摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第10-21页 |
1.1 作物对逆境胁迫响应的研究现状 | 第11-16页 |
1.1.1 响应逆境胁迫的形态变化 | 第11-12页 |
1.1.2 响应逆境胁迫的生理生化变化 | 第12-15页 |
1.1.3 响应逆境胁迫的基因调控 | 第15-16页 |
1.2 SKIP蛋白质的研究进展 | 第16-18页 |
1.2.1 SKIP蛋白质的结构 | 第16-17页 |
1.2.2 SKIP蛋白质的功能研究 | 第17-18页 |
1.2.3 SKIP蛋白质调控的信号通路 | 第18页 |
1.3 本文研究目的 | 第18-19页 |
1.4 主要研究内容 | 第19-20页 |
1.5 研究的技术线路 | 第20-21页 |
第二章 材料和方法 | 第21-30页 |
2.1 材料 | 第21-22页 |
2.1.1 植物材料 | 第21页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第21页 |
2.1.3 酶及试剂 | 第21页 |
2.1.4 引物合成和测序 | 第21页 |
2.1.5 仪器设备 | 第21-22页 |
2.2 方法 | 第22-30页 |
2.2.1 DNA的提取 | 第22页 |
2.2.2 小麦叶片总RNA的提取 | 第22-23页 |
2.2.3 TaSKIP启动子、基因克隆及染色体定位、定量PCR引物设计 | 第23页 |
2.2.4 TaSKIP全长及其启动子扩增 | 第23-24页 |
2.2.5 TaSKIP -6A,TaSKIP-6D染色体定位 | 第24页 |
2.2.6 生物信息学分析 | 第24页 |
2.2.7 TaSKIP基因的qRT-PCR分析 | 第24-25页 |
2.2.8 过表达载体pBI121-TaSKIP构建及拟南芥浸染转化 | 第25-30页 |
2.2.8.1 Xba I切割质粒线性化 | 第25-26页 |
2.2.8.2 PCR扩增 | 第26-27页 |
2.2.8.3 重组质粒构建及转化大肠杆菌和农杆菌 | 第27-28页 |
2.2.8.4 拟南芥的种植 | 第28页 |
2.2.8.5 浸花法进行基因转化 | 第28-29页 |
2.2.8.6 转基因拟南芥的筛选 | 第29-30页 |
第三章 结果与分析 | 第30-40页 |
3.1 TaSKIP启动子、基因全长克隆 | 第30页 |
3.2 TaSKIP启动子、基因全长序列分析 | 第30-37页 |
3.2.1 TaSKIP-6A启动子克隆及分析 | 第30-31页 |
3.2.2 目的基因分析 | 第31-33页 |
3.2.3 不同物种中SKIP蛋白质对比和进化分析 | 第33-35页 |
3.2.4 功能结构域预测分析 | 第35-36页 |
3.2.5 TaSKIP编码蛋白质亲/疏水性预测 | 第36页 |
3.2.6 TaSKIP编码蛋白质二级结构预测 | 第36-37页 |
3.2.7 亚细胞定位预测 | 第37页 |
3.3 TaSKIP基因的染色体定位 | 第37-38页 |
3.4 TaSKIP基因的qRT-PCR分析 | 第38页 |
3.5 过表达载体pBI121-TaSKIP构建 | 第38-39页 |
3.6 拟南芥浸染转化及筛选 | 第39-40页 |
第四章 讨论 | 第40-41页 |
第五章 结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
作者简介 | 第48页 |