| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 前言 | 第11-25页 |
| 1.1 核糖核酸酶 | 第11-19页 |
| 1.1.1 主要的内切核糖核酸酶 | 第11-15页 |
| 1.1.2 主要的外切核糖核酸酶 | 第15-19页 |
| 1.2 RNA加工与降解 | 第19-22页 |
| 1.2.1 rRNA和tRNA的加工 | 第19-21页 |
| 1.2.2 RNA的降解 | 第21-22页 |
| 1.3 十字花科黑腐病菌及其核糖核酸酶 | 第22-24页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-50页 |
| 2.1 本研究所用的材料与试剂 | 第25-36页 |
| 2.1.1 质粒和菌株 | 第25-28页 |
| 2.1.2 引物 | 第28-29页 |
| 2.1.3 培养基 | 第29-30页 |
| 2.1.4 抗生素 | 第30-31页 |
| 2.1.5 菌株培养与保存 | 第31页 |
| 2.1.6 试剂与溶液 | 第31-36页 |
| 2.2 研究方法 | 第36-50页 |
| 2.2.1 Northern Blotting | 第36-38页 |
| 2.2.2 质粒提取 | 第38-39页 |
| 2.2.3 细菌总DNA提取 | 第39页 |
| 2.2.4 常规PCR反应 | 第39-40页 |
| 2.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第40-41页 |
| 2.2.6 DNA片段纯化 | 第41页 |
| 2.2.7 DNA酶切 | 第41页 |
| 2.2.8 DNA连接 | 第41-42页 |
| 2.2.9 制备感受态细胞 | 第42页 |
| 2.2.10 化学转化实验 | 第42-43页 |
| 2.2.11 三亲本接合实验 | 第43页 |
| 2.2.12 细菌生物学表型检测 | 第43-45页 |
| 2.2.13 6× His RNase D蛋白表达与纯化 | 第45-46页 |
| 2.2.14 RNase D体外剪切RNA | 第46-50页 |
| 第三章 结果与分析 | 第50-78页 |
| 3.1 Xcc8004中5S rRNA的检测 | 第50-51页 |
| 3.2 RNase D参与5S rRNA主产物的剪切 | 第51-63页 |
| 3.2.1 rnD基因突变导致5S rRNA主产物的消失 | 第51-55页 |
| 3.2.2 rnD基因突变体的功能互补 | 第55-59页 |
| 3.2.3 rnD基因的过量表达导致5S rRNA剪切加强 | 第59-63页 |
| 3.3 RNase D直接参与5S rRNA的剪切 | 第63-75页 |
| 3.3.1 RNase D的表达与纯化 | 第63-68页 |
| 3.3.2 RNA样品准备 | 第68-69页 |
| 3.3.3 RNase D体外剪切5S rRNA和tRNA | 第69-75页 |
| 3.4 rnD基因的生物学功能鉴定 | 第75-78页 |
| 3.4.1 rnD基因与胞外多糖的产生有关 | 第75-76页 |
| 3.4.2 rnD基因不影响菌株的胞外酶产生、游动能力和生物膜的形成 | 第76-77页 |
| 3.4.3 rnD基因不影响菌株对宿主植物的致病性 | 第77-78页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第78-81页 |
| 4.1 总结 | 第78-79页 |
| 4.2 讨论 | 第79-80页 |
| 4.3 后续工作 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 攻读硕士学位期间完成的研究论文 | 第91页 |
