| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-23页 |
| 1 禽流感概述 | 第12-13页 |
| 2 禽流感病原特征 | 第13-17页 |
| ·形态和结构 | 第13页 |
| ·禽流感病毒的分子生物学特性 | 第13-17页 |
| ·基因组及其蛋白组成 | 第13-16页 |
| ·禽流感病毒的分子进化与抗原变异 | 第16-17页 |
| 3 禽流感病毒的致病机制 | 第17-19页 |
| ·血凝素(HA)与致病性关系 | 第17页 |
| ·神经氨酸酶(NA)与致病性关系 | 第17-18页 |
| ·核蛋白(NP)与致病性关系 | 第18页 |
| ·基质蛋白(M)与致病性关系 | 第18页 |
| ·非结构蛋白(NS)与致病性关系 | 第18-19页 |
| ·聚合酶复合体(PB1,PB2,PA)与致病性关系 | 第19页 |
| 4 禽流感疫苗研究 | 第19-22页 |
| ·灭活全病毒疫苗 | 第19-20页 |
| ·亚单位疫苗 | 第20页 |
| ·重组活载体疫苗 | 第20-21页 |
| ·核酸疫苗 | 第21页 |
| ·通用疫苗 | 第21页 |
| ·反向遗传技术在禽流感疫苗研制中的应用 | 第21-22页 |
| ·新型疫苗 | 第22页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 两株H9 亚型禽流感病毒全基因组的序列分析 | 第23-58页 |
| 1 试验材料 | 第23-24页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器及材料 | 第23-24页 |
| ·阿氏液配制 | 第24页 |
| ·1%鸡红细胞悬液制备 | 第24页 |
| ·LB 培养基配制 | 第24页 |
| 2 试验方法 | 第24-30页 |
| ·病毒分离 | 第24页 |
| ·病毒的血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验 | 第24页 |
| ·引物设计与合成 | 第24-25页 |
| ·尿囊液病毒RNA 的抽提 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR | 第26-27页 |
| ·反转录(RT)(40μL 反应体系) | 第26页 |
| ·PCR(50μL 反应体系) | 第26-27页 |
| ·PCR 产物电泳鉴定 | 第27页 |
| ·PCR 产物切胶回收 | 第27-28页 |
| ·回收产物与pMD18-T vector 的连接 | 第28页 |
| ·DH5α感受态细胞的制备(采用氯化钙法) | 第28页 |
| ·连接产物的转化 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的提取 | 第29页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定(50μl 反应体系) | 第29页 |
| ·目的基因的核苷酸序列测定、拼接及分析 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-54页 |
| ·病毒分离结果 | 第30页 |
| ·H9 亚型AIV 全基因组片段扩增结果 | 第30页 |
| ·重组质粒PCR 鉴定结果 | 第30-31页 |
| ·HA 基因序列测定与遗传进化分析 | 第31-33页 |
| ·HA 基因的核苷酸和氨基酸序列测定 | 第31页 |
| ·HA 基因的序列分析 | 第31-32页 |
| ·HA 基因序列同源性分析 | 第32-33页 |
| ·HA 基因序列遗传进化树分析 | 第33页 |
| ·NA 基因序列测定与遗传进树分析 | 第33-35页 |
| ·NA 基因的核苷酸和氨基酸序列测定 | 第33-34页 |
| ·NA 基因的序列分析 | 第34页 |
| ·NA 基因序列同源性分析 | 第34-35页 |
| ·NA 基因序列遗传进化树分析 | 第35页 |
| ·M 基因序列测定与遗传进树分析 | 第35-36页 |
| ·M 基因的核苷酸和氨基酸序列测定 | 第35页 |
| ·M 基因的序列分析 | 第35-36页 |
| ·M 基因序列同源性分析 | 第36页 |
| ·M 基因序列遗传进化树分析 | 第36页 |
| ·NS 基因序列测定与遗传进树分析 | 第36-37页 |
| ·NS 基因的核苷酸和氨基酸序列测定 | 第36页 |
| ·NS 基因序列同源性分析 | 第36-37页 |
| ·NS 基因序列遗传进化树分析 | 第37页 |
| ·NP 基因序列测定与遗传进树分析 | 第37-38页 |
| ·NP 基因的核苷酸和氨基酸序列测定 | 第37页 |
| ·NP 基因序列同源性分析 | 第37页 |
| ·NP 基因序列遗传进化树分析 | 第37-38页 |
| ·PB1 基因序列测定与遗传进树分析 | 第38页 |
| ·PB1 基因的核苷酸和氨基酸序列测定 | 第38页 |
| ·PB1 基因序列同源性分析 | 第38页 |
| ·PB1 基因序列遗传进化树分析 | 第38页 |
| ·PB2 基因序列测定与遗传进树分析 | 第38-39页 |
| ·PB2 基因的核苷酸和氨基酸序列测定 | 第38页 |
| ·PB2 基因序列同源性分析 | 第38-39页 |
| ·PB2 基因序列遗传进化树分析 | 第39页 |
| ·PA 基因序列测定与遗传进树分析 | 第39-54页 |
| ·PA 基因的核苷酸和氨基酸序列测定 | 第39页 |
| ·PA 基因序列同源性分析 | 第39页 |
| ·PA 基因序列遗传进化树分析 | 第39-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| ·HA 基因氨基酸序列分析讨论 | 第54-55页 |
| ·NA 基因氨基酸序列分析讨论 | 第55页 |
| ·8 个基因的同源性和遗传演化分析讨论 | 第55-57页 |
| 5 小结 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 附录 | 第65-79页 |
| 致谢 | 第79页 |