致谢 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第8-15页 |
1.1 小RNA研究进展 | 第8页 |
1.2 siRNA介导的RNA干扰 | 第8-10页 |
1.2.1 siRNA的合成 | 第8-9页 |
1.2.2 siRNA介导的RNA干扰机制 | 第9-10页 |
1.2.3 siRNA介导的DNA甲基化 | 第10页 |
1.3 miRNA介导的RNA干扰 | 第10-14页 |
1.3.1 miRNA的生物合成 | 第10-11页 |
1.3.2 miRNA的生理功能 | 第11-14页 |
1.4 siRNA与miRNA的关系 | 第14-15页 |
2 引言 | 第15-16页 |
3 材料与方法 | 第16-20页 |
3.1 材料 | 第16页 |
3.1.1 植物材料 | 第16页 |
3.1.2 实验试剂及引物 | 第16页 |
3.2 方法 | 第16-20页 |
3.2.1 RNAi转基因水稻阳性鉴定 | 第16页 |
3.2.2 籽粒总RNA提取 | 第16-17页 |
3.2.3 目的基因及pre-miRNA表达量验证 | 第17页 |
3.2.4 小RNA的验证方法 | 第17-20页 |
4 结果与分析 | 第20-31页 |
4.1 目的基因检测 | 第20-21页 |
4.1.1 RNAi转基因水稻叶片GUS化学活性检测 | 第20页 |
4.1.2 RNAi转基因水稻籽粒目的基因RT-PCR定量验证 | 第20-21页 |
4.2 转基因T1代与野生型水稻籽粒中小RNA的比较分析 | 第21-24页 |
4.2.1 测序数据评估 | 第21页 |
4.2.2 sRNA分类注释 | 第21-22页 |
4.2.3 sRNA的长度分布 | 第22-23页 |
4.2.4 已知miRNA比对 | 第23-24页 |
4.3 RNAi转基因系籽粒sRNA差异分析 | 第24-29页 |
4.3.1 转基因与对照籽粒中共有和特有小RNA的比较 | 第24-25页 |
4.3.2 差异miRNA的表达分析 | 第25-27页 |
4.3.3 差异miRNA的功能分析 | 第27-28页 |
4.3.4 差异miRNA的pre-miRNA的表达验证 | 第28-29页 |
4.4 RNAi转基因水稻性状分析 | 第29-31页 |
4.4.1 植株性状 | 第29页 |
4.4.2 籽粒性状 | 第29-31页 |
5 讨论 | 第31-34页 |
5.1 RNAi对 24nt-siRNA表达的影响 | 第31页 |
5.2 24nt-siRNA对miRNA的表达的影响 | 第31-32页 |
5.3 miRNA的表达差异可能是籽粒变化的原因 | 第32页 |
5.4 存在问题与展望 | 第32-34页 |
参考文献 | 第34-40页 |
英文摘要 | 第40-41页 |