| 缩略词表 | 第7-9页 |
| 摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 第一章 前言 | 第16-21页 |
| 1.1 水环境中的ARGS | 第16-17页 |
| 1.2 硝化反应与氨氧化菌 | 第17-18页 |
| 1.3 抗生素抗性质粒 | 第18-19页 |
| 1.4 ARGS与AOB | 第19页 |
| 1.5 课题研究思路和内容 | 第19-21页 |
| 第二章 硝化生物反应器及RP4质粒转移模型的构建 | 第21-40页 |
| 2.1 材料与方法 | 第21-29页 |
| 2.1.1 主要试剂和仪器 | 第21-24页 |
| 2.1.2 平行运行SBR的构建及运行方式 | 第24-25页 |
| 2.1.3 平行运行SBR监测指标及方法 | 第25页 |
| 2.1.4 供体菌的培养 | 第25页 |
| 2.1.5 RP4质粒的提取 | 第25-28页 |
| 2.1.5.1 溶液配制 | 第26页 |
| 2.1.5.2 SDS-碱裂解法（大量）制备质粒 | 第26-27页 |
| 2.1.5.3 浓度及纯度测定 | 第27页 |
| 2.1.5.4 RP4质粒小量提取 | 第27页 |
| 2.1.5.5 RP4质粒的PCR验证 | 第27-28页 |
| 2.1.6 AOB培养及纯化 | 第28-29页 |
| 2.1.6.1 试剂配置 | 第28页 |
| 2.1.6.2 培养基配置 | 第28页 |
| 2.1.6.3 AOB富集培养 | 第28-29页 |
| 2.1.6.4 AOB纯化 | 第29页 |
| 2.1.6.5 AOB鉴定 | 第29页 |
| 2.1.7 统计学处理 | 第29页 |
| 2.2 结果 | 第29-36页 |
| 2.2.1 SBR运行情况 | 第29-34页 |
| 2.2.1.1 标准曲线 | 第29-30页 |
| 2.2.1.2 SBR运行情况-驯化阶段 | 第30-32页 |
| 2.2.1.3 SBR运行情况-稳定阶段 | 第32-34页 |
| 2.2.2 SBR系统污泥性状 | 第34-35页 |
| 2.2.3 RP4转移模型构建 | 第35页 |
| 2.2.3.1 供体菌的培养 | 第35页 |
| 2.2.3.2 质粒提取 | 第35页 |
| 2.2.4 AOB培养及纯化 | 第35-36页 |
| 2.3 讨论 | 第36-38页 |
| 2.3.1 平行运行硝化SBR的构建 | 第36-38页 |
| 2.3.2 RP4转移模型构建 | 第38页 |
| 2.3.3 AOB培养及纯化 | 第38页 |
| 2.4 小结 | 第38-40页 |
| 第三章 RP4质粒对AOB生长代谢影响机制研究 | 第40-68页 |
| 3.1 材料与方法 | 第40-53页 |
| 3.1.1 主要试剂和仪器 | 第40-42页 |
| 3.1.2 取样方法 | 第42-43页 |
| 3.1.3 氨氮，硝态氮测定及污泥性状 | 第43页 |
| 3.1.4 供体菌的计数 | 第43页 |
| 3.1.5 活性污泥总RNA提取 | 第43-44页 |
| 3.1.5.1 溶液配制 | 第43-44页 |
| 3.1.5.2 RNA提取操作 | 第44页 |
| 3.1.5.3 RNA纯化及反转录 | 第44页 |
| 3.1.6 活性污泥总DNA提取 | 第44-45页 |
| 3.1.7 总细菌、AOB、RP4质粒的荧光定量PCR | 第45-48页 |
| 3.1.7.1 荧光定量PCR标准品的制备 | 第45-46页 |
| 3.1.7.2 荧光定量PCR绘制标准曲线 | 第46-47页 |
| 3.1.7.3 荧光定量PCR测定样品 | 第47-48页 |
| 3.1.8 DGGE | 第48-50页 |
| 3.1.8.1 AOB的巢式PCR | 第48-49页 |
| 3.1.8.2 DGGE相关溶液配制 | 第49页 |
| 3.1.8.3 DGGE操作步骤 | 第49-50页 |
| 3.1.8.4 目的条带测序 | 第50页 |
| 3.1.9 FISH | 第50-52页 |
| 3.1.9.1 溶液配制 | 第51页 |
| 3.1.9.2 FISH操作步骤 | 第51-52页 |
| 3.1.10 氨氧化相关基因转录水平分析 | 第52-53页 |
| 3.1.11 统计学处理 | 第53页 |
| 3.2 结果 | 第53-63页 |
| 3.2.1 平行运行SBR氨氮，硝态氮变化情况 | 第53-55页 |
| 3.2.1.1 氨氮去除率变化情况 | 第53页 |
| 3.2.1.2 典型周期内氨氮，硝态氮变化情况 | 第53-55页 |
| 3.2.2 SBR系统污泥性状变化情况 | 第55-56页 |
| 3.2.3 供体菌的计数 | 第56页 |
| 3.2.4 总细菌，AOB，RP4质粒的荧光定量PCR分析 | 第56-57页 |
| 3.2.4.1 标准曲线 | 第56页 |
| 3.2.4.2 AOB/总细菌，RP4/总细菌变化情况 | 第56-57页 |
| 3.2.5 SBR系统AOB菌群变化情况 | 第57-60页 |
| 3.2.6 RP4质粒水平转移FISH分析 | 第60页 |
| 3.2.7 氨氧化相关基因转录水平分析 | 第60-63页 |
| 3.3 讨论 | 第63-66页 |
| 3.3.1 RP4质粒对SBR硝化效率的影响 | 第63-64页 |
| 3.3.2 RP4质粒在AOB中的水平转移 | 第64-65页 |
| 3.3.3 RP4质粒对AOB硝化效率影响的机制 | 第65-66页 |
| 3.3.3.1 AOB菌群结构变化 | 第65页 |
| 3.3.3.2 amoA基因和hao基因转录情况 | 第65-66页 |
| 3.4 小结 | 第66-68页 |
| 第四章 结论与展望 | 第68-70页 |
| 4.1 结论 | 第68页 |
| 4.2 主要的创新点 | 第68页 |
| 4.3 建议与展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 附录 | 第76-112页 |
| AOB序列结果 | 第76-77页 |
| 氨氮测定标准曲线 | 第77-78页 |
| 亚硝酸盐氮测定标准曲线 | 第78-79页 |
| 硝酸盐氮测定标准曲线 | 第79-80页 |
| 平行运行反应器的构建-氨氮变化情况重复测量资料的ANOVA | 第80-83页 |
| 平行运行反应器的构建-硝酸盐氮变化情况重复测量资料的ANOVA | 第83-87页 |
| 平行运行反应器的构建-亚硝酸盐氮变化情况重复测量资料的ANOVA | 第87-91页 |
| 平行运行反应器的构建-出水SS变化情况的ANOVA | 第91-93页 |
| 平行运行反应器的构建-SV_(30)变化情况的非参数检验 | 第93-96页 |
| 平行运行反应器的构建-MLSS变化情况的ANOVA | 第96-98页 |
| 干预后-氨氮去除率变化情况的非参数检验 | 第98-99页 |
| 干预后-出水SS变化情况的ANOVA | 第99-101页 |
| 干预后-SV_(30)变化情况的非参数检验 | 第101-102页 |
| 干预后-AOB/总细菌变化情况的ANOVA | 第102-104页 |
| 干预后-RP4/总细菌变化情况的ANOVA | 第104-106页 |
| 干预后-E.coli K12(RP4)Rif数量变化情况的ANOVA | 第106-108页 |
| 干预后-amoA、hao基因转录水平变化情况的ANOVA | 第108-111页 |
| 干预后-H指数变化情况的ANOVA | 第111-112页 |
| 个人简历 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113页 |
