| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 第一部分 构建表达载体pBluescriptⅡSK(+)-aP2-Subfatin | 第17-37页 |
| 一、引言 | 第17-19页 |
| 二、实验材料与方法 | 第19-30页 |
| (一) 目的基因片段的扩增与回收 | 第19-22页 |
| (二) 目的基因插入表达载体 | 第22-25页 |
| (三) 转化及质粒抽提 | 第25-27页 |
| (四) 鉴定阳性菌落 | 第27-30页 |
| 三、结果与讨论 | 第30-37页 |
| (一) 目的基因的扩增与回收 | 第30-31页 |
| (二) 阳性菌落鉴定结果 | 第31-32页 |
| (三) 阳性克隆测序 | 第32-37页 |
| 第二部分 Subfatin脂肪特异性过表达转基因小鼠的鉴定及培育 | 第37-60页 |
| 一、引言 | 第37-39页 |
| 二、实验材料与方法 | 第39-55页 |
| (一) 阳性首建鼠的基因鉴定 | 第39-41页 |
| (二) 转基因小鼠的mRNA表达检测 | 第41-46页 |
| (三) 转基因小鼠脂肪组织表达Subfatin蛋白的检测 | 第46-50页 |
| (四) 转基因小鼠血清中Subfatin蛋白的浓度测定 | 第50-53页 |
| (五) 转基因小鼠扩大繁殖 | 第53-55页 |
| 三、结果与讨论 | 第55-60页 |
| (一) 阳性首建鼠的确立 | 第55-56页 |
| (二) 各组织的RT-PCR结果 | 第56页 |
| (三) Real-time PCR结果 | 第56-57页 |
| (四) 转基因小鼠脂肪组织Subfatin蛋白的检测 | 第57-58页 |
| (五) 转基因小鼠血清中Subfatin蛋白浓度的测定 | 第58页 |
| (六) 转基因小鼠的扩大繁殖 | 第58-60页 |
| 第三部分 转基因小鼠的胰岛素敏感性研究 | 第60-76页 |
| 一、引言 | 第60页 |
| 二、实验材料与方法 | 第60-70页 |
| (一) 体重、食量测定 | 第60-61页 |
| (二) 葡萄糖耐量实验 | 第61-63页 |
| (三) 血清中胰岛素浓度测定 | 第63-64页 |
| (四) 胰岛素耐量实验 | 第64-66页 |
| (五) 高胰岛素性正糖钳夹实验 | 第66-70页 |
| 三、结果与讨论 | 第70-76页 |
| (一) 体重、食量 | 第70-72页 |
| (二) 葡萄糖耐量实验 | 第72-74页 |
| (三) 胰岛素耐量实验 | 第74-75页 |
| (四) 高胰岛素性正糖钳夹实验 | 第75-76页 |
| 全文总结 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 综述 | 第82-92页 |
| 参考文献 | 第89-92页 |
| 在读期间发表论文和参加科研工作情况说明 | 第92-93页 |
| 附录 | 第93-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
