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果蝇干细胞表面标志物CD133/prominin-like和CD117/PVR的互作蛋白鉴定及功能研究

致谢第6-7页
摘要第7-8页
Abstract第8-9页
第一章 文献综述第13-28页
    1.1 前言第13-14页
    1.2 CD133第14-20页
        1.2.1 CD133分子概述第14-15页
        1.2.2 CD133与干细胞第15-16页
        1.2.3 CD133与肿瘤干细胞第16-17页
        1.2.4 CD133参与肿瘤中生理生化活动第17-18页
        1.2.5 CD133的表达调控第18-19页
        1.2.6 CD133在果蝇中的同源蛋白第19-20页
    1.3 CD117第20-23页
        1.3.1 CD117分子概述第20页
        1.3.2 CD117与肿瘤第20-22页
        1.3.3 CD117参与的信号通路第22页
        1.3.4 CD117在果蝇中的同源蛋白第22-23页
    1.4 肿瘤与线粒体第23-28页
第二章 CD133/Prominin-like缺失导致果蝇线粒体功能障碍的机制研究第28-61页
    2.1 前言第28-29页
    2.2 实验材料第29-32页
    2.3 实验方法第32-49页
        2.3.1 线粒体结构的透射电镜镜观察第32-33页
        2.3.2 S2细胞的复苏与冻存第33-34页
        2.3.3 Prominin-like在S2细胞中的定位第34-38页
        2.3.4 S2细胞中prominin-like的敲除第38-47页
        2.3.5 细胞ATP产量检测第47-48页
        2.3.6 细胞活性氧的测定第48-49页
    2.4 实验结果第49-59页
        2.4.1 Prominin-like的保守性分析第49-52页
        2.4.2 Prominin-like蛋白在S2细胞中的定位第52页
        2.4.3 Prominin-like表达的敲低第52-53页
        2.4.4 Prominin-like缺失对线粒体相关蛋白表达的影响第53-55页
        2.4.5 Prominin-like缺失对细胞线粒体ATP产生的影响第55-56页
        2.4.6 Prominin-like缺失对细胞活性氧产生的影响第56-57页
        2.4.7 Prominin-like缺失对线粒体结构的影响第57-58页
        2.4.8 prominin-like突变体雌性果蝇运动能力的分析第58-59页
    2.5 讨论第59-61页
第三章 Prominin-like互作蛋白的筛选与鉴定第61-91页
    3.1 引言第61-63页
    3.2 实验材料第63-67页
    3.3 实验方法第67-77页
        3.3.1 酵母双杂交筛选prominin-like的互作蛋白第67-72页
        3.3.2 GST-Pull down验证酵母双杂交筛选结果第72-76页
        3.3.3 免疫共沉淀(Co-IP)在S2细胞中验证酵母双杂筛选结果第76-77页
        3.3.4 S2细胞中ND20的敲除第77页
    3.4 实验结果第77-89页
        3.4.1 酵母双杂交实验筛选出prominin-like的互作蛋白ND20第77-83页
        3.4.2 GST Pull-Down实验体外验证prominin-like-1与ND20之间的直接互作效应第83-86页
        3.4.3 免疫共沉淀(Co-IP)在S2细胞中验证prominin-like与ND20之间的互作第86-87页
        3.4.4 Prominin-like与ND20间的功能关系第87-89页
    3.5 讨论第89-91页
第四章 ND20缺失导致果蝇细胞功能障碍的机制研究第91-103页
    4.1 引言第91页
    4.2 实验材料第91页
    4.3 实验方法第91-94页
        4.3.1 ND20在S2细胞中定位第91-92页
        4.3.2 细胞生长曲线的测定第92页
        4.3.3 细胞周期检测第92-93页
        4.3.4 荧光定量PCR检测周期调控蛋白mRNA含量第93-94页
        4.3.5 细胞活性氧和ATP检测第94页
    4.4 实验结果第94-101页
        4.4.1 ND20在蛋白在物种间具有高度保守性第94页
        4.4.2 ND20蛋白主要定位在细胞的线粒体上第94-95页
        4.4.3 ND20缺失导致细胞生长停滞第95-96页
        4.4.4 ND20缺失对细胞周期的影响第96页
        4.4.5 ND20缺失对细胞周期调控蛋白表达的影响第96-98页
        4.4.6 ND20缺失对线粒体相关蛋白表达的影响第98-99页
        4.4.7 ND20缺失对细胞活性氧产生的影响第99-100页
        4.4.8 ND20缺失对细胞ATP产生的影响第100-101页
    4.5 讨论第101-103页
第五章 CD117/PVR互作蛋白的筛选与鉴定第103-113页
    5.1 引言第103页
    5.2 实验材料第103页
    5.3 实验方法第103-106页
        5.3.1 酵母双杂交筛选PVR的互作蛋白第103-105页
        5.3.2 Co-IP验证PVR与Shc之间的互作第105-106页
    5.4 实验结果第106-111页
        5.4.1 酵母双杂交实验筛选出PVR的互作蛋白Shc第106-110页
        5.4.2 免疫共沉淀(Co-IP)在S2细胞中验证PVR与Shc之间的互作效应第110-111页
    5.5 讨论第111-113页
第六章 论文创新点和存在问题第113-114页
    6.1 创新点第113页
    6.2 存在问题第113-114页
参考文献第114-126页
附录第126-127页
个人简历第127页

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