页 |
| 5.3 结果与分析 | 第79-84页 |
| 5.3.1 BmFAF的五个截短突变体的真核表达载体构建 | 第79-81页 |
| 5.3.2 UBA结构域抑制Relish_(act)活性 | 第81-83页 |
| 5.3.3 UBA结构域参与泛素化途径 | 第83-84页 |
| 5.4 讨论 | 第84-85页 |
| 第六章 综合与讨论 | 第85-89页 |
| 参考文献 | 第89-93页 |
| 在读期间发表论文参研课题情况 | 第93-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
