| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第9-15页 |
| 1.1 植物的花色与花青素 | 第9-11页 |
| 1.1.1 类黄酮 | 第9-10页 |
| 1.1.2 花青素 | 第10-11页 |
| 1.2 二氢黄酮醇 4-还原酶基因（DFR）研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3 二氢黄酮醇 4-还原酶基因（DFR）结构 | 第12页 |
| 1.4 二氢黄酮醇 4-还原酶系统进化 | 第12页 |
| 1.5 二氢黄酮醇 4-还原酶底物特异性 | 第12-13页 |
| 1.6 二氢黄酮醇 4-还原酶基因表达特异性 | 第13-14页 |
| 1.7 影响二氢黄酮醇 4-还原酶基因表达的因素 | 第14页 |
| 1.8 本论文研究目的、意义及内容 | 第14-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-19页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第15页 |
| 2.1.2 质粒和和菌种 | 第15页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第15页 |
| 2.1.4 主要试剂的配置方法 | 第15-17页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第17-18页 |
| 2.1.6 引物信息 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-27页 |
| 2.2.1 香雪兰、拟南芥总RNA的提取 | 第19-20页 |
| 2.2.2 香雪兰、拟南芥总RNA的纯化 | 第20页 |
| 2.2.3 香雪兰FhDFRs基因 3’末端的快速扩增 | 第20-21页 |
| 2.2.4 香雪兰FhDFRs基因 5’末端的快速扩增 | 第21页 |
| 2.2.5 香雪兰FhDFRs多基因家族c DNA全长序列的克隆 | 第21-22页 |
| 2.2.6 香雪兰FhDFRs多基因家族的生物信息学分析 | 第22页 |
| 2.2.7 Real time-q PCR及香雪兰FhDFRs基因表达量分析 | 第22-23页 |
| 2.2.8 真核、原核表达载体的构建 | 第23页 |
| 2.2.9 转基因拟南芥突变体表型恢复实验 | 第23-24页 |
| 2.2.10 香雪兰FhDFRs基因原核表达蛋白的制备及纯化 | 第24-26页 |
| 2.2.11 香雪兰FhDFRs体外酶活检测 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-39页 |
| 3.1 香雪兰FhDFRs基因家族的克隆及生物信息学分析 | 第27-31页 |
| 3.2 香雪兰红花各时期花青素与FhDFRs基因表达量相关性分析 | 第31-32页 |
| 3.3 不同光照下FhDFRs基因表达模式分析 | 第32-33页 |
| 3.4 pBI121-FhDFRs和pET28-FhDFRs表达载体的构建结果 | 第33-34页 |
| 3.5 FhDFRs转基因拟南芥结果 | 第34-37页 |
| 3.6 可溶性重组蛋白的制备及其酶活检测 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-43页 |
| 4.1 FhDFRs生物信息学分析 | 第39页 |
| 4.2 FhDFRs表达量与花色苷相关性分析 | 第39-40页 |
| 4.3 不同光照对FhDFRs基因表达量的影响 | 第40页 |
| 4.4 FhDFRs在拟南芥中的遗传转化 | 第40页 |
| 4.5 FhDFRs体外酶活检测分析 | 第40-41页 |
| 4.6 FhDFR2，FhDFR3和FhDFR6的底物特异性是香雪兰花色苷合成的决定因素 | 第41-43页 |
| 5 小结 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
