致谢 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第13-28页 |
1.1 前言 | 第13-14页 |
1.2 CD133 | 第14-20页 |
1.2.1 CD133分子概述 | 第14-15页 |
1.2.2 CD133与干细胞 | 第15-16页 |
1.2.3 CD133与肿瘤干细胞 | 第16-17页 |
1.2.4 CD133参与肿瘤中生理生化活动 | 第17-18页 |
1.2.5 CD133的表达调控 | 第18-19页 |
1.2.6 CD133在果蝇中的同源蛋白 | 第19-20页 |
1.3 CD117 | 第20-23页 |
1.3.1 CD117分子概述 | 第20页 |
1.3.2 CD117与肿瘤 | 第20-22页 |
1.3.3 CD117参与的信号通路 | 第22页 |
1.3.4 CD117在果蝇中的同源蛋白 | 第22-23页 |
1.4 肿瘤与线粒体 | 第23-28页 |
第二章 CD133/Prominin-like缺失导致果蝇线粒体功能障碍的机制研究 | 第28-61页 |
2.1 前言 | 第28-29页 |
2.2 实验材料 | 第29-32页 |
2.3 实验方法 | 第32-49页 |
2.3.1 线粒体结构的透射电镜镜观察 | 第32-33页 |
2.3.2 S2细胞的复苏与冻存 | 第33-34页 |
2.3.3 Prominin-like在S2细胞中的定位 | 第34-38页 |
2.3.4 S2细胞中prominin-like的敲除 | 第38-47页 |
2.3.5 细胞ATP产量检测 | 第47-48页 |
2.3.6 细胞活性氧的测定 | 第48-49页 |
2.4 实验结果 | 第49-59页 |
2.4.1 Prominin-like的保守性分析 | 第49-52页 |
2.4.2 Prominin-like蛋白在S2细胞中的定位 | 第52页 |
2.4.3 Prominin-like表达的敲低 | 第52-53页 |
2.4.4 Prominin-like缺失对线粒体相关蛋白表达的影响 | 第53-55页 |
2.4.5 Prominin-like缺失对细胞线粒体ATP产生的影响 | 第55-56页 |
2.4.6 Prominin-like缺失对细胞活性氧产生的影响 | 第56-57页 |
2.4.7 Prominin-like缺失对线粒体结构的影响 | 第57-58页 |
2.4.8 prominin-like突变体雌性果蝇运动能力的分析 | 第58-59页 |
2.5 讨论 | 第59-61页 |
第三章 Prominin-like互作蛋白的筛选与鉴定 | 第61-91页 |
3.1 引言 | 第61-63页 |
3.2 实验材料 | 第63-67页 |
3.3 实验方法 | 第67-77页 |
3.3.1 酵母双杂交筛选prominin-like的互作蛋白 | 第67-72页 |
3.3.2 GST-Pull down验证酵母双杂交筛选结果 | 第72-76页 |
3.3.3 免疫共沉淀(Co-IP)在S2细胞中验证酵母双杂筛选结果 | 第76-77页 |
3.3.4 S2细胞中ND20的敲除 | 第77页 |
3.4 实验结果 | 第77-89页 |
3.4.1 酵母双杂交实验筛选出prominin-like的互作蛋白ND20 | 第77-83页 |
3.4.2 GST Pull-Down实验体外验证prominin-like-1与ND20之间的直接互作效应 | 第83-86页 |
3.4.3 免疫共沉淀(Co-IP)在S2细胞中验证prominin-like与ND20之间的互作 | 第86-87页 |
3.4.4 Prominin-like与ND20间的功能关系 | 第87-89页 |
3.5 讨论 | 第89-91页 |
第四章 ND20缺失导致果蝇细胞功能障碍的机制研究 | 第91-103页 |
4.1 引言 | 第91页 |
4.2 实验材料 | 第91页 |
4.3 实验方法 | 第91-94页 |
4.3.1 ND20在S2细胞中定位 | 第91-92页 |
4.3.2 细胞生长曲线的测定 | 第92页 |
4.3.3 细胞周期检测 | 第92-93页 |
4.3.4 荧光定量PCR检测周期调控蛋白mRNA含量 | 第93-94页 |
4.3.5 细胞活性氧和ATP检测 | 第94页 |
4.4 实验结果 | 第94-101页 |
4.4.1 ND20在蛋白在物种间具有高度保守性 | 第94页 |
4.4.2 ND20蛋白主要定位在细胞的线粒体上 | 第94-95页 |
4.4.3 ND20缺失导致细胞生长停滞 | 第95-96页 |
4.4.4 ND20缺失对细胞周期的影响 | 第96页 |
4.4.5 ND20缺失对细胞周期调控蛋白表达的影响 | 第96-98页 |
4.4.6 ND20缺失对线粒体相关蛋白表达的影响 | 第98-99页 |
4.4.7 ND20缺失对细胞活性氧产生的影响 | 第99-100页 |
4.4.8 ND20缺失对细胞ATP产生的影响 | 第100-101页 |
4.5 讨论 | 第101-103页 |
第五章 CD117/PVR互作蛋白的筛选与鉴定 | 第103-113页 |
5.1 引言 | 第103页 |
5.2 实验材料 | 第103页 |
5.3 实验方法 | 第103-106页 |
5.3.1 酵母双杂交筛选PVR的互作蛋白 | 第103-105页 |
5.3.2 Co-IP验证PVR与Shc之间的互作 | 第105-106页 |
5.4 实验结果 | 第106-111页 |
5.4.1 酵母双杂交实验筛选出PVR的互作蛋白Shc | 第106-110页 |
5.4.2 免疫共沉淀(Co-IP)在S2细胞中验证PVR与Shc之间的互作效应 | 第110-111页 |
5.5 讨论 | 第111-113页 |
第六章 论文创新点和存在问题 | 第113-114页 |
6.1 创新点 | 第113页 |
6.2 存在问题 | 第113-114页 |
参考文献 | 第114-126页 |
附录 | 第126-127页 |
个人简历 | 第127页 |