| 致谢 | 第4-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.1 转基因的研究进展 | 第10-13页 |
| 1.1.1 基因的转化方法 | 第10-12页 |
| 1.1.1.1 农杆菌介导转化法 | 第10-11页 |
| 1.1.1.2 基因枪转化法 | 第11页 |
| 1.1.1.3 花粉管通道法 | 第11-12页 |
| 1.1.2 转基因产品的检测方法 | 第12页 |
| 1.1.3 转基因的发展概况 | 第12-13页 |
| 1.2 抗虫基因的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.2.1 抗虫转基因的意义 | 第13-14页 |
| 1.2.2 抗虫基因的种类 | 第14页 |
| 1.2.3 抗蚜虫基因的种类 | 第14-15页 |
| 1.2.4 [反]-β-法尼烯合成酶基因的优点 | 第15页 |
| 1.3 自删系统的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.3.1 转基因生物选择标记基因的分类 | 第15-16页 |
| 1.3.2 转基因生物的不安全因素 | 第16页 |
| 1.3.3 解决转基因生物选择标记基因的方法 | 第16页 |
| 1.3.4 位点特异性重组系统 | 第16-17页 |
| 1.3.5 位点特异性重组系统Cre/loxp的优劣势 | 第17-18页 |
| 2 引言 | 第18-19页 |
| 3 材料与方法 | 第19-34页 |
| 3.1 材料 | 第19-20页 |
| 3.2 试剂 | 第20-23页 |
| 3.3 方法 | 第23-34页 |
| 3.3.1 载体构建 | 第23-29页 |
| 3.3.1.1 大肠杆菌感受态的制备 | 第23页 |
| 3.3.1.2 大肠杆菌感受态的转化 | 第23页 |
| 3.3.1.3 基因序列的扩增 | 第23-25页 |
| 3.3.1.4 质粒提取 | 第25页 |
| 3.3.1.5 操作步骤 | 第25-29页 |
| 3.3.2 浸染拟南芥 | 第29-30页 |
| 3.3.2.1 拟南芥种子消毒法---湿法 | 第29页 |
| 3.3.2.2 农杆菌感受态的制备 | 第29页 |
| 3.3.2.3 农杆菌感受态细胞的转化 | 第29-30页 |
| 3.3.2.4 浸染液的配制 | 第30页 |
| 3.3.2.5 对PNCX-EβF挑阳性单克隆摇菌 | 第30页 |
| 3.3.2.6 利用农杆菌转染法转化拟南芥 | 第30页 |
| 3.3.3 筛选与检测已转化的拟南芥 | 第30-32页 |
| 3.3.3.1 制备G418母液 | 第30-31页 |
| 3.3.3.2 用SLS提取DNA的准备试验 | 第31页 |
| 3.3.3.3 用SLS法提取DNA的过程 | 第31-32页 |
| 3.3.4 用 β-雌二醇诱导T2代转化拟南芥植株 | 第32-33页 |
| 3.3.4.1 试验准备 | 第32页 |
| 3.3.4.2 拟南芥诱导处理方法 | 第32-33页 |
| 3.3.5 驱蚜行为表型检测 | 第33-34页 |
| 4 结果与分析 | 第34-45页 |
| 4.1 G418对转化拟南芥的筛选与检测 | 第34-41页 |
| 4.1.1 筛选浓度的确定 | 第34-35页 |
| 4.1.1.1 不同浓度G418对T0和T1世代转化植株的筛选 | 第34页 |
| 4.1.1.2 对PCR检测转化过的纯合拟南芥T3代植株幼苗喷洒G418 | 第34-35页 |
| 4.1.2 转化率与分离率 | 第35-38页 |
| 4.1.3 拟南芥植株的PCR检测 | 第38-40页 |
| 4.1.4 驱蚜试验 | 第40-41页 |
| 4.2 诱导已检测转化成功的拟南芥植株 | 第41-45页 |
| 4.2.1 β-雌二醇诱导浓度的确定 | 第41-42页 |
| 4.2.2 β-雌二醇诱导处理过的转基因植株筛选 | 第42-44页 |
| 4.2.3 β-雌二醇诱导过的转基因植株PCR检测 | 第44-45页 |
| 5 结论与讨论 | 第45-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| ABSTRACT | 第52-53页 |
