| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11页 |
| 前言 | 第12-33页 |
| 1 次黄嘌呤核苷酸脱氢酶IMPDH概述 | 第12-20页 |
| 1.1 嘌呤核苷酸代谢 | 第12-13页 |
| 1.2 IMPDH的类型 | 第13-14页 |
| 1.3 IMPDH的分布与表达 | 第14页 |
| 1.4 IMPDH的结构和功能区域 | 第14-16页 |
| 1.4.1 催化结构域 | 第15-16页 |
| 1.4.2 CBS区域 | 第16页 |
| 1.5 IMPDH的抑制剂 | 第16-17页 |
| 1.6 IMPDH的功能 | 第17-20页 |
| 1.6.1 IMPDH与脂小体的形成 | 第17-18页 |
| 1.6.2 IMPDH参与TLR2信号通路的调控 | 第18页 |
| 1.6.3 IMPDH与核酸的结合 | 第18-19页 |
| 1.6.4 酵母IMPDH与转录复合体的结合 | 第19页 |
| 1.6.5 IMPDH与转录调控 | 第19-20页 |
| 2 SUMO化修饰概述 | 第20-31页 |
| 2.1 蛋白质翻译后修饰 | 第20-21页 |
| 2.2 SUMO化修饰的发现 | 第21页 |
| 2.3 SUMO的类型与结构 | 第21-23页 |
| 2.4 SUMO化修饰对底物的选择性 | 第23-24页 |
| 2.5 SUMO通路组成 | 第24-27页 |
| 2.5.1 SUMO激活酶E1 | 第24-25页 |
| 2.5.2 SUMO结合酶E2 | 第25-26页 |
| 2.5.3 SUMO连接酶E3 | 第26-27页 |
| 2.5.4 去SUMO化酶 | 第27页 |
| 2.6 SUMO化修饰的调控 | 第27-28页 |
| 2.7 SUMO化修饰的生物学功能 | 第28-31页 |
| 2.7.1 SUMO化调节底物蛋白的相互作用 | 第28-29页 |
| 2.7.2 SUMO化影响蛋白核浆定位 | 第29页 |
| 2.7.3 SUMO化修饰对转录过程的调控 | 第29-30页 |
| 2.7.4 SUMO化抑制泛素介导的蛋白降解 | 第30-31页 |
| 2.7.5 SUMO化修饰与DNA损伤修复 | 第31页 |
| 3 本论文研究的目的、内容和意义 | 第31-33页 |
| 材料与方法 | 第33-43页 |
| 1 实验材料 | 第33-35页 |
| 1.1 主要试剂及药品 | 第33-34页 |
| 1.2 实验器材 | 第34-35页 |
| 1.3 细胞株 | 第35页 |
| 1.4 菌株 | 第35页 |
| 1.5 质粒载体 | 第35页 |
| 2 实验方法 | 第35-43页 |
| 2.1 质粒转化 | 第35页 |
| 2.2 质粒提取 | 第35-36页 |
| 2.2.1 小规模质粒提取 | 第35-36页 |
| 2.2.2 中量质粒提取 | 第36页 |
| 2.3 表达质粒构建 | 第36-37页 |
| 2.4 体外SUMO化实验 | 第37-38页 |
| 2.5 细胞培养 | 第38页 |
| 2.6 细胞转染 | 第38-39页 |
| 2.6.1 磷酸钙沉淀法 | 第38-39页 |
| 2.6.2 脂质体转染 | 第39页 |
| 2.7 蛋白提取与Western blot | 第39-41页 |
| 2.8 核浆分离 | 第41页 |
| 2.9 免疫沉淀与SUMO化检测 | 第41页 |
| 2.10 免疫荧光 | 第41-42页 |
| 2.11 IMPDH2酶活性测定 | 第42页 |
| 2.12 药物处理 | 第42-43页 |
| 结果与分析 | 第43-58页 |
| 3.1 IMPDH2与Ubc9结合 | 第43-45页 |
| 3.2 IMPDH2细胞内的SUMO化修饰 | 第45-46页 |
| 3.3 IMPDH2体外SUMO化修饰 | 第46-48页 |
| 3.4 IMPDH2发生SUMO化修饰的位点 | 第48-49页 |
| 3.5 SUMO化修饰的IMPDH2定位于胞浆 | 第49-51页 |
| 3.6 SUMO化修饰降低IMDPH2的蛋白稳定性 | 第51-52页 |
| 3.7 IMPDH2的SUMO化修饰竞争其泛素化修饰 | 第52-53页 |
| 3.8 SUMO化修饰降低IMPDH2的酶活 | 第53-55页 |
| 3.9 阿霉素增强IMPDH2的SUMO化修饰 | 第55-58页 |
| 讨论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-70页 |
| 在学期间发表的论文 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |