| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-13页 |
| 1.B19病毒研究现状 | 第8-11页 |
| ·B19病毒的生活史 | 第8-9页 |
| ·B19病毒的免疫学特征 | 第9页 |
| ·B19病毒的流行病学特征 | 第9-10页 |
| ·B19病毒的基因结构 | 第10-11页 |
| 2.本研究的研究方案 | 第11-13页 |
| 实验材料 | 第13-21页 |
| 1. 主要实验仪器 | 第13-14页 |
| 2. 主要实验耗材 | 第14页 |
| 3. 常用试剂 | 第14-15页 |
| 4. 菌株及培养基 | 第15页 |
| 5. 细胞及培养基 | 第15页 |
| 6. 转染质粒及载体 | 第15-17页 |
| 7. 引物 | 第17页 |
| 8. 常用试剂的配置 | 第17-18页 |
| 9. 主要试剂来源与用途 | 第18-21页 |
| 实验方法 | 第21-37页 |
| 第一部分 NS1、VP1和VP2的基因克隆和表达载体的构建 | 第21-26页 |
| 1. NS1、VP1和VP2基因目的片段的获得 | 第21-22页 |
| 2. 目的基因与测序载体连接,验证片段正确性 | 第22-24页 |
| 3. 目的基因与表达载体连接 | 第24-26页 |
| 第二部分 重组质粒的真核表达验证及对Ⅰ型干扰素信号通路的影响研究 | 第26-37页 |
| 1. 重组质粒的大量提取 | 第26-27页 |
| 2. 细胞株复苏和培养 | 第27-29页 |
| 3. 目的基因在mRNA水平的表达及对ISGs的影响 | 第29-31页 |
| 4. 目的基因在蛋白水平的表达及对STAT1磷酸化的影响 | 第31-35页 |
| 5. 目的基因对ISRE活性的影响 | 第35-37页 |
| 实验结果 | 第37-45页 |
| 1. NS1、VP1和VP2测序结果 | 第37页 |
| 2.pcDNA3.1-3tag-NSl，VP1, VP2 质粒的成功构建 | 第37-38页 |
| 3.目的基因在Hela细胞中的高表达 | 第38-41页 |
| 4.pcDNA3.l-3tag-NSl对细胞生成内源性干扰素的影响 | 第41-42页 |
| 5.pcDNA3.1-3tag-NSl 对 STAT1 磷酸化（P-STAT1)的影响 | 第42-43页 |
| 6.pcDNA3.1-3tag-NSl 对 ISRE 的影响 | 第43-44页 |
| 7.pcDNA3.1-3tag-NSl 对其他 ISGs 的影响 | 第44-45页 |
| 讨论 | 第45-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 附录 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 文献综述 | 第52-66页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 个人简历 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
