| 致谢 | 第4-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.1 植物类胡萝卜素研究进展 | 第10-14页 |
| 1.1.1 类胡萝卜素的理化性质与组成结构 | 第10-11页 |
| 1.1.2 类胡萝卜素的生理作用和生物学功能 | 第11-14页 |
| 1.1.2.1 类胡萝卜素在植物、微生物中的作用 | 第12页 |
| 1.1.2.2 在人体和动物中的作用 | 第12-14页 |
| 1.2 烟草类胡萝卜素研究进展 | 第14-18页 |
| 1.2.1 烟草类胡萝卜素的组成及功能 | 第14页 |
| 1.2.2 烟草类胡萝卜素及其降解产物与烟叶品质的关系 | 第14-16页 |
| 1.2.3 烟草类胡萝卜素代谢影响因素 | 第16-18页 |
| 1.3 植物类胡萝卜素的分子调控研究 | 第18-22页 |
| 1.3.1 类胡萝卜素生物合成途径 | 第18-19页 |
| 1.3.2 类胡萝卜素生物合成途径中的关键酶 | 第19-20页 |
| 1.3.3 LCY-b基因在类胡萝卜素合成途径中的重要作用 | 第20-22页 |
| 2 引言 | 第22-23页 |
| 3 材料与方法 | 第23-31页 |
| 3.1 生物炭对烟草类胡萝卜素代谢的影响 | 第23-26页 |
| 3.1.1 试验材料与设计 | 第23页 |
| 3.1.2 试验方法 | 第23-26页 |
| 3.1.2.1 总RNA的提取及反转录 | 第23-24页 |
| 3.1.2.2 cDNA第一链的合成 | 第24页 |
| 3.1.2.3 半定量RT-PCR | 第24-25页 |
| 3.1.2.4 类胡萝卜素含量的测定 | 第25页 |
| 3.1.2.5 类胡萝卜素降解产物含量测定 | 第25-26页 |
| 3.2 烟草LCY-b基因的克隆及生物信息学分析 | 第26-27页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第26页 |
| 3.2.2 LCY-b全长基因的克隆 | 第26页 |
| 3.2.3 LCY-b基因的生物信息学分析 | 第26-27页 |
| 3.3 LCY-b基因过表达载体的构建与转化 | 第27-29页 |
| 3.3.1 试验材料 | 第27-28页 |
| 3.3.1.1 菌株与载体 | 第27页 |
| 3.3.1.2 主要试剂药品和仪器 | 第27-28页 |
| 3.3.2 试验方法 | 第28-29页 |
| 3.4 转基因阳性植株的获得与检测 | 第29-31页 |
| 3.4.1 K326无菌苗的诱导 | 第29页 |
| 3.4.2 菌株活化 | 第29页 |
| 3.4.3 转化方案及转化植株的筛选 | 第29-30页 |
| 3.4.4 转基因植株DNA鉴定 | 第30页 |
| 3.4.5 转基因植株q PCR鉴定 | 第30-31页 |
| 3.4.6 转基因植株的农艺性状、类胡萝卜素及降解产物含量检测 | 第31页 |
| 3.5 数据处理 | 第31页 |
| 4 结果与分析 | 第31-47页 |
| 4.1 生物炭对烟草类胡萝卜素代谢的影响 | 第31-34页 |
| 4.1.1 烟草类胡萝卜素代谢关键基因表达分析 | 第31-33页 |
| 4.1.2 烟草类胡萝卜素含量分析 | 第33-34页 |
| 4.1.3 烟草类胡萝卜素降解产物含量分析 | 第34页 |
| 4.2 LCY-b基因的克隆与生物信息学分析 | 第34-39页 |
| 4.2.1 K326总RNA的提取 | 第34-35页 |
| 4.2.2 LCY-b基因的克隆 | 第35-36页 |
| 4.2.3 LCY-b基因和蛋白序列分析 | 第36-37页 |
| 4.2.4 蛋白质结构域分析 | 第37-38页 |
| 4.2.5 蛋白质疏水性/亲水性分析、跨膜区预测和螺旋卷曲分析 | 第38页 |
| 4.2.6 LCY-b蛋白质信号肽分析 | 第38-39页 |
| 4.2.7 蛋白质二级结构分析 | 第39页 |
| 4.3 LCY-b基因过表达载体的构建、转化与转基因阳性植株的获得 | 第39-42页 |
| 4.3.1 过表达载体构建及检测 | 第39-40页 |
| 4.3.2 转基因植株的获得 | 第40-41页 |
| 4.3.3 转基因植株的阳性检测 | 第41-42页 |
| 4.4 LCY-b基因过表达对烟草植株形态及类胡萝卜素代谢的影响 | 第42-47页 |
| 4.4.1 转基因烟草农艺性状测量 | 第42-43页 |
| 4.4.2 转基因烟草类胡萝卜素含量及组分分析 | 第43-45页 |
| 4.4.2.1 类胡萝卜素含量分析 | 第43-44页 |
| 4.4.2.2 类胡萝卜素组分变化分析 | 第44-45页 |
| 4.4.3 转基因株系类胡萝卜素降解产物含量分析 | 第45-47页 |
| 5 结论 | 第47-49页 |
| 5.1 生物炭对烟草类胡萝卜素代谢的影响 | 第47页 |
| 5.2 LCY-b基因的克隆与生物信息学分析 | 第47-48页 |
| 5.3 LCY-b基因过表达对烟草类胡萝卜素代谢的影响 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| Abstract | 第56-57页 |
